Санітарно-мікробіологічне дослідження повітря можна розділити на 4 етапи:
2) обробка, транспортування, зберігання проб, отримання концентрату мікроорганізмів (якщо необхідно);
3) бактеріологічний посів, культивування мікроорганізмів;
4) ідентифікація виділеної культури.
Правильне взяття проб гарантує точність дослідження. У закритих приміщеннях точки відбору проб встановлюються з розрахунку на кожні 20 м 2 площі - одна проба повітря, по типу конверта: 4 точки по кутах кімнати (на відстані 0,5 м від стін) і 5-я точка - в центрі. Проби повітря забираються на висоті 1,6-1,8 м від підлоги - на рівні дихання в житлових приміщеннях. Проби необхідно відбирати днем (в період активної діяльності людини), після вологого прибирання і провітрювання приміщення. Атмосферне повітря досліджують в житловій зоні на рівні 0,5-2 м від землі поблизу джерел забруднення, а також у зелених зонах (парки, сади і т.д.) для оцінки їх впливу на мікрофлору повітря.
Слід звернути увагу на те, що при відборі проб повітря в багатьох випадках відбувається посів його на живильне середовище.
Всі методи відбору проб повітря можна розділити на седиментаційних і аспіраційні.
Седиментаційних - найбільш старий метод, широко поширений завдяки простоті і доступності, проте є неточним. Метод запропонований Р. Кохом і полягає в здатності мікроорганізмів під дією сили тяжіння і під впливом руху повітря (разом з частинками пилу і крапельками аерозолю) осідати на поверхню живильного середовища в відкриті чашки Петрі. Чашки встановлюються в точках відбору на горизонтальній поверхні. При визначенні загальної мікробної обсіменіння чашки з мясопептонний агаром залишають відкритими на 5-10 хв або довше в залежності від ступеня передбачуваного бактеріального забруднення. Для виявлення санітарно-показових мікробів застосовують середу Гарро або Туржецкого (для виявлення стрептококів), молочно-сольовий або желточно-сольовий агар (для визначення стафілококів), суслоагар або середу Сабуро (для виявлення дріжджів і грибів). При визначенні санітарно показових мікроорганізмів чашки залишають відкритими протягом 40-60 хв.
Після закінчення експозиції всі чашки закривають, поміщають в термостат на добу для культивування при температурі, оптимальної для розвитку виділяється мікроорганізму, потім (якщо цього вимагають дослідження) на 48 год залишають при кімнатній температурі для освіти пігменту пигментообразующих мікроорганізмами.
Новий метод має ряд недоліків: на поверхню середовища осідають тільки Грубодисперсні фракції аерозолю; нерідко колонії утворюються не з одиничною клітини, а з скупчення мікробів; на застосовуваних поживних середовищах виростає тільки частина повітряної мікрофлори. До того ж цей метод абсолютно непридатний при дослідженні бактеріальної забрудненості атмосферного повітря.
Більш досконалими методами являютсяаспіраціонние. засновані на примусовому осадженні мікроорганізмів з повітря на поверхню щільного поживного середовища або в уловлює рідина (м'ясо-пептони бульйон, буферний розчин, ізотонічний розчин хлориду натрію і ін.). У практиці санітарної служби при аспирационном взяття проб використовуються апарат Кротова, бактеріоуловітель Речменскій, прилад для відбору проб повітря (ПОВ-1), пробовідбірник аерозольний бактеріологічний (ПАБ-1), бактеріально-вірусний електропреціпітатор (БВЕП-1), прилад Киктенко, прилади Андерсена , Дьяконова, МБ і ін. Для дослідження атмосфери можуть бути використані і мембранні фільтри № 4, через які повітря просасивается за допомогою апарату Зейтца. Велика розмаїтість приладів свідчить про відсутність універсального апарату і про більшою чи меншою мірою їх недосконалості.
Прилад Кротова. В даний час цей прилад широко застосовується при дослідженні повітря закритих приміщень і є в лабораторіях
Принцип роботи апарату Кротова (рис. 22) заснований на тому, що повітря, просасивается через клиноподібну щілину в кришці апарату, вдаряється об поверхню живильного середовища, при цьому частинки пилу і аерозолю прилипають до середовища, а разом з ними і мікроорганізми, що знаходяться в повітрі .
Бактеріально-вірусний електропреціпітатор (БВЕП-1). Прилад заснований на аспіраційно-іонізаційному принципі дії. БВЕП-1 складається з осаджувальної камери, в яку вмонтовано електроди: негативний у вигляді приводить трубки, через яку надходить повітря (і частинки аерозолю відповідно заряджаються негативно), і позитивний, на якому осідають бактерії.
Прилад МБ. Цей прилад служить не тільки для визначення загальної мікробної обсіменіння, але і для відбору проб повітря з аерозольними частками різних розмірів. Прилад МБ побудований за принципом «сита» і являє собою циліндр, розділений на 6 горизонтальних смуг, на кожну з яких поміщають чашки Петрі з МПА. Повітря просасивается, починаючи з верхнього ступеня, в пластині якої отвори найбільші, і чим нижче ступінь, тим менше розміром отвору (через останні проходять тільки тонкодисперсні фракції повітряного аерозолю). Прилад розрахований на уловлювання частинок аерозолю розміром більше 1 мкм при швидкості відбору повітря 30 л / хв. Зменшення числа отворів забезпечує більш рівномірний розподіл по живильному середовищі аерозолю з повітря. Для вловлювання ще більш дрібних частинок аерозолю можна додавати додатково фільтр з фільтруючого матеріалу АФА.
При використанні будь-якого з перерахованих приладів одержувані результати є приблизними, проте вони дають більш правильну оцінку обсіменіння повітря в порівнянні з седиментаційним методом. Оскільки і відбір і санітарно-мікробіологічні дослідження повітря не регламентовані ГОСТ, то можна використовувати будь-який прилад для оцінки бактеріальної забрудненості повітря. У багатьох випадках відбір проб суміщений з етапом посіву.
Для зниження чисельності мікроорганізмів в повітрі закритих приміщень застосовують такі засоби: а) хімічні - обробка озоном, двоокисом азоту, розпорошення молочної кислоти, б) механічні - пропускання повітря через спеціальні фільтри, в) фізичні - ультрафіолетове опромінення.