Методи створення анаеробних умов

1) Фізичні методи. Методи засновані на вирощуванні мікроорганізмів в середовищі без повітря

• Посів в середовища, які містять редуцирующие і легко окислюються речовини:

Кращою рідким живильним середовищем з редуцирующим речовинами є середовище тиогликолевая, яка використовується для накопичення анаеробів при первинному посіві з досліджуваного матеріалу і для підтримки зростання вирощеної чистої культури анаеробів.

• Посів мікроорганізмів в глибину щільних поживних середовищ.

Посів уколом. П ріменяется для вирощування анаеробів або виявлення характерної ознаки мікроба, так як зростання по уколу типовий для ряду бактерій і тривалого зберігання культур. При посіві уколом в пробірку з прямим агаром або стовпчиком желатин тримають дном догори, виймають пробку і обпалюють край пробірки. Матеріал, що містить мікроби, забирають простерилизованной на полум'я довжиною абсолютно прямий платинової голкою і проколюють нею стовпчик живильного середовища від низу до верху майже до самого дна пробірки. Виймають голку, обпалюють край пробірки і пробки, закривають пробірку, пропалюють голку, щоб поставити його в підставку, підписують пробірку і поміщають в штатив.

• Механічне видалення повітря з судин, в яких вирощуються анаеробні мікроорганізми

Видалення повітря виробляють шляхом його механічного відкачування зі спеціальних приладів - анаеростатах, в які поміщають чашку з посівом анаеробів. Переносний анаеростатах є товстостінний металевий циліндр з добре притертою кришкою (з гумовою прокладкою), забезпечений відводить краном і вакуумметром. Після розміщення засіяних чашок або пробірок повітря з анаеростатах видаляють за допомогою вакуумного насоса.

• Заміна повітря в посудині будь-яким індиферентним газом

Заміну повітря індиферентним газом (азотом, воднем, аргоном) можна виробляти в тих же анаеростатах шляхом витіснення його газом з балона.

2) Хімічні методи засновані на поглинанні кисню повітря в герметично закритій посудині (анаеростатах, ексикаторі) такими речовинами, як пирогаллол або гідросульфіт натрію

3) Біологічні методи засновані на спільному вирощуванні анаеробів зі

строгими аеробами (метод Фортнера)

Для цього із застиглої агарної платівки по діаметру чашки вирізають стерильним скальпелем смужку агару шириною близько 1 см. Виходить 2 агарових напівдиска в одній чашці. На одну сторону агарної платівки засівають аероб, наприклад, часто використовують Staphylococcusaureus або Serratiamarcescens. На іншу сторону засівають анаероб. Краї чашки заливають розплавленим парафіном і поміщають в термостат. При наявності відповідних умов в чашці почнуть розмножуватися аероби. Після того як весь кисень в просторі чашки буде ними використаний, почнеться зростання анаеробів (через 3-4 діб). З метою скорочення повітряного простору в чашці живильне середовище наливають можливо більш товстим шаром.

4) Комбіновані методи засновані на поєднанні фізичних, хімічних і біологічних методів створення анаеробіозу

Схожі статті