Матеріалом для дослідження є зішкріб зі слизової оболонки носа, шкірні лепрозні вузли, пунктат лімфатічес-ких вузлів, харкотиння та ін.
Мікроскопічний метод є основним у лабораторній діагностиці прокази, так як доступних методів культивування збудника прокази не розроблено. Єдиним методом культивування збудника прокази є зараження екзотичних тварин - броненосців. В мазках з патологічного матеріалу, взятого від хворого на проказу, паличка прокази (Mycobacterium leprae) пріокраске за методом Циля-Нільсенаокрашівается в рубіново-червоний колір і розташовується у вигляді пачок сигар.
При витівці можна поставити шкірну алергічну пробу з лепромін (реакція Міцуда), проте діагностичного значення ця реакція не має і застосовується для характеристики клінічного перебігу хвороби.
Лабораторна діагностика менінгококової інфекції
Збудниками менінгококової інфекції є менінгококи (Neisseria meningitidis). Методи лабораторної діагностики менінгококової інфекції представлені в схемі 16. З огляду на високу нежиттєздатність менингококка у зовнішньому середовищі, дослідження на менінгокок виконують якомога швидше.
Схема 16. Лабораторна діагностика менінгококової інфекції
Мікроскопічний метод. Мазки з осаду спинномозкової рідини фарбують за Грамом і проводять мікроскопію. При наявності гною і виявленні всередині лейкоцитів грамнегативних диплокок-ков у вигляді «бобів» або «кавових зерен», звернених увігнутою
стороною один до одного, дозволяє зробити позитивний висновок про наявність у пацієнта менінгококової інфекції (рис. 22).
Мал. 22. менінгокок (Neisseria meningitides) в спинно-мозкової рідини хворої на епідемічний цереброспінальної менінгіт (а) і в чистій культурі (б). Забарвлення по Граму. х630
Мікроскопічне дослідження мазків з носоглотки бактерієносіїв дає можливість виявити поряд з менингококком стафілококи, стрептококи і непатогенні нейсерії (Moraxella spp. Та ін.), Дифференциро-вать які за морфологічними і тинкторіальними властивостям практично неможливо.
Бактеріологічний метод. Досліджуваний матеріал засівають петлею на чашки з сироватковим МПА, що містить антибіотики (ристомицин, ванкоміцин, колістин і ніста-
тин) для пригнічення росту супутньої мікрофлори (переважно коків). Асцитичної рідина в якості добавки до живильних середовищ на даний час не
Типові для менингококка колонії пере-сівби в пробірку зі скошеним сироватковим МПА для виділення чистої культури. Ідентифікацію чистої культури менінгокока, її диференціацію від сап-рофітних нейссерий, що мешкають в носоглотці, проводять на підставі вивчення комплексу біологічних властивостей (табл. 18).
Таблиця 18.Основние біологічні властивості нейссерий
Позначення: (+) - наявність ознаки, (-) - відсутність ознаки, (±) - непостійний ознака, К - утворення кислоти
Специфічні-кий полісахаридних менінгококовий антиген можна виявити в спинномозковій рідині за допомогою методу зустрічного іммуноелектрофореза в гелі. З цією метою в агарових гелі на скляних пластин-ках, розміром 9x12 см, вирізують два паралельних ряди лунок діаметром 3 мм. В лунки одного ряду вносять досліджуваний ліквор, в лунки іншого - преципитирующие сироватки проти менінгококів різних серогрупи. Пластинки поміщають в апарат для іммуноелектрофореза на 40-45 хв при кімнатній температурі. Позитивний результат характеризується появою 1-2 смужок преципитации між лунками з спинномозковою рідиною і відповідної антисироваткою.
Генодіагностика. Досліджуваний матеріал використовують для виявлення ДНК збудника за допомогою ПЛР, що дає підставу в разі отримання позитивного результату поставити попередній діагноз.
Серодиагностика. Для ретроспективного підтвердження діа-гноза використовують РНГА з парними сироватками.
Експрес-методи діагностики. Для виявлення антигенів менінгококів в мазках з досліджуваного матеріалу использу-ють ІФМ, а також непряму латекс-агглютіна-цію і РНГА з анти діагностикумами.
Самостійна робота студентів
1. Мікроскопічний метод. Вивчення морфології менинго-кока в мазках з ліквору хворого з підозрою на менінгококову інфекцію (демонстрація). Характерна наявність грамнегативних диплококков, розташованих усередині лейко-цитов.
2. Бактеріологічний метод. Облік культуральних властивостей менингококка на сироватковому МПА з ристоміцином. Колонії ме-нінгококков прозорі з блакитним відтінком, рівні, дрібні (з шпилькову головку). Вивчити біохімічні властивості менінгококів відповідно до таблиці.
3. Врахувати демонстраційну РНГА з парними сироватками хворого (7 і 14 дні хвороби) з підозрою на менінгококову інфекцію.
4. Біопрепарати для діагностики та профілактики менінгококової інфекції:
· Вітчизняна хімічна вакцина полисахаридная менінгококова вакцина груп А і С. Застосовується за епідеміологічними показниками. У Росії зареєстровано також кубинська В + С менінгококова вакцина, що складається з білків менінгококів групи В і полісахаридів менінгококів групи С, а також поліса вакцина МенінгоА + С фірми Пастер Мерье Коннот;
· Агглютинирующие і преципитирующие сироватки проти менінгокока, застосовуються з діагностичною метою для постановки РА з метою серологічного типування менінгококів і зустрічного іммуноелектрофореза для виявлення менінгококового антигена в спинно-мозкової рідини.
· Еритроцитарні антитільної менінгококової діагностикуми для виявлення антигенів менінгококів в спинномозковій рідині за допомогою РНГА.