Титр - це кількість вірусу, що міститься в одиниці об'єму матеріалу. З локальних пошкоджень, що викликаються вірусами, найбільш відомі бляшки і оспини на ХАО КЕ. Якщо є дані зворотні то інфекційна активність вірусу може бути виміряна в бляшкообразующіх одиницях (БОЮ) або оспообразующіх одиницях (оое) 1БОЕ = дозі вірусу, здатної викликати утворення однієї бляшки, а одна оое - однієї оспини. Методи: заражають кілька КК або КЕ на ХАО. Вираховують середнє арифметичне кількість віспинами або бляшок. Воно = БОЮ або оое вірусу. Розраховують скільки БОЮ або оое доводиться на одиницю об'єму віруссодержащего матеріалу. Це і є титр. Т = n / Va, де n-середовищ арифметичне бляшок або віспинами, а -розведення матеріалу, V - введена доза. Метод 50% -ного інфекційного дії. За одиницю кількості вірусу приймається доза, яка здатна викликати інфекційний ефект у 50% заражених. Число таких доз в одиниці матеріалу і буде висловлювати титр вірусу в цьому матеріалі. Готують 10 кратне розведення досліджуваного матеріалу, потім однаковими дозами заражають рівні групи живих тест об'єктів. Враховують результат дії і знаходять в якому розведення вірус проявив свою дію на 50%. Якщо відразу таке розведення, не знайдено то він розраховується за формулою Т = lgB - (b-50) / (ba) * lgd, де В - розведення дають інфекційний ефект більш 50%, b - відсоток дає інфекційний ефект більш 50%, а - менше 50% d - кратність розведення. За 1ГАЕ приймається така доза вірусу, яка здатна агглютинировать приблизно 50% еритроцитів містяться в тому ж, що і вірус обсязі 1% суспензії відмитих еритроцитів. Готують ряд послідовних кратних розведень матеріалу і до кожного розведення додають 1% суспензію. Реакція оцінюється в хрестах. Реакція з 2 хрестами містить 1ГАЕ, яка множиться на кратність розведення.
ПИТАННЯ №29 «БІОЛОГІЧНА ХАРАКТЕРИСТИКА ВІРУСУ ЯЩУРУ. ПРИНЦИП ДІАГНОСТИКИ »
Ящур - гостро протікає висококонтагіозна хвороба парнокопитних, що виявляється лихоманкою, везикулярним ураженням слизових оболонок рота, шкіри віночка і вимені, у молодих тварин ураженням слизових оболонок рота, шкіри віночка і вимені, у молодих тварин ураженням міокарда і скелетних м'язів. Ящур реєструється в багатьох країнах світу. Інкубаційний період триває 1-3 дні. Іноді до 7-10 днів. Найхарактерніша ознака даного захворювання у тварин - везикулярне ураження слизових оболонок рота і шкіри віночка і вимені. У ВРХ - протікає гостро, доброякісно у дорослих. Спочатку відзначають погіршення апетиту, підвищену саливацию, підвищення температури тіла. На 2-3 день на внутрішній поверхні губ і мовою (у деяких в області межкопитной щілини, на вимені) з'являються афти. Через добу утворюються ерозії. Через 2-3 тижні ерозії гояться і тварина видужує. Вірус відноситься до сімейства Picornaviridae, роду Aphthovirus, РНК -, не має суперкапсідной оболонки. Віріони - дрібні частинки ікосаедріческой форми. Вірус досить стійкий до дій зовнішнього середовища. Сприйнятливі домашні і дикі парнокопитні. Виділяти вірус можна вже в інкубаційний період. Переболевание може супроводжуватися тривалим вірусоносійство. Близько 50% одужав ВРХ можуть виділяти вірус протягом 8 місяців, а деякі до 2 років. Вірус культивується на природно сприйнятливих і лабораторних тварин: новонароджених мишенят, кроленят морських свинках. Добре розмножується в КК нирок. Гемагглютінірующімі властивостями не володіє. Відомо 7 АГ-нних типів ящура: А, О, С, Сат-1, Сат-2, Сат-3, Азія-1. В організмі природно сприйнятливих тварин вірус індукує утворення віруснейтралізуючих, комплементсвязивающіх і преципитирующих АТ.
Вірус ящура зазвичай визначають в РСК. Основними компонентами РСК служать АГ, АТ, комплемент, гемолітична сироватка і еритроцити барана; в якості розчинника використовують їхн або різні буферні розчини. АГ і сироватки можуть володіти антікомплементраностью - здатність адсорбувати комплемент, що затримує гемоліз і спотворює результати реакції. Щоб позбутися від антікомплементраності, АГ очищають різними методами: ацетоном, фреоном, ефіром, хлороформом в залежності від виду тканини, яку використовують як АГ і вірусу. АГ для РСК готують з органів заражених тварин, з аллантоісной і амніотичної рідини заражених КЕ, а також з рідкого середовища інфікованих КК. РСК застосовують для визначення типів і підтипів вірусу ящура, що викликають захворювання тварин, для перевірки виробничих штамів вірусу ящура при виготовленні вакцин і лабораторних штамів в науково-дослідній роботі.