Для проведення фундаментальних досліджень в імунології кращий об'єкт - інбредні миші. Інбредні тварини - це тварини, отримані шляхом інбридингу (in breed - виводити породу, розводити), тобто послідовних близькоспоріднених схрещувань з метою отримання гомозиготного і генетично ідентичного потомства. Серед нащадків для подальших схрещувань спочатку відбирають особин за ознаками зовнішньої схожості, в наступних поколіннях вже тестують на збіг груп крові і приживлення шкірних клаптів. Через 20 поколінь і більш такої селекції отримують мишей з вельми високим ступенем гомозиготності, що позначаються як чиста лінія, в межах якої всі тварини генетично майже ідентичні (наприклад, як однояйцеві близнюки у людини).
Головна мета виведення чистих ліній мишей і досліджень на них - отримання можливості багаторазового повторення експериментів на генетично однакових організмах, тобто забезпечення відтворюваності результатів досліджень в найвищому сенсі цього поняття, що повністю виключено при вирішенні багатьох імунологічних завдань з використанням безпородних тварин. Подібні проблеми існують при оцінці результатів імунних процесів у людини.
Миші стали винятковими експериментальним тваринами в імунології в силу ряду причин, головні з яких наступні:
1) короткий термін вагітності (21 діб) і множинне потомство від кожної самки (5-8 дитинчат в одні пологи) дозволяють досить швидко вивести чисті лінії, що важливо за вищезгаданим причин;
2) собівартість утримання мишей у порівнянні з такою інших ссавців найменша;
3) структура і функція імунної системи миші і людини багато в чому схожі;
4) виведення чистих ліній мишей показало, що, наприклад, деякі з них (не дивлячись на гомозиготность) досить міцні і здорові, тобто не всякий інбридинг призводить до виродження.
Крім того, шляхом цілеспрямованого відбору тих чи інших властивостей створені численні лінії мишей з точно заданими характеристиками, і це дозволяє вибирати особин, необхідних для досягнення конкретних наукових цілей. Характеристики тварин різних ліній занесені до відповідних документів; на них орієнтуються розплідники по розведенню чістолінейних мишей, які є в усіх країнах, де успішно займаються проблемами експериментальної імунології. З найбільш прославлених розплідників хочемо згадати джексоновская лабораторію (The Jackson Laboratory) в США. Щорічно вона поставляє в університети, медичні інститути і науково-дослідні лабораторії всього світу приблизно 2 млн тварин 2500 різних ліній, стоків і тварин-моделей. Близько 97% цих тварин можна придбати тільки в Джексонівській лабораторії. У кожному розпліднику розводяться і підтримувані лінії мишей мають паспорт, систематизовані у відповідних базах даних і доступні для широкого застосування. Відомий гаплотип (Н-2) мишей різних ліній, їх забарвлення, поведінкові характеристики, особливості функціонування імунної системи та інші властивості, необхідні не тільки для імунологічних досліджень, а й досліджень в інших областях біології і медицини (онкологія, фармакологія, екологія і т. д.).
Ми наводимо характеристику деяких найбільш відомих ліній мишей, які експериментатори вибирають з тими чи іншими визначеними цілями (табл. 1.1).
C57B1 / 6 (рис. 1.2, див. Також кол. Вклейку) - чорного кольору миші, рухливі, агресивної поведінки.
Balb / c (рис. 1.3) - білі миші з крихким здоров'ям. Однак це найбільш затребувана лінія для гібридомної біотехнології, тому що лінії мієлом, на основі яких отримують гібридоми, ведуть свою «родовід» від перевівной лінії лейкозних клітин МОРС- 21, що походить від мишей Balb / c. Гібридоми добре ростуть в черевній порожнині живих сінгенних мишей у вигляді асцитної пухлин.
Крім власне чистих ліній мишей, генетики навчилися виводити так званих конгенних мишей. Так називають лінії, що відрізняються один від одного невеликою областю генома (іноді одним геном).
В основі виведення конгенних ліній мишей лежить генетичний прийом поворотного схрещування - отримання потомства в ряду поколінь від схрещування гетерозиготи (нащадків гомозиготних батьків, генетично відрізняються між собою) з одним з вихідних гомозиготних батьків. Сенс подібного схрещування - впровадити комплекс Н-2 донорської лінії А в генотип основної лінії В. На малюнку 1.4 представлені донорська маркована лінія А і основна лінія В. Від схрещування гомозиготних особин цих двох ліній отримують гібриди першого покоління F1. (A / b; генерація 1). При подальшому схрещуванні гібридів F1 з особинами основної лінії В отримують потомство, що складається як з гомозигот (b / b), так і гетерозигот (а / b) за комплексом Н-2. У наступних схрещуваннях відбираються тільки гетерозиготні особини, які мають ознаку «а» (Н-2 а), який визначається за приживлення шкірного трансплантата від маркованої лінії A і позитивної серологічної реакції клітин
крові з анти-А-сироваткою. У міру продовження схрещувань а-позитивних особин з особинами основної лінії В частка генома лінії А постійно знижується, але при цьому для подальшого розмноження з потомства відбирають тільки тих особин, які зберігають ознака «а» (H-2 a). До дванадцятого покоління (генерація. 12) практично весь геном відбираються після гібридизації мишей представлений основною лінією В, за винятком ознаки «а», по якому йшов відбір. Подальше завдання полягає в перекладі ознаки «а» в гомозиготний стан. Для цієї мети гетерозигот (а / b) схрещують між собою і відбирають для подальшого розмноження тільки тих особин з потомства, які відкидають шкірний трансплантат, взятий від особин лінії В, і не дають реакції з анти-В-сироваткою. Подібний відбір виявляє особин з відсутністю ознаки «b» (H-2 b) і гомозиготность за ознакою «а» (H-2 a). Таким чином, в результаті застосування даної схеми схрещування в геном основної лінії В впроваджується комплекс Н-2 маркованої лінії А (рис. 1.4). З моменту переведення комплексу H-2 a в гомозиготний стан констатується отримання нової конгенной (по відношенню до основної) лінії В (Klein J. 1975).