Примітка:% специфічного зв'язування в контролі = ((специфічне зв'язування в досвіді / специфічне зв'язування в контролі) * 100%% інгібування специфічного зв'язування в контролі = 100% - (специфічне зв'язування в досвіді / специфічне зв'язування в контролі) * 100%
В умовах даної експериментальної моделі показано, що комплексний препарат (СМД AT до S100 + СМД AT до ІФН - γ) більш ефективно, ніж окремі його компоненти (СМД AT до S100) і (СМД AT до ІФН - γ) інгібує зв'язування стандартного радіоліганда [ 3 H] пентазоцина з рекомбінантним сигма 1 рецептором людини, і може бути використаний як ефективний лікарський засіб для лікування нейроінфекціонних, нейродегенеративних і інших захворювань, зокрема, для лікування розсіяного склерозу.
Імунна відповідь при розсіяному склерозі характеризується складним, багатокомпонентним каскадом подій. Широке використання експериментальних моделей розсіяного склерозу, а саме: аутоімунної енцефалопатії у гризунів і нокаутних мишей дозволило вченим істотно просунуться в розумінні патогенезу даного захворювання.
Експериментальний алергічний енцефаломієліт (ЕАЕ) є загальновизнаною моделлю розсіяного склерозу - важкого аутоімунного демієлінізуючого захворювання, що вражає людей працездатного віку.
Захворювання типу ЕАЕ (із запальним процесом) можна відтворити на чутливих тварин білками ЦНС, що не входять до складу мієліну: кальмодулином, білком S100, гліальні фібрилярні кислим білком, арестіном і трансальдолазой.
Найбільш адекватною моделлю PC є ЕАЕ, що викликається введенням гомогената спинного мозку. У цій моделі, як і при вихідному захворюванні, здійснюється імунну відповідь на всі компоненти мієліну: індукується запалення з подальшою демиелинизацией, дегенерацією аксонів, а потім самих нервових клітин. Виявляється патологічна ланцюг подій з розвитком парезів, паралічів та інших симптомів хвороби.
Модель експериментального аутоімунного енцефаломієліту (ЕАЕ) у гризунів є основною моделлю тестування нових препаратів для лікування розсіяного склерозу.
У НДІ експериментальної медицини СЗО РАМН була використана модель експериментальної аутоімунної енцефалопатії у щурів, викликаної введенням гомогената аутологичного спинного мозку в повному ад'юванта Фрейнда (ПАФ).
У розвитку ЕАЕ можна виділити чотири стадії:
1. Сенсибілізація Т-лімфоцитів на периферії під дією мозкового антигену з ПАФ і збільшення проникності гематоенцефалічний бар'єр.
2. Міграція активованих Т-клітин в ЦНС і активація антиген - представляють клітин (астроцитів і мікроглії) безпосередньо в мозку.
Перші дві стадії відповідають латентному (індуктивному) періоду при якому не спостерігається клінічних проявів.
3. Розвиток аутоімунних і запальних реакцій в мозку, що призводять до демієлінізації нервових волокон (клінічний період).
4. Супресія патологічних процесів і репарація пошкоджених тканин (фаза одужання). У цей період у більшості тварин неврологічні і рухові порушення згладжуються, і настає часткове або повне одужання, після якого тварини резистентні до повторної індукції ЕАЕ.
Аналогічні фази розвитку патологічного процесу в ЦНС спостерігаються і при розсіяному склерозі.
Середня тривалість ЕАЕ - 30 днів: латентна стадія, клінічна стадія і стадія одужання. Тривалість кожної стадії зазвичай 7-10 днів.
Препарат порівняння (СМД AT до S100) відсував терміни початку прояву клінічних симптомів захворювання як в порівнянні з негативним контролем (р<0,05), так и по сравнению с референсным препаратом копаксоном (р>0,05). Терміни початку захворювання (Фиг.1) групах, які отримували (СМД AT до ІФН - γ) і в групі, що одержувала копаксон, не відрізнялися від контролю. У той же час, у тварин, яким вводили комплексний препарат (СМД AT до ІФН - γ + СМД AT до S100), спостерігали тенденцію до вкорочення термінів появи клінічних ознак розсіяного склерозу в порівнянні з контролем. Слід зазначити, що були виявлені достовірні відмінності в терміни початку захворювання між групами (СМД AT до S100) і (СМД AT до ІФН - γ + СМД AT до S100).
Частка тварин з важким перебігом захворювання (> 3 балів) (Фиг.2) також була нижче в групі (СМД AT до S100) У тварин, які отримували (СМД AT до ІФН - γ + СМД AT до S100) відсоток тварин з важким перебігом був вище, ніж в інших досліджуваних групах в усі терміни захворювання.
У зв'язку з тим, що в різні фази розвитку розсіяного склерозу задіяні різні механізми патогенезу ЕАЕ, було проаналізовано вплив тестованих препаратів на тяжкість захворювання в латентний період, в фазі розвитку клінічних ознак і в фазі одужання (Фіг.3). (СМД AT до S100) достовірно сприяв зниженню середнього бала прояву клінічних ознак захворювання в стадії клінічних прояві і в стадії одужання, в той час як копаксон і (СМД AT до ІФН - γ) достовірно знижували тяжкість ураження тільки в останній фазі. Комплексний препарат (СМД AT до ІФН - γ + СМД AT до S100) достовірно в порівнянні з контролем і що входять до його складу (СМД AT до ІФН - γ) і (СМД AT до S100) збільшував середній бал ураження тварин на стадії появи клінічних ознак захворювання і на стадії одужання.
Слід зазначити, що у частини тварин після повного зникнення клінічних ознак захворювання відзначали якусь подобу рецидиву, тобто повернення клінічних проявів ЕАЕ (фіг.4). У групі (СМД AT до S100) незважаючи на його благотворний вплив на клінічний перебіг ЕАЕ (більш пізній термін початку захворювання, менша тяжкість прояву клінічних ознак), відзначено найбільше число тварин (25%) з рецидивом. У той же час в групі (СМД AT до ІФН - γ + СМД AT до S100), для якого було характерно ранній початок захворювання і велика вираженість патологічного процесу, ні в однієї тварини не було виявлено розвитку рецидиву.
На моделі експериментального аутоімунного енцефаломієліту (ЕАЕ) показано сприятливий вплив (СМД AT до S100) на перебіг захворювання, який відтягував терміни появи клінічних ознак захворювання і знижував тяжкість ураження, при цьому (СМД AT до ІФН - γ) і препарат порівняння копаксон не чинили впливу на перебіг експериментального розсіяного склерозу, оскільки терміни появи клінічних ознак захворювання і тяжкість симптомів не відрізнялися від групи контролю (дистильована вода). Ефект комплексного препарату (СМД AT до ІФН - γ + СМД AT до S100) відрізнявся від ефекту входять до його складу компонентів (СМД AT до S 100) і (СМД AT до ІФН - γ), при цьому застосування (СМД AT до ІФН - γ + СМД AT до S100) призводило до посилення імунної відповіді, що виражалося в більш ранньому початку захворювання, збільшення частки хворих тварин і тяжкості захворювання. Однак в групі (СМД AT до ІФН - γ + СМД AT до S 100) рецидиву ні у однієї тварини не було зафіксовано, в той час як у 25% тварин групи (СМД AT до S100) і у 15% тварин групи (СМД AT до ІФН - γ) протягом періоду дослідження (30 днів) було виявлено рецидив.
Таким чином, заявлене лікарський засіб (СМД AT до ІФН - γ + СМД AT до S100) є багатообіцяючим препаратом для лікування розсіяного склерозу, яке дає посилення імунної відповіді на піку розвитку хвороби і може забезпечити більш ефективну реабілітацію та запобігання розвитку рецидивів захворювання.
1. Лікарський засіб для лікування розсіяного склерозу, що характеризується тим, що виконано у вигляді фармацевтичної композиції і включає активовану-потенційовану форму антитіл до гамма-інтерферону людини і активовану-потенційовану форму антитіл до мозгоспеціфіческому білка S-100.
2. Лікарський засіб по п.1, що характеризується тим, що активовану-потенційовану форму антитіл до гамма-інтерферону людини і активовану-потенційовану форму антитіл до мозгоспеціфіческому білка S-100 використовують у вигляді активованого-потенцированного водного або водно-спиртового розчину, отриманого в процесі послідовного багаторазового розведення матричного розчину відповідних антитіл у водному або водно-спиртовому розчиннику і проміжного зовнішнього механічного впливу - струшування кожного разу ведення.
3. Лікарський засіб по п.1, що характеризується тим, що фармацевтична композиція виконана в твердій лікарській формі і містить ефективне кількість насичених активованої-потенційований формою антитіл до гамма-інтерферону людини і антитіл до мозгоспеціфіческому білка S-100 гранул нейтрального носія, і фармацевтично прийнятні добавки.
4. Лікарський засіб по п.2, що характеризується тим, що водні або водно-спиртові розчини активованих потенційованих форм антитіл до гамма-інтерферону людини і до мозгоспеціфіческому білка S-100 отримані шляхом багаторазового послідовного розведення і проміжного зовнішнього впливу з матричних розчинів афінно очищених антитіл до гамма-інтерферону людини і мозгоспеціфіческому білка S-100 з концентрацією 0,5 ÷ 5,0 мг / мл.
5. Лікарський засіб по п.2, що характеризується тим, що кожен з компонентів у вигляді активованої-потенційований форми антитіл до гамма-інтерферону людини і антитіл до мозгоспеціфіческому білка S-100 використовують у вигляді суміші різних, переважно сотенних, гомеопатичних розведень.
6. Лікарський засіб по п.3, що характеризується тим, що фармацевтично прийнятні добавки включають лактозу, целюлозу микрокристаллическую і магнію стеарат.
7. Спосіб лікування розсіяного склерозу, що характеризується тим, що в організм одночасно і сумісно вводять активовану, потенційовану форму антитіл до гамма-інтерферону людини і активовану-потенційовану форму антитіл до мозгоспеціфіческому білка S-100.
8. Спосіб лікування по п.7, що характеризується тим, що використовують приготовані у вигляді єдиного лікарського препарату - однієї лікарської форми суміш різних гомеопатичних розведень антитіл до гамма-інтерферону людини в поєднанні з сумішшю різних гомеопатичних розведень антитіл до мозгоспеціфіческому білка S-100.
9. Спосіб за п.7 або 8, що характеризується тим, що активовану-потенційовану форму антитіл до гамма-інтерферону людини і активовану-потенційовану форму антитіл до мозгоспеціфіческому білка S-100 використовують у вигляді активованого-потенцированного водного або водно-спиртового розчину, отриманого в процесі послідовного багаторазового розведення у водному або водно-спиртовому розчиннику і проміжного зовнішнього механічного впливу - струшування кожного розведення.