Анаероби - це мікроорганізми, для життєдіяльності яких не потрібний О2 повітря.
Методи посіву, культивування і виділення чистих культур анаеробів:
- ПОСІВ МАТЕРІАЛУ В ГЛИБИНУ щільне ПС. Посів роблять шляхом «уколу» бак голкою або петлею (змоченою досліджуваним матеріалом) в пробірку зі стовпчиком щільною середовища (з високим стовпчиком сахарозний агару). Або ведуть посів в розплавлену щільну або напіврідку живильне середовище з наступним перемішуванням. В даному випадку зростання повинен відбуватися в нижніх шарах агару (там менше О2).
- МЕТОД КОХА (МЕТОД ГЛИБИННОГО ПОСІВУ). Поверхня глибинного посіву в чашці Петрі заливають стерильною сумішшю парафіну і вазеліну (1: 1). Закривають гумовою пробкою. Щоб витягти виросли колонії (анаеробів), пробірки злегка нагрівають. Агар, що прилягає до стінок, розплавляється, і стовпчик легко вислизає в підготовлену чашку Петрі. Далі стовпчик з агаром розрізають стерильним скальпелем, колонії витягають стерильною петлею і переносять в рідку середу.
- ВИКОРИСТАННЯ редукує, окислюються речовини та олії. Ці речовини додають в живильне середовище. Редуцирующими (зв'язують) речовинами є: шматочки тваринних тканин (печінки, шкіри, серця, кісткового мозку), шматочки рослинних тканин, шматочки вати, тиогликолят натрію, солянокислий цистеїн. Окислюючими речовинами (антиоксидантами) є глюкоза. Приклади середовищ: Китта-Тароці (там МППБ - м'ясо-пептони печінковий бульйон + шматочки вареної печінки + шар маславазеліновийм або парафіновим, все стерильно).
- МЕТОД Віньяль-ВІОНА. При цьому методі використовують спеціальні скляні трубочки (піпетка Пастера). В трубочки насмоктують розплавлений агар (змішаний з иссл матеріалом). Трубочку запаюють з 2-х кінців. Культивують. У стерильних умовах трубочку розкривають, витягають колонії бак петлею.
- МЕТОД З ВИКОРИСТАННЯМ СПЕЦІАЛЬНИХ ПРИЛАДІВ І АПАРАТІВ (анаеростатах І Ексикатор).
- МЕТОДИ культивування анаеробів в атмосфері інертного ГАЗУ, ДІОКСИДУ ВУГЛЕЦЮ, азоту.
II. ХІМІЧНІ МЕТОДИ. Ці методи засновані на застосуванні різних хімічних речовин, в результаті взаємодії речовин відбувається хімічна реакція з активним поглинанням О2 повітря.
- ВИКОРИСТАННЯ ПРОСТОЇ ХІМІЧНОГО Ексикатор. У ексикатор кладуть 1 шматочок вати, змочений 96% спиртом. Ватку підпалюють. Ексикатор закривають. У процесі горіння спирту, О2 згорить.
- МЕТОД АРІСТОВСКОГО. У 2 кришки від чашки Петрі насипають порошок вуглекислої соди, на який насипають гидросульфид Na. До цих речовин додають трохи води. Одну кришку ставлять на дно анаеростатах, ексикатора, далі поміщають посіви, над якими ставлять 2-ю кришку з хімічною речовиною.
- МЕТОД Фортнера. При спільному культивуванні анаеробів і аеробів в чашці Петрі, створюються анаеробні умови за рахунок того, що аероби ростуть першими і поглинають О2, наявний в чашці. Чашка повинна бути запали парафіном.
- ПОСІВ ПО ЦЕЙСЛЕРУ. Беруть 3 чашки Петрі з глюкозо-кров'яним агаром, в 1-ю чашку наносять краплю иссл матеріалу, потім шпателем (бак петлею) матеріал розмазую по поверхні. Надалі не обробляючи петлю із залишками матеріалу роблять посів на 2-ю чашку. Посів поміщають в ексикатор і культивують.