Визначення кількості еритроцитів

Визначення кількості еритроцитів

Метод підрахунку в рахунковій камері. Кров попередньо розводять з метою зменшення числа клітин, що підлягають рахунку. В хімічні пробірки відмірюють піпеткою по 4 мл 3% -ного розчину хлориду натрію і обережно видувають в неї 0,02 мл капілярної крові (кров забирають піпеткою від гемометра Салі). Отримане розведення можна практично прийняти рівним 1. 200. Взвесь ретельно перемішують і потім заповнюють камеру з сітками Горяєва. Сітка Горяєва складається з 225 великих квадратів (15 ґ 15). Великі квадрати, розкреслені вертикально і горизонтально на 16 малих квадратів, чергуються з квадратами, розділеними тільки вертикальними або горизонтальними лініями, і з квадратами чистими, без ліній. Глибина камери дорівнює 1/10 мм, сторона малого квадрата - 1/20 мм; обсяг малого квадрата дорівнює 14 000 мм 3.

Перед заповненням камеру і шліфоване покривне скло миють і сушать. Покривне скло притирають до камери так, щоб з'явилися райдужні кільця. Краплю розлученою крові вносять піпеткою під притерте покривне скло камери. Після заповнення камеру залишають на 1-2 хв в спокої для осідання формених елементів, потім приступають до підрахунку при малому збільшенні мікроскопа в затемненому полі зору (прикритої діафрагмі і опущеному конденсорі).


Еритроцити вважають в 5 великих квадратах (5 ґ 16 = 80 малим квадратах), розташованих по діагоналі. Для цього шукають лівий верхній великий розграфлений квадрат, підраховують кількість знаходилися в ньому еритроцитів, потім по діагоналі вниз і направо знаходять наступний такий квадрат і т.д. Для того щоб двічі не злічити одні й ті ж клітини, що лежать на прикордонних лініях, дотримуються правило: до цього квадрату належать клітини, що знаходяться більшою своєю частиною всередині нього, розділені прикордонної лінією; вважають тільки на верхній і лівій межі квадрата.

Кількість еритроцитів в 1 мл крові розраховують шляхом ділення твори з числа полічених еритроцитів (а), 4000 (приведення до обсягу 1 мкл крові) і 200 (ступінь розведення) - а ґ 4000 ґ 200 ґ 80 (кількість малих квадратів). При взаімосокращеніі виходить твір - а ґ 10 000, тобто число підрахованих еритроцитів в 5 великих квадратах на 10 000. Помилка методу в середньому дорівнює ± 2,5%.

Електронно-автоматичний метод. Найбільшого поширення знайшов імпульсний принцип, заснований на різниці електропровідності частинок крові і рідини, використовуваної для розведення.


На ньому працюють лічильники "Целлоскоп" (Швеція) і "Культера" (Франція).

Кров'яні тільця, зважені в фізіологічному розчині хлориду натрію, всмоктуються через мікроотвір діаметром 100 мкм, з обох сторін якого підведено по одному платинового електроду. Стрибкоподібні підвищення опору, що виникають при проходженні частинок крові через капіляр, викликають електричні імпульси, амплітуда яких прямо пропорційна обсягу частинок. Імпульси посилюються, підраховуються в електронному пристрої. Продуктивність апаратів цього типу велика: весь процес від введення зразка до отримання результату відбувається протягом 20 сек. при помилку 1-2%.

Схожі статті