Скринінгові методи сучасної цитології, такі як рідинна цитологія і метод клітинного блоку, впроваджені для створення умов по стандартизації преаналітичного етапу і забезпечення якості цитологічного дослідження у ветеринарії.
Клінічна цитологія вивчає клітинний склад патологічних процесів. Вона стала невід'ємною частиною клінічного обстеження тварин в практиці ветеринарного лікаря. Цитологічний метод технічно простий, швидкий, порівняно дешевий, малотравматичен і практично безболісно, при його використанні доступна будь-яка локалізація в організмі тварини.
Однак слід зазначити, що успіх цитологічної діагностики, крім кваліфікації цитолога, багато в чому залежить від того, яким чином було отримано матеріал, як він був оброблений, і наскільки точно було складено супровідний напрямок з описом місця локалізації досліджуваного патологічного ділянки. Важливими є й інші моменти преаналітичного етапу до вступу в цитологічну лабораторію.
Преаналітичний етап - один з основних етапів, на якому відбувається (найчастіше неконтрольоване) зниження контролю якості в лабораторній і цитологічної діагностики.
Для створення умов по стандартизації преаналітичного етапу і забезпечення якості цитологічного дослідження впроваджені сучасні методи отримання матеріалу, підготовки і доставки проб.
рідинна цитологія
В останні роки, крім рутинних (класичних) цитологічних мазків на склі, для отримання якісних моношарових цитологічних препаратів використовується рідинна система, як один з методів зниження негативних факторів і недоліків преаналітичного етапу.
Переваги рідинної цитології
Застосування методики рідинної цитології має ряд переваг:
Недоліки рідинної цитології
До недоліків методики рідинної цитології в порівнянні з класичною цитологією можна віднести: трудомісткість методу в разі, якщо він не автоматизовано; високу дорожнечу закритих систем; необхідність в підтвердженні клітинної; можливість спотворень і артефактів клітин в консерванті; спеціальне навчання лікаря-морфолога.
Клінічні випадки застосування методу рідинної цитології
У нашій практиці досліджено 32 гастробіоптатов із застосуванням скринінгових методик (рідинна і класична цитологія) попереднього цитологічного висновку з наступним гістологічним діагнозом. Дані методики дозволяють повідомляти лікаря попередні морфологічні укладення і визначити тактику лікувального процесу до гістологічного висновку.
Клінічний випадок №1
Кот, 12 років, порода: метис.
В анамнезі хронічна блювота. При гастроскопії виявлено набряк слизової з точковими петехіями слизової.
Висновок: хронічний неактивний гастрит з осередкової тонкокишечной метаплазией епітелію.
Рідинна цитологія х400, забарвлення по Папаніколау. Дісрегенератівная диспластична гіперплазія.
Традиційний цитологічний мазок х400 (відбиток), забарвлення Паппенгейма.
Дісрегенератівная диспластична гіперплазія.
Гістологічний препарат х100 (комп'ютерна зшивання). У отечном биоптате в поверхневих відділах слизової є слабо виражена лімфо-плазмоцитарна і гістіоцитарна інфільтрація, вогнищевий фіброз і тонкокишечная метаплазия епітелію.
Клінічний випадок №2
Кот, 9 років, порода: перська.
Новоутворення шкіри 2 × 2,5 см з кістозними порожнинами. Під кістами виявлено ущільнення товщі шкіри. Вироблено пунктирование патологічного ділянки.
Висновок: плоскоклітинний рак (можливо, аденопластіческій варіант). Потрібно фенотипування!
Новоутворення товщі шкіри з кістами.
Рідинна цитологія х400, забарвлення по Папаніколау. Комплекси пухлинних епітеліальних клітин з ознаками помірного поліморфізму, порушеним малюнком хроматину ядра. Характеристики неороговевающего плоскоклітинного раку з кістозної дегенерацією.
Традиційний цитологічний мазок х400 (пунктат), забарвлення Паппенгейма. Ядра клітин слабо поліморфні з ознаками конденсованих хроматину. Велика частина клітин округлої форми, виявлено поодинокі клітини з полігональної формою.
Рідинна цитології уможливлює використовувати клітинний матеріал в наступних дослідженнях методом клітинного блоку (cell-block), при якому виходять препарати, що займають проміжне положення між цитологическими і гістологічними методами морфології.
Клітинний блок (cell-block)
Клітинний блок - це агрегація клітинно-тканинних фрагментів (клаптиків тканини) з наступними виготовленням гістологічного зрізу і забарвленням, що дозволяє виробляти морфологічну оцінку.
Таким чином метод рідинної цитології дозволяє зберегти Тонкоголкова биоптат для гістологічного дослідження.
Клітинні зрізи інтерпретуються по гістологічним критеріям: фрагменти тканинних структур, архітектоніка тканини, яка полегшує оцінку матеріалу за кількома розділами гистогенеза. Як правило, дана морфологічна картина не доступна в цитологічних мазках.
Методика cell-block, розроблена ще в 70-х роках, стала популярна в останні 10 років разом з пошуком і впровадженням стандартів імунологічних забарвлень цитологічних зразків.
В даний час це один з методів, який дозволяє проводити імуногістохімічне дослідження цитологічного зразка в іммуностейнерах (стандартизовані автомати для фарбування мазків, зрізів). Імуноцити (гисто) хімічне дослідження нерідко є вирішальним в диференціальної діагностики новоутворень, коли при рутинному дослідженні виникають непереборні труднощі у встановленні гистогенеза окремих пухлин, визначенні джерела метастазування, трактуванні первинно-множинних уражень.
Переваги клітинного блоку мають додаткову цінність при пошуку безпечних методів діагностики у випадках неоперабельних або виявлених в термінальних стадіях злоякісних пухлин, або при взятті матеріалу з важко досліджуваних ділянок, випотах і ін.
До складнощів в роботі з клітинним блоком можна віднести трудомісткість методики, високу дорожнечу автоматизації і роботизації процесу, необхідність підтвердження клітинної, що вимагає додаткового виготовлення мазка методом рідинної цитології, а також можливість спотворень і артефактів. Крім того, потрібно злагоджена робота цитолога і гістолога.
Клінічні випадки застосування методу клітинного блоку
Уже кілька досліджень, проведених із застосуванням методу клітинного блоку, дозволили зробити щадну діагностику і фенотипування пухлинних процесів з подальшим призначенням хіміотерапевтичного лікування тваринам в різних стадіях пухлинного ураження.
Клінічний випадок №3
Собака, пес, 11 років, порода: той-пудель.
Виявлено новоутворення переднього пакету молочної залози розміром 3х5 см, рухоме, горбисте, безболісне, з гіперемією ділянок шкіри в області соска.
Лімфатичний вузол (2 стеклопрепарата) - матеріал клітинний; серед елементів крові і великої кількості макрофагів поодинокі клітини і солідні комплекси з вираженою атипией, порушенням ядерно-цитоплазматичного співвідношення, численними великими добре вираженими ядерця, глибчатого хроматином, численними фігурами мітозів, в тому числі, патологічних.
Висновок: Цитологічна картина і імунофенотип відповідають низькодиференційований аденокарциноме молочної залози з високим потенціалом злоякісності з метастазом в лімфатичний вузол.
Новоутворення переднього пакету молочної залози розміром 3х5 см.
Рідинна цитологія х400, забарвлення по Папаніколау. Клітинний матеріал представлений поодинокими клітинами і солідними комплексами з ознаками атипії, порушенням ядерно-цитоплазматичного співвідношення, численними великими добре вираженими ядерця, глибчатого хроматином.
Традиційний цитологічний мазок х400 (пунктат), забарвлення Паппенгейма. Представлений поодинокими клітинами, солідними і ацинарних комплексами з вираженою атипией, порушенням ядерно-цитоплазматичного співвідношення, численними великими добре вираженими ядерця, глибчатого хроматином, численними фігурами мітозів, в тому числі, патологічних. Фон: елементи крові, макрофаги, нейтрофільні лейкоцити, плазматичні клітини.
Cell-block х100 (комп'ютерна зшивання), забарвлення гематоксилін-еозином. Поодинокі клітини і солідні комплекси атипових клітин.
Cell-block х100 (імуногістохімія), забарвлення з позитивною експресією АЕ1 / АЕ3 (+++). Негативна експресія Melan A, CD45, Mammaglobin, ER, PR, Chromogranin. Індекс проліферативної активності вище
У сукупності цитологічний метод і cell-block дозволяють в динаміці, не травмуючи пацієнта, вивчати лікувальний патоморфоз при химиолучевой і фотодинамічної терапії.
Клінічний випадок №4
Кішка, 5 років, порода: метис.
Округле новоутворення шкіри в області правого верхнього століття з ділянкою алопеції розмір 4х4 см. Після дренажірованія помічено збільшення і хворобливість. Вироблено пунктирование патологічного ділянки.
Висновок: Мікотіческая гранульома (криптококоз - cryptococcosis).
Округле новоутворення шкіри з ділянкою алопеції розмір 4х4 см.
Рідинна цитологія х400, забарвлення по Папаніколау. Ділянка слизу з грибками, морфологічно схожими з кріптококкамі.
Традиційний цитологічний мазок х400 (пунктат), забарвлення Паппенгейма. Микотические колонії, морфологічно схожі з кріптококкамі.
Cell-block х100 (комп'ютерна зшивання), забарвлення гематоксилін-еозином. Множинні клітини запалення і внутрицитоплазматические включення грибкових тіл в нейтрофілах і макрофагах.
Наш досвід показує, що використання методів рідинної цитології, проведення додаткових цитологічних забарвлень (по Папаніколау), виготовлення клітинних блоків (cell-block) і імуноцитів (гисто) хімічної діагностики, як правило, дозволяє:
- частково стандартизувати цитологічний метод,
- знизити помилки преаналітичного етапу,
- виявити достатні ознаки для постановки більш певного, достовірного висновку.
Онлайн-курси VetCPD по цитології лімфатичної системи
CYTOVET рекомендує: онлайн-курс VetCPD по цитології лімфатичної системи - «Cytology of the Lymphoid System». Після проходження цього курсу ви будете мати знання, необхідні для інтерпретації найбільш поширених станів, що впливають на ...
Школа ветеринарної нефрології та урології Романа Леонарда
Вебінар «Кращі практики: цітодіагностіка в практиці екзотичних тварин»
CYTOVET рекомендує: вебінар «Кращі практики: цітодіагностіка в практиці екзотичних тварин / Best Practices: Cytodiagnosis in Exotic Pet Practice». Вебінар підготовлений ресурсом ветеринарних фахівців з екзотичною твариною LafeberVet. Ведучий вебінару - ...
Перегляд гістологічних препаратів в ветеринарії, або перегляд стекол без стекол
Перегляд стекол - поширене явище в гуманній медицині, що дозволяє знизити відсоток помилкових діагнозів. Його суть полягає в повторному дослідженні мікропрепаратів іншим фахівцем-патоморфологом для отримання незалежного діагнозу в разі, коли лікар ...
Технологія Banana Peels, або Використання бананової шкірки в цитології і гістології
В умовах кризи і не простий економічної ситуації рішення, спрямовані на зниження фінансових витрат, набувають особливого значення. Технологія Banana Peels, освоєна і впроваджена в практику CYTOVET, є одним з таких ...
Пересилання патологічного матеріалу в CYTOVET з регіонів
Оскільки ми в CYTOVET активно працюємо над розширенням географії своїх партнерів і прагнемо надавати якісні послуги з морфологічної діагностики ветеринарним лікарям і клінікам з самих різних регіонів РФ, нерідко виникають ...