Винахід відноситься до ветеринарії, зокрема, у виробництві і застосуванні біологічних препаратів для вакцинації сільськогосподарських тварин і призначається для одночасної специфічної профілактики сибірки та емфізематозного карбункула (емкара). Асоційовану вакцину готують з сибиреязвенного штаму 55-ВНІІВВіМ в кінцевій концентрації 2,0 - 2,5 10 9 суперечка в 1 см 3 і вакціонного штаму карбункула 2/14 в кінцевій концентрації 2,0 - 2,1 10 9 клітин в 1 см 3 . Для профілактики сибірської виразки і емкара у тварин використовують асоційовану вакцину, яка містить зазначені штами. Вакцину вводять підшкірно в області середньої третини шиї великій рогатій худобі в віці від 3 до 6 місяців в дозі 1,0-1,1 см 3. старше 6 місяців - 2,0 - 2,1 см 3. Вакцина має високу імуногенність, ареактогенностью , не впливають і створює більш тривалий і напружений імунітет до сибірки і емкару. 2 с. п. ф-ли, 2 табл.
Винахід відноситься до ветеринарії, зокрема, у виробництві і застосуванні біологічних препаратів для вакцинації сільськогосподарських тварин і призначається для одночасної специфічної профілактики сибірки та емфізематозного карбункула (емкара).
Відома жива асоційована вакцина проти сибірської виразки і емфізематозного карбункула, що представляє собою суміш спорової культури авірулентние штаму Bac. anthracis 55-ВНІІВВіМ і клітин вакцинного штаму Cl. chauvoei 2/14 [1]. Вакцина містить в своєму складі 20 млн / см 3 сибіркових суперечка і 1-2 млрд / см3 мікробних клітин емфізематозного карбункула. Тривалість імунітету до сибірки і емкару у великої рогатої худоби (ВРХ), щепленого асоційованої вакциною, становить 12 місяців.
Недоліком даної вакцини є невелика тривалість імунітету у щеплених тварин як до сибірки, так і до емкару (12 місяців).
Пропонована жива асоційована вакцина проти сибірської виразки і емкара усуває цей недолік за рахунок більш високого вмісту обох компонентів.
Мета винаходу - виготовлення асоційованої вакцини проти сибірської виразки і емкара, що володіє високу імуногенність, ареактогенностью, нешкідливістю, що створює більш тривалий і напружений імунітет до сибірки і емкару, і спосіб профілактики цих захворювань.
Мета досягається використанням більш високий вміст спор сибиреязвенного авірулентние штаму 55-ВНІІВВіМ і клітин вакцинного штаму емфізематозного карбункула 2/14 в складі живої асоційованої вакцини проти сибірської виразки і емкара.
В результаті проведених експериментів встановлено, що пропонована жива асоційована вакцина проти сибірської виразки і емкара, виготовлена з штамів Bac. anthracis 55-ВНІІВВіМ і Cl.chauvoei 2/14. створює у одноразово щеплених тварин більш напружений і тривалий імунітет до обох інфекцій, ніж відома.
Показано (табл. 1), що збільшення в порівнянні з прототипом змісту сибіркових суперечка в асоційованої вакцини до 2,0 10 7 - 2,5 10 7 в 1 см 3. дозволяє створити у великої рогатої худоби імунітет до сибірки тривалістю 18 місяців ( термін спостереження).
Так, через 18 місяців після імунізації відомої асоційованої вакциною (прототип) виживаність тварин після зараження вірулентним штамом N 76 сибірської виразки становила 80%, тоді як при вакцинації пропонованої вакциною цей показник дорівнював 100%. Всі нещеплені тварини впали після зараження сибірською виразкою.
Збільшення вмісту клітин клостридий в асоційованої вакцини до 2,0 - 2,1 10 9 в 1 см 3 створює більш тривалий і напружений імунітет до емкару (табл. 2).
Виживання щеплених тварин при зараженні вірулентним штамом R-15 збудника емкара через 18 місяців склала 60% при імунізації відомої вакциною, 100% при імунізації пропонованої вакциною. Всі нещеплені тварини впали після зараження емкаром.
Пропонована асоційована вакцина ареактогенна і нешкідлива для ВРХ, кролів та морських свинок і створює більш тривалий і напружений імунітет до емкару і сибірку в порівнянні з прототипом.
Для підтвердження імуногенності і ареактогенності нової асоційованої вакцини проти сибірської виразки і емкара в трьох господарствах Володимирській і Московської областей були вакциновані 320 голів великої рогатої худоби. Поствакціональних ускладнень не спостерігалося ні у однієї тварини. Після зараження великої рогатої худоби через 18 місяців вірулентним штамом N 76 сибірської виразки з 10 щеплених асоційованих вакциною тварин вижили 10, при зараженні вирулентной культурою R-15 збудника емкара виживаність також склала 100%. Всі нещеплені тварини (контроль) впали після зараження сибірською виразкою (6 з 6 заражених), так само, як і після зараження емкаром (10 з 10 заражених тварин). Отримані результати підтверджені актом комісійних випробувань.
Отже, пропонована асоційована вакцина проти сибірської виразки і емкара є імуногенним препаратом, здатним захищати тварин одночасно від сибірської виразки і емкара, і по напруженості і тривалості імунітету перевершує раніше відому. Пропонована жива асоційована вакцина проти сибірської виразки і емкара з штамів 55-ВНІІВВіМ і 2/14 нешкідлива, ареактогенна, створює напружений імунітет у великої рогатої худоби тривалістю 18 місяців (термін спостереження).
Для профілактики сибірської виразки і емкара у тварин асоційовану вакцину вводять підшкірно в області середньої третини шиї в дозі 1,0 - 1,1 см 3 - телятам у віці від 3 до 6 місяців, тваринам старше 6 місяців - в дозі 2,0 - 2 , 1 см 3.
Використання асоційованої вакцини у ветеринарній практиці дає можливість скоротити число профілактичних щеплень і тим самим зменшити рівень стресового впливу на організм тварин, а також знизити собівартість і трудомісткість вакцинації сільськогосподарських тварин.
Приклад 1. Живу асоційовану вакцину проти сибірської виразки і емкара готували наступним чином: до 96 см 3 суспензії клітин вакцинного штаму Cl. chauvoei 2/14 з концентрацією 2,1 10 9 клітин в 1 см 3 додають 1,0 см 3 суперечка сибиреязвенного вакцинного штаму 55-ВНІІВВіМ з вихідної концентрацією 2,5 10 9 суперечка в 1 см 3 і доводять об'єм фізіологічним розчином до 100 см 3. Суміш ретельно перемішують.
Вакцина являє собою однорідну рідину жовтувато-сірого кольору, при зберіганні на дні флакона утворюється пухкий осад, який при струшуванні перетворюється в однорідну суспензію.
Приклад 2. Живу асоційовану вакцину проти сибірської виразки і емкара застосовують для профілактики і вимушених щеплень клінічно здорових тварин старше 3 місяців. Препарат вводять підшкірно в області середньої третини шиї телятам у віці від 3 до 6 місяців - в дозі 1,0 см 3. старше 6 місяців - 2,0 см 3.
1. Вакцина проти сибірки і емфізематозного карбункула, асоційована з штамів Bacillus anthracis 55-ВНІІВВіМ і Clostridium chauvoеi 2/14, яка відрізняється тим, що вона містить суспензію суперечка сибиреязвенного вакцинного штаму в вихідної концентрації 2,0 - 2,5 10 9 суперечка в 1 см 3 і 2,0 - 2,1 10 9 життєздатних клітин вакцинного штаму Cl.chauvoеi 2/14 в 1 см 3 і фізіологічний розчин при наступних співвідношеннях компонентів, мас.%: Суперечки сибиреязвенного штаму 55-ВНІІВВіМ з вихідної концентрацією 2, 0 - 2,5 10 9 суперечка в 1 см 3 - 1,0 - 1,1 Суспензія клітин вакцинного штаму Cl. chauvoеi 2/14 з вихідної концентрацією 2,0 - 2,1 10 9 клітин в 1 см 3 - 95,0 - 97,0 Фізіологічний розчин - Все інше 2. Спосіб профілактики сибірки та емфізематозного карбункула, що відрізняється тим, що вводять підшкірно в область середньої третини шиї великій рогатій худобі в віці від 3 до 6 місяців 1,0 - 1,1 см 3. старше 6 місяців - 2,0 - 2,1 см 3 асоційованої вауціни, що містить, мас.%: Суперечки сибиреязвенного штаму 55 -ВНІІВВіМ з вихідної концентрацією 2,0 - 2,5 10 9 суперечка в 1 см 3 - 1,0 - 1,1 Суспензія клітин вакцинного штаму Cl. chauvoеi 2/14 з вихідної концентрацією 2,0 - 2,1 10 9 клітин в 1 см 3 - 95,0 - 97,0 Фізіологічний розчин - Остальное1