Лабораторні методи діагностики хвороби легіонерів представлені в табл. 153.2. Для дослідження зазвичай використовують мокроту, а якщо її немає - проводять бронхоскопію або бронхоальвеолярний лаваж. Чутливість дослідження мокротиння і змивів, отриманих шляхом бронхоскопії, приблизно однакова; чутливість дослідження рідини, отриманої при бронхоальвеолярному лаваже, ще вище. При наявності плеврального випоту показана плевральна пункція. Проводять иммунофлюоресцентное фарбування і посів випоту, а також визначають в ньому антиген Legionella pneumophila.
Мікроскопія. Виявлення збудника в біологічних рідинах, в нормі стерильних (наприклад, в плевральної рідини), а також в тканини легенів дозволяє припустити діагноз. В забарвлених по Граму мазках мокротиння зазвичай видно тільки лейкоцити, а збудник не виявляється. Якщо ж легионелли в них помітні, це - дрібні, поліморфні, слабо забарвлені грамнегативнібактерії. Legionella micdadei частково кислотоустойчивость. Через це хворим помилково можуть призначити протитуберкульозну терапію. Модифікована забарвлення за Цілем-Нільсеном, при якій для знебарвлення замість 3% соляної кислоти використовують 1% сірчану, збільшує частоту виявлення Legionella micdadei.
Посів. Посів мокротиння та інших біологічних матеріалів дозволяє поставити остаточний діагноз легіонельозу. Найбільшу чутливість забезпечує вугільно-дріжджовий агар, в який додають антибіотики і барвники. Колонії легіонел ростуть повільно; неозброєним оком їх можна розрізнити тільки через 3-5 діб. Щоб запобігти заростання агару іншими видами бактерій, зразок попередньо прогрівають або обробляють кислотою. Legionella pneumophila часто виявляється в мокротинні, в якій немає нейтрофілів. Її вдається виділити навіть із зразків, в яких міститься більше 25 епітеліальних клітин в полі зору при сильному збільшенні (ознака забруднення мокротиння мікрофлорою порожнини рота).
Иммунофлюоресцентное фарбування. Метод прямої іммунофлюореспенціі швидкий і високоспеціфічен, але менш чутливий, ніж посів, так як для позитивного результату потрібна значна концентрація бактерій в матеріалі. На початку захворювання цей метод менш результативним.
Серодиагностика. Серологічні дослідження бажано проводити в гострій стадії і в стадії одужання. Діагностичним вважається чотириразове підвищення титру антитіл. Сероконверсія зазвичай виявляється через 4-12 тижнів. У деяких хворих вона так і не відбувається. Якщо серологічне дослідження було одноразовим, титр антитіл 1: 128 і вище у хворого на пневмонію дозволяє поставити гаданий (але не остаточний) діагноз. Серодиагностика використовується в основному в епідеміологічних дослідженнях. Її специфічність по відношенню до видів, відмінних від Legionella pneumophila. невідома. Описано перехресні реакції з антитілами до деяких грамнегативних паличок.
Визначення антигену Legionella pneumophila в сечі. Визначення вільного антигену Legionella pneumophila в сечі - швидкий, легкий, відносно дешевий і високоспецифічний метод діагностики. За чутливості він поступається тільки посіву (табл. 153.2). Цей метод дозволяє виявити тільки штами Legionella pneumophila серогрупи 1, але 80% випадків легіонельозу викликаються саме ними. Антиген з'являється в сечі через 3 доби після початку захворювання (навіть на тлі антимікробної терапії) і тримається в ній протягом декількох тижнів. Метод слід освоїти кожної клінічної лабораторії.
ПЛР. Використання олігонуклеотидних зондів в поєднанні з ПЛР по специфічності перевершує інші методи. Метод з успіхом застосовують для ідентифікації легіонел в пробах води. Проводиться оцінка його чутливості при дослідженні клінічного матеріалу.