Внутрішкірна проба з дізентеріном (проба Цуверкалова).
За якими ознаками ідентифікують збудників дизентерії?
Яке відмінність між типовими і груповими діагностичними аглютинативна дизентерійними сироватками?
Для чого необхідно серологічне типування збудників?
Яка методика кератоконьюктівальной проби і яке її значення?
Які методика і мета визначення чутливості дизентерійних бактерій до антибіотиків?
У яких випадках і як застосовують дизентерійний бактеріофаг?
У чому полягає сутність методів визначення чутливості бактерій Зонне до коліціни і типів коліцінов, що продукуються шигеллами?
Як ставиться алергічна проба Цуверкалова?
Чим обумовлена вірулентність дизентерійних бактерій?
Додаток до заняття 7.
А. Ферментатівниє типи шигелл Зоні.
Позначення: + ферментація в першу добу,
Б. Метод коліціногенотіпірованія.
Метод коліціногенотіпірованія розроблений англійськими дослідниками Абботом і Шенноном (1958) і заснований на визначенні коліціногенотіпов шигелл Зонне за дією цих бактерій на 15 індикаторних культур, з яких 13 належить до виду шигел Зонне, 1 - s. dysenteriae 2 (Штуцера-Шмітца) і 1 - Escherichia сoli К-12 ROW.
За допомогою цього набору індикаторних культур в даний час виявлено 17 коліціногенних типів бактерій Зонне.
Випробовувану культуру сіють на МПА з генціанвіолетом двома лінійними штрихами паралельно діаметру чашки. Після інкубування при 37 ° протягом 48 годин виросла культуру вбивають парами хлороформу і видаляють з поверхні середовища вузьким краєм стерильного шліфованого предметного скла. На поверхню агару наносять свіжі культури індикаторних штамів у вигляді лінійних штрихів, які перетинають лінії посіву досліджуваної культури. Посіви індикаторних штамів инкубируют 18-20 годин при 37 ° і виробляють облік результатів за наявністю або відсутністю зон гальмування зростання індикаторних культур і їх розмірами.
Реєструють результати наступними умовними позначеннями:
++++ - зона гальмування 15-20 мм;
+++ - зона гальмування 10-15 мм;
++ - зона гальмування більше 5 мм;
+ - зона гальмування 4-5 мм;
± - зона гальмування менше 4 мм;
- - відсутність зони гальмування.
Отриманий спектр дії досліджуваної культури на індикаторні штами зіставляють зі стандартною схемою титрування і привласнюють цій культурі відповідний коліціногенотіп.
Класифікація бактерій роду Shigella.
Схема визначення коліцінгенотіпов шигелл Зонне.
Коліцінотіпірованіе, тобто визначення спектру чутливості культур Зонне до коліціни, визначають наступним чином.
Свіжі еталонні коліціногенние штами Фредеріка, які виросли на середовищі Ресселя, сіють уколом петлі у відповідні квадрати чашки з 1,5% -ним МПА, підфарбованим генціанвіолетом, і інкубують при 37º протягом 24 годин. Виросли колонії бактерії вбивають парами хлороформу, і поверхню агару заливають 2,5 мл розплавленого 0,7% -ного МПА, що містить 2 краплі 6-годинний випробуваної бульонной культури шигел Зонне. Після 20-годинного росту при 37 ° виробляють облік результатів досвіду. При наявності чутливості до коліціни випробуваного штаму бактерії Зонне навколо колоній коліціногенних культур утворюються зони затримки росту подібно до зон затримки росту навколо дисків з антибіотиками. Культура вважається чутливою до коліціни, якщо ширина затримки росту бактерій більше 2 мм. Результати реєструють плюсами: + - зона затримки 2 мм; ++ - зона затримки 2-5 мм, +++ - зона затримки 5-10 мм, ++++ - зона затримки більше 10 мм.
Вірулентність дизентерійних бактерій обумовлена наявністю у них факторів адгезії і колонізації, інвазії. (Ці фактори патогенності контролюються головним чином плазмидами). Крім того, шигели здатні виробляти 2 типу екзотоксинів: цітотоніни (термолабільних і термостабільний) і цитотоксини (здатністю виробляти цитотоксини шигеллу наділяють конвертують помірні фаги).
Патогенність шигел визначається за допомогою кератокон'юнктівальной проби на морській свинці.