Колориметричний метод визначення глюкози в сечі за Альтгаузену
Принцип методу: при нагріванні глюкози з лугом з'являється кольорова реакція.
До 4 мл сечі доливають 1 мл 10% натрію гідроксиду і кип'ятять 1 хв. Через 10 хв після кип'ятіння колір рідини порівнюють з кольоровою шкалою, на якій біля кожної забарвленої смуги вказаний відсоток вмісту глюкози. Краще користуватися шкалою, приготовленої
за допомогою реактивів. Для цього беруть 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 3,0 і 4,0% розчини глюкози, обробляють їх так само, як і досліджувану пробу сечі і щільно закривають пробками. Колір цих розчинів не змінюється приблизно 10 днів.
Метод Альтгаузена дає орієнтовні результати і тому їм можна користуватися при відсутності поляриметра.
Винятковою простотою виконання відрізняється модифікований метод Альтгаузена, який не вимагає дефіцитних реактивів і займає мало часу.
Принцип модифікованого методу Альтгаузена: при нагріванні сечі, що містить глюкозу, з розчином їдкого лугу змінюється колір вмісту пробірки.
Приготування розведень для побудови калібрувального графіка визначення глюкози в сечі за модифікованим методом Альтгаузена
Кількість 8% розчину глюкози, мл
4 мл досліджуваної сечі змішують з 1 мл 10% розчину їдкого натру і ставлять в киплячу водяну баню на 3 хв. Через 10 хв пробу колоріме-Трір на ФЕК із зеленим світлофільтром в кюветі з робочою шириною 5 мм. В якості контролю беруть воду. Кількість цукру в сечі знаходять по калібрувальної кривої, для побудови якої готують 8% стандартний
розчин глюкози, з якого потім необхідно приготувати на прозорій сечі з низькою відносною щільністю 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 4,5; 5,0% розчини глюкози по схемі, представленої в табл. 9: з кожного розведення беруть по 4 мл розчину, додають по 1 мл 10% розчину їдкого натру і обробляють як досвідчені проби. Визначають оптичну щільність в кожному відповідному розведенні і будують графік. Для зручності роботи за графіком складають таблицю. Слід пам'ятати, що сечу перед визначенням глюкози необхідно перемішати і при високих концентраціях глюкози в пробі (4-5%) її необхідно розвести. Кольорова реакція з ортотолуідіном