Відмінності ЕКСПРЕСІЇ МАРКЕРА ПРОЛІФЕРАЦІЇ РСNА У патологічних ендометрія, ПРОБЛЕМИ КЛАСИФІКАЦІЇ гіперпроліферативних ЗМІН ЕНДОМЕТРІЯ У СОБАК
Карташов С. Н. - к. В. н.
ветеринарна клініка "Віта", м Шахти
На підставі морфологічних даних, а також даних експресії маркера проліферації доцільно класифікувати метропатіі на метропатіі з переважними проліферативними процесами, при яких експресія маркера проліферації в клітинах залоз ендометрія коливається від 50 до 100%, і на метропатіі з переважними секреторними процесами, при яких маркер проліферації експресується менше ніж в 50% клітин залоз ендометрія.
Гіперплазія ендометрію собак (ГЕ) - це сукупність змін, які зачіпають і стромальних, і залозистий елементи ендометрія, обумовлені абсолютною або відносною гіперестрогенією. Є деяка різноманітність гістологічної картини гіперплазії, як в різних зразках, взятих у однієї собаки, так і в зразках від різних собак. ГЕ супроводжується такими симптомами, як кров'янисті виділення з піхви (рис. 1), синдром системної запальної реакції, затяжний еструс або проеструс, які можуть поєднуватися з гіперестрогенією станами, викликаними ендогенними або екзогенними гормонами. Основне клінічне значення ГЕ полягає в тому, що цей стан може служити прогностичним фактором розвитку важких септичних метропатій (піометри), які потребують в подальшому оваріогістеректоміі.
Імовірність розвитку піометри при лікуванні затяжного еструса і проеструса, які супроводжуються ГЕ, є предметом досліджень протягом декількох десятків років, і до цих пір немає ясності в питаннях лікування, діагностики та класифікації гіперпроліферативних процесів матки у собак.
У літературі гіперплазію ендометрія називають як захворювання, що протікають в фолликулиновую стадію статевого циклу, так і в період метеструса, тобто в лютеїнову стадію. При цьому ендометрій виглядає як гіперпроліферірованний (потовщений) в обох випадках, але при морфологічному дослідженні в фолликулиновую фазу виявляється гіперпроліферативних (рис. 7), а в лютеїнову - гіперсекреторний процес (рис. 8). У першому випадку в яєчниках виявляються кісти, у другому - жовті тіла або жовті тіла з кістами.
На наш погляд, такий стан справ з термінологією вносить плутанину в постановку діагнозу. Процес, при якому є переважна секреторна трансформація ендометрію, з якоїсь причини називається гіперпроліферацією (рис. 9-14). При цьому основними терапевтичними препаратами для лікування такої псевдогіперпроліфераціі залишаються простагландини, переривають лютеиновую стадію статевого циклу і припиняють секреторні процеси в ендометрії. Певну роль у створенні цієї плутанини зіграло і те, що якщо гіперпроліферація ендометрія протікає без запального процесу в матці, то єдиним симптомом є порушення статевого циклу, що не завжди правильно діагностується і трактується. Іншою проблемою є складність отримання матеріалу для морфологічних досліджень, оскільки при істинної гіперпроліферації і хорошому стані тваринного ні лікарі, ні господарі тварин не погоджуються на оперативне втручання.
При візуальному огляді віддаленої матки ендометрій потовщений, поверхня його бархатиста, а в просвіті матки виявляється кров (рис. 2). При гістологічному дослідженні такої матки відзначається різке збільшення залозистого ендометрія (рис. 3, 4).
Необхідно відзначити, що, кажучи про гіперпроліферації ендометрія, ми мали на увазі фолликулиновую стадію статевого циклу. В яєчниках при ГЕ виявляються персистирующие фолікули або фолікулярні кісти (рис. 2). Для об'єктивної диференціальної діагностики ГЕ ми використовували імуногістохімічні способи забарвлення, які дозволяють візуалізувати тканинні (клітинні) антигени до маркерів проліферації. Ці методи засновані на иммунореактивности антитіл і виявленні комплексу антиген-антитіло при реакції з незабарвленим хромогенним субстратом, в результаті чого утворюється забарвлений кінцевий продукт в місці локалізації антигену.
З зразків тканин, фіксованих у формаліні і укладених в парафін, виготовляли серійні зрізи товщиною 4 мкм з наступною імуногістохімічної забарвленням антитілами до маркера проліферації РСNА (клон РС10, DACO, розведення 1: 100). Зрізи обробляли в мікрохвильовій печі 10 хвилин на потужності 700 Вт з метою відкриття антигенних детермінант, блокували активність ендогенної пероксидази і інкубували з первинними антитілами 18 год при 4 ° С. Потім зрізи обробляли вторинними антитілами, кон'югованими з пероксидазою хрону, протягом 30 хвилин.
Малюнок 1 - Кров'янисті виделеніяіз піхви при ГЕ