Застосовують наступні методи консервація вірусів:
1) при зберіганні щільного вірусного матеріалу (шматочки органів або тканин) часто використовують гліцерин (50% -ний розчин на фізіологічному розчині), який має бактеріостатичну дію і в той же час захищає віруси. У цьому випадку вірус можна зберігати при 4 ° С кілька місяців;
2) найчастіше віруси зберігають в холодильниках, що забезпечують температуру мінус 20, мінус 30, мінус 70 ° С. При цій температурі деякі віруси без добавки захисних речовин порівняно швидко втрачають інфекційність. Відомо, що чим менше білка в віруссодержащей суспензії, тим менше стабільність вірусів, тому очищені віруси швидко втрачають свою біологічну активність. Гарне захисну дію при заморожуванні і зберіганні вірусів надає добавка одного з наступних компонентів: інактивованої сироватки крові, знежиреного молока (від 10 до 30%), желатину (0,5-1,5%), ДМСО (10%) і ін. При швидкому заморожуванні вірусу до мінус 196 ° с (рідкий азот) з подальшим зберіганням при цій температурі титр вірусу протягом декількох місяців не знижується. Віруси, чутливі до низьких значень рН, слід заморожувати в рідинах, що не містять однозаміщені фосфатів (NaH2 PO4 або КН2 РО4), які володіють кислою реакцією і мають більш низьку точку замерзання, ніж двузамещенного фосфати (Na9 HPO4 або К2 НРО4) з лужною реакцією.
Швидкість відтавання вірусу істотно не впливає на його активність. Розморожувати віруси можна як при кімнатній температурі, так і в водяній бані при температурі 37 ° С. Щоб уникнути частого заморожування і відтавання одного і того ж віруссодержащего матеріалу необхідно зберігати його маленькими порціями, достатніми для одноразового титрування або використання, наприклад для реакції нейтралізації;
3) лиофилизация, т. Е. Висушування в замороженому стані в умовах вакууму, - дуже хороший спосіб консервування вірусів. Для ліофілізації необхідні відповідна апаратура, певний (в залежності від виду вірусу) наповнювач і ретельне виконання процедури сушіння. На стійкість лиофилизированного вірусу впливає не тільки вибір відповідного наповнювача, але і склад газу в ампулі (вже 0,5% кисню викликають швидку загибель вірусу, в той час як вологість в межах 2-3% істотно не впливає) і температура зберігання ліофілізату - НЕ вище 4 ° С. Ліофілізацію краще проводити в установах, добре знайомих з цією методикою. У лиофилизированном вигляді віруси можуть зберігатися кілька років.
Вірусологічна лабораторія повинна мати таку документацію:
- журнал вірусологічних досліджень (експертиз, сільгоспоблік, форми № 13-вет);
- журнал обліку заражених тварин;
- журнал обліку виділених вірусів і їх знищення;
- журнал обліку руху виробничих або музейних штамів та інші книги обліку відповідно до затвердженої інструкції.
1. Ознайомитися з вірусологічної лабораторії і її основним обладнанням.
2. Вивчити правила роботи з вируссодержащим матеріалом.
Самостійна робота студентів:
а) підготовка боксу для роботи;
б) відпрацювання навичок роботи з піпеткою і стерильними інструментами;
в) вивчення документації лабораторії.