Посів Пастерка в боксі біозахисту II класу на щільні середовища
Для посівів [2] застосовують мікробіологічні петлі, рідше - голки і шпателі. Найчастіше для культивування використовуються пробірка і чашка Петрі. Універсальним інструментом для засіву культури є бактеріальна петля. Крім неї, для посіву уколом застосовують спеціальну бактеріальну голку, а для посівів на чашках Петрі - металеві або скляні шпателі. Для посівів рідких матеріалів поряд з петлею використовуються градуированная і пастеровская піпетки.
2.1. Посів на щільні поживні середовища (в пробірці)
При посіві беруть пробірку в ліву руку, а правою, щільно обхопивши пробку четвертим і п'ятим пальцями, виймають її. Утримуючи іншими пальцями тієї ж руки петлю, в вертикальному положенні її вносять у відкрите полум'я і пропалюють до червоного розжарювання. Остигнула петлею набирають посівний матеріал, після чого закривають пробірку пробкою, попередньо проносячи її над полум'ям спиртівки. Потім в пробірку зі скошеним агаром вносять петлю з посівним матеріалом, опускаючи її до конденсату в нижній частині середовища, і зигзагоподібним рухом розподіляють матеріал по скошеної поверхні агару. Вийнявши петлю, обпалюють край пробірки і закривають її корком. Петлю стерилізують в полум'ї пальника і ставлять в штатив рукояткою вниз. Пробірки з посівами підписують заздалегідь. вказуючи дату посіву, номер дослідження і назва культури.
2.2. Посів на тверді поживні середовища (в чашці Петрі)
Посіви «газоном» виробляють на щільну живильне середовище в чашці Петрі. Для цього, відкривши лівою рукою кришку, петлею або піпеткою наносять посівний матеріал на поверхню поживного агару за методом Дрігальского. Після інкубації посіву з'являється рівномірний суцільний ріст бактерій з поділом їх на колонії. Ідентифікацію виділених бактеріальних культур проводять шляхом вивчення морфології бактерій, їх культуральних, біохімічних та інших ознак, притаманних кожному виду.
Колонія - це видиме ізольоване скупчення представників одного виду мікроорганізмів, що утворюється при розмноженні однієї колонієутворюючих одиниць (КУО) на щільному живильному середовищі (на поверхні або в глибині її). Колонії бактерій різних видів відрізняються один від одного по своїй морфології, кольором та іншими культуральним ознаками.
3. Культуральная диференціювання мікроорганізмів
Колонії [3] можуть бути різними за величиною, формою, кольором, консистенції, контуру краю, структурою і характером поверхні:
- за величиною - великі (діаметр більше 4-5 мм), середні (2-4 мм) і малі (1-2 мм)
- за формою - круглі, розеткообразние, листоподібні і т. д.
- за кольором, залежному від пігменту - білого, яскраво-синього, червоного кольорів і т. д.
- по консистенції - сухі, вологі, соковиті, слизові
- по поверхні - гладкі, зморшкуваті, смугастих, плоскі, опуклі, плосковипуклой, вдавлені
- по краю - з рівними, хвилястими, торочкуватими краями
- за структурою - можуть мати аморфну, зернисту, волокнисту внутрішню структуру
- в чистій культурі, вирощеної на скошеному поживному агарі, характер росту може бути сухим, вологим, повзучим, складчастим, пигментированним
В рідкому поживному середовищі одні бактеріальні культури дають дифузне помутніння, інші характеризуються придонних, пристінковим зростанням. Деякі культури утворюють плівки на поверхні середовища, інші - осад на дні пробірки.
Культивування анаеробів значно відрізняється від культивування аеробів: так як атмосфера містить значну кількість кисню, для його видалення із середовища застосовують спеціальні техніки посіву, середовища і анаеростатах [3].