Таблиця 64 - Диференціальні ознаки видів коринебактерій
Таблиця 63 - Диференціація С. renale, C. pilosum, C. cystitidis
Таблиця 62 - Диференціація коринебактерий і Rhodococcus equi
Біопроба. При зараженні мишей культурами С. pseudotuberculosis виявляється вариа-бельність їх вірулентності. При внутрішньовенному зараженні гине 90,7% тварин, при підшкірному - близько 21,2%. В результаті внутрибрюшинного зараження морських свинок (самці) можна викликати орхіт.
Живильні середовища. Середа Тінсдаля. До 1000 мол розплавленого і охолодженого до 50 ° С 2% -ного МПА додають 120 мл 1% -ного розчину L-цистину на 0,1 N соляної кислоти, 120 мл 0,1 N розчину гідроксиду на-трия, 18 мл 2% -ного розчину теллурита калію, 18 мл 2,5% -ного розчину гіпосульфата натрію і 200 мл стерильної сироватки крові великої рогатої худоби.
Приготування розчину теллурита калію. У 100 мл дистильований-ної води розчиняють 2 г теллурита калію. Розчин стерилізують в киплячо-щей водяній бані 30 хвилин і зберігають при кімнатній температурі. У слу-чаї випадання осаду розчин знову прогрівають на водяній бані.
Таблиця 61 - Диференціальні ознаки грампозитивних,
що не утворюють спор, неправильної форми паличок
Cory neb ас -terium
'Виняток - тип ulcerans; 2 близько 50% штамів позитивні; 3 тип ulcerans може бути негативним; 4 деякі штами негативні; 5 деякі штами позитивні; нд - немає даних; х - 11-89% штам-мов позитивні.
Приготування розчину гіпосульфіту натрію. Розчин готують на стерильній дистильованій воді. Після додавання кожного когось компонентами середу ретельно перемішують і, не стерилізуючи, розливають по чашках Петрі. До використання середу можна зберігати при 10 ° С не більше 3-4 діб.
Середовище налаштовано для диференціації збудника дифтерії та дифтероїдів. Коринебактерії дифтерії утворюють колонії чорного кольору, тому що здатні продукувати сірководень з цистину, який взаємодіє з сіллю теллурита. С. diphtheriae var. gravis на цьому середовищі утворює дрібні, опуклі, блискучі, чорні колонії. Середовище має селективними свій-ствами, стороння мікрофлора зростає слабо.
Телурової середу Клауберга II. До 1000 мол рас-плавленого 3% -ного поживного агару додають 3 мл 2% -ного ра-створу теллурита калію, 10 мл гліцеринової суміші та 50 мл «лакової кро-ві». Середовище розливають в чашки Петрі (використовують не більше 3-4 діб) і зберігають при 4-10 ° С. Коринебактерії дифтерії типу «gravis» утворюють сірувато-чорні колонії з кілька порізаними краями, типу «mitis» - дрібні, з рівними краями сірувато Чорне блискучі колонії.
Приготування «лакової крові». До 3 мл стерильної дистильованої води додають 16 мл дефібринованої крові великої рогатої ско-та, додають 20 мл хімічно чистого стерильного гліцерину. Суміш ви-витримують в холодильнику 3-6 тижнів.
Кров'яний телурової агар. До 100 мл рас-плавленого і охолодженого до 45-50 ° С поживного агару (рН 7,6-7,8) додають 10 мл дефібринованої крові коня або великого ро-гатого худоби, 2 мл 2% -ного розчину теллурита калію (К , ТеО3). Отримано-ву середу перемішують і розливають у чашки Петрі. Колонії дифтерійних бактерій на цьому середовищі мають чорний колір або чорний центр колонії, дифтероїдів - більш опуклі, вологі, сірого кольору, з коричневим центром, ложнодіфтерійной бактерій - дрібні се-які, з коричневим центром, непрозорі.
Середа Пергола. Використовують як середовище збагачення для виділення коринебактерии дифтерії. З курячого яйця стерильно витягують жовток, переносять його в колбу з намистом і додають 100 мл стерильної сироватки крові коня або круп-ного рогатої худоби, 1 мл 2% -ного розчину теллурита калію; ретельно перемішують. Отриману суміш розливають по 2-3 мл в стерильні про-бирки і прогрівають 1 ч в водяній бані при 56 ° С. Потім для контролю сте-рільності витримують 48 год в термостаті при 37 ° С. На цьому середовищі діфте-рійное бактерії формують через 12-
15 ч інкубування світло або темно-сірі вологі колонії.
Рідке середовище для дифтерійних мікробів. До 400 мл сте-рільним бульйону (рН 7,6), що містить 10% сироватки коня або великої рогатої худоби, додають 75 мл «лакової крові», 20 мл 1% -ного розчину теллурита калію, 12,5 мл гліцеринової суміші та 12 , 5 мл 1% -ного цистину.
Ацетатно-телуритовий бульйон для дифтерійних мікробів. У колбі змішують 200 мл МПБ (рН 7,4), 2 мл гліцерину, 18 мл 50% -ного розчину пептона Вітте і 0,63 мл 50% -ного розчину ацетату натрію. Середовище стерилізують текучим паром протягом 1 год, охолоджують до 48 ° С і додають 10 мл 1% -ного розчину теллурита калію і 21 мл дефібрінірующего-ванною крові барана.
Середа Пай. У колбі змішують 1000 мол вмісту курячих яєць і 500 мл дистильованої води, збивають, фільтрують через подвійний шар марлі, додають 120 мл гліцерину, 5 г глюкози, перемішують, разли вають по стерильним пробірках, скошують і стерилізують як згорнуту сироватку (див. З-поміж Леффлера).
Індикаторна середу III для дифтерійних бактерій. До 420 мл 3% -ного поживного агару додають 12,5 мл 1% -ного розчину цистину, 1,5 мл 50% -ного розчину ацетату натрію, 880 мл 1% -ного розчину теллурита калію. Встановлюють рН 8,0 і вносять 60 мл 2% -ного розчину індикатора водного блакитного. У нагріту до 50-55 ° С середовище додають суміш наступного складу: 280 мл дистилюється-ванною води, 21 мл гліцеринової суміші (см.среда Клауберга II), 15 г глюкози, 140 мл дефібринованої крові (рН суміші 7,0). Після пере-мешіванія середу розливають в чашки Петрі.
Сироваткове середовище Леффлера. Рекомендується для вирощування пато-генних нейссерий, коринебактерії. Змішують 750 мл сироватки крові вівці, 250 мл МПБ (рН 7,0), 2,5 г глюкози, 1,25 г натрію хлориду. Середовище розливають в пробірки і згортають в скошеному положенні при 80 ° С 3 дні по 2 год в апараті Коха або в сушильній шафі при 70 ° С 3 дні по 1 ч.
Більшість видів бактерій роду Actinomyces патогенні для тварин і людини. Основні патогенні види такі: A.bovis - возбуди-тель актиномикоза великої рогатої худоби, природним середовищем оббита ня імовірно є слизові ротової порожнини або кишечнику-ник; A.suis викликає у свиней актиномікоз молочної залози; A.israelii - основний збудник актиномікозу людини, може бути причиною ен-дометрітов, цервицитов і кон'юнктивітів, асоціюється з актиномикозом великої рогатої худоби і свиней, природне місце існування - ротова порожнина, слизові кишечника людей; A.pyogenes - викликає гнійні процеси у тварин, в тому числі мастити корів, перитоніти у свиней, природним місцем існування є слизові оболонки; A.viscosus - збудник актиномікозу собак; A.hordeovulneris - викли-кість у собак абсцеси, плеврити, перитоніти, артрити. Лабораторна діагностика хвороб, що викликаються перерахованими видами бактерій, заснована на результатах бактеріологічного дослідження.