Імунна система - це система захисту організму не тільки від шкідливих мікроорганізмів (бактерії, найпростіші, гриби і віруси), а й від власних вироджуються клітин, які безконтрольно діляться. Кожен день життя в людському організмі зароджується близько 8 злоякісних пухлин! І при цьому середня частота розвитку пухлинної хвороби - 1 раз в 200 років (клітинних поділів)! Це відображає роботу імунної системи людини по розпізнавання й знищення змінених клітин організму, з яких в наслідок може розвиватися рак.
І все-таки іноді імунна система не розпізнає такі клітини. У свою чергу, пухлина під час свого зростання продукує речовини, які пригнічують імунну систему. Як наслідок у більшості людей, які страждають ракової хворобою, імунна система ослаблена. Це служить причиною призначення лікарями комплексного медикаментозного лікування (вітаміни, мікроелементи і т.д.) для стимуляції імунної системи до боротьби проти раку.
Останнім часом завдяки інтенсивним дослідженням в області імунології відкриті нові фактори та типи клітин, за допомогою яких реалізується імунну відповідь. Кількість цих досліджень постійно зростає і сьогодні ми розуміємо імунні процеси набагато глибше, ніж 10 років тому. І ясна річ, що дендритні клітини в цих процесах відіграють особливо важливу роль.
Дендритні клітини - принцип дії
- За допомогою спеціальних методів з крові хворого виділяються клітини-попередники, з яких згодом вирощують дендритні клітини. У присутність певних речовин їх висаджують на лабораторні чашки, щоб клітини не втратили здатності до подальшого розвитку.
- Під час фази дозрівання в культуру клітин додають структури пухлинних клітин, отримані шляхом генної інженерії, або «уламки» пухлини самого пацієнта.
- Незріла клітина-попередник здатна захоплювати ці структури.
- Захоплений «уламок» зазнає певні структурні зміни, щоб пізніше характерна ознака цієї пухлини міг бути краще розпізнаний іншими імунними клітинами. В результаті цих процесів клітина попередник перетворюється в дендритну клітку, яка на своїй поверхні несе ознака пухлини з особливою сигнальної послідовністю. Саме цю послідовність і розпізнає імунна клітина як чужорідну.
- Тепер дозрілі дендритні клітини вводяться під шкіру, звідки вони активно переміщаються в лімфовузли, активують різні типи клітин - виконавців (цитотоксичні Т-лімфоцити), які при контакті з пухлинної клітиною знищують її.
- Активні клітини-виконавці «ознайомлені» з чужорідним ознакою, з потоком крові вони поширюються по всьому організму і «шукають» в різних тканинах носіїв саме цієї ознаки.
- При зустрічі зі своєю метою (в даному випадку з пухлинної клітиною), клітина-виконавець пошкоджує її і виробляє речовини, що оповіщають інші імунні клітини.
Дендритні клітини можна вирощувати поза організмом
Лікування раку за допомогою власної імунної системи - давня мрія людства. І в 90-х роках вчені підійшли впритул до її реалізації, навчившись вирощувати дендритні клітини. Це клітини здійснюють патрулювання і виявлення чужорідних структур в тканинах організму. Ці структури захоплюються дендритними клітинами, розкладаються на більш дрібні, які потім «виносяться на показ» на поверхню клітини. У такому вигляді дендритні клітини мігрують з тканин в лімфовузли. Там чужорідні структури будуть представлені клітинам-виконавцям (цитотоксическим Т-лімфоцитам), які таким чином активуються, залишають лімфовузли, виходять в тканини, атакують і знищують структури, що володіють поданою ним ознакою.
Надалі дендритні клітини можуть також активувати інші імунні клітини - так звані Т-хелпери. Активні Т-хелпери з потоком крові потрапляють на «місце подій», і там виробляють речовини, що підтримують активність клітин-виконавців.
Ефективність лікування дендритними клітинами
На сьогоднішній день доведено ефективність лікування дендритними клітинами хворих на рак шкіри, нирки, молочної залози, передміхурової залози, а також рак товстої кишки і яєчників.
Для більшості видів раку вже існують стандарти лікування, які створювалися десятиліттями. Імунотерапія (вакцинація дендритними клітинами) сьогодні рекомендується як підтримуюча, в комплексі з хіміотерапією та променевою терапією. Відомо, що імунні клітини більш ефективно борються з клітинами пухлини, яка раніше вже піддалася руйнівній дії «хімії або радіації».
Вакцинація дендритними клітинами також часто застосовується, коли рутинна терапія не приносить бажаного ефекту. Прикладом для цього може служити лікування раку нирки і меланоми шкіри.
Найбільший ефект при вакцинації проявляється на ранніх стадіях хвороби, коли в організмі ще не так багато ракових клітин. У цій ситуації імунні клітини часто набагато ефективніше ніж у хворих з більшою пухлинної масою. Тому перед лікуванням дендритними клітинами завжди показано спеціальне лабораторне дослідження крові, що дозволяє визначити реактивність імунної системи. Як при стандартному лікуванні раку, так і при лікуванні дендритними клітинами, терапія буде тим ефективніше, ніж раніше вона почнеться.
В результаті взаємодії дендритних клітин і Т-хелперів також стимулюються до зростання і вироблення специфічних антитіл антітелпродуцірующіе В-клітини.
Дослідження національного онкологічного центру Сінгапуру
В ході дослідження були оцінені клінічні переваги вакцинації аутологічними дендритними клітинами (ДК), пульсувати лізатів алогенних клітин меланоми, пацієнтів, які страждають на колоректальний рак на пізніх стадіях. У дослідженні брали участь 20 пацієнтів у віці від 25 до 80 років, які страждають на колоректальний рак IV ступеня, прогресувати в ході лікування хіміотераппіей.
ДК були отримані з моноядерних клітин периферійної крові, пульсувати лізатів алогенних клітин меланоми, а їх визрівання проводилося із застосуванням цитокінів. Кожен пацієнт отримав до 10-ти внутрішньошкірних вакцинацій (3-5 × 106 клітин в кожній дозі) з інтервалом в 2 тижні.
Результати: 20 пацієнтів отримали в цілому 161 вакцинацію. Лікування переносилося добре і якість життя не змінювалося значно за весь період лікування. У одного паіцента спостерігався частковий відповідь, а у семи спостерігалася стабілізація, у одного з Никхил зареєстрована регресія пухлини. Не дивлячись на те, що медіана виживаності без прогресування захворювання склала 2,4 місяця, у п'яти пацієнтів спостерігалася виживаність без прогресування протягом більше 6 м-ців, а у двох із них - понад 27-ми і більше 37-ми місяців. Ці результати особливо значущі, оскільки у всіх пацієнтів до початку лікування захворювання прогресувало.
Як отримують дендритні клітини?
- У спеціальних посудинах кров центрифугируется і розділяється на фракції. Метою фракціонування є відділення білих кров'яних клітин від червоних кров'яних клітин і клітин неспецифічної імунної відповіді - гранулоцитів.
- Фракція червоних кров'яних клітин і гранулоцитів осідає на дно пробірки і в подальшому не використовується. У фракції лімфоцитів знаходяться ті клітини, з яких в наслідок можуть розвинутися дендритні клітини.
- Після декількох ступенів очищення клітини поміщаються в спеціальні чашки з живильним розчином. Тут клітини, в тому числі і клітини-попередники, поступово осідають на дно пластикової чашки і фіксуються там. І після завершальної фази очистки в живильний розчин додаються чинники зростання.
- Потім клітини поміщаються в спеціальний інкубаційний шафа, в якому підтримується постійна температура, а також забезпечуються і контролюються необхідні умови середовища для зростання і дозрівання культури клітин. Тут проходить фаза зростання.
- Для запуску процесу дозрівання в культуру клітин необхідно додати білкові субстанції, які перебували на поверхні пухлинних клітин цього пацієнта. Пухлинні клітини надає патолог. Клітини беруться з хірургічно видаленої пухлини або з матеріалу біопсії. Цією білкової субстанцією може також виступати і т.зв. пухлинний маркер, який раніше визначався в крові пацієнта в підвищеної концентрації.
- В цілому дендритні клітини вирощуються в умовах інкубаційного шафи 7 днів. Зрілість дендритних клітин можна визначити методом мікроскопії - форма у всіх клітин різна, неправильна. Звертають на себе увагу множинні тонкі волосоподобние вирости, оздоблюють клітку.
- Перед тим, як «збирати врожай» клітини проходять ще один тест на зрілість в так званому проточному цитометрі. У ньому визначається наявність специфічних структур, їх кількість і взаємовідношення на поверхні дендритних клітин.
- Після перевірки зрілості, культура дендритних клітин збирається і знову піддається багаторазовій ретельному очищенню. Потім половина клітин збирається для першої ін'єкції в маленький шприц, який передається лікаря. Лікар вводить вакцину пацієнтові в підшкірну клітковину живота в область пахових лімфовузлів і, через 15 хвилин пацієнт може покинути клініку.
- Друга частина клітин збирається для подальшої ін'єкції і зберігається в спеціальному розчині при температурі -196 ° С. Ці клітини будуть розморожені безпосередньо перед другою ін'єкцією і, подібно до першої, набрані в шприц і передані лікарю.
Коли проводиться наступні ін'єкції?
Після першої ін'єкції необхідно регулярно проходити дослідження крові, щоб стежити за реакцією імунної системи. Концентрація імунних клітин, що знищують пухлину значно підвищується. Зниження цієї концентрації є показанням для подальшої ін'єкції.
Які побічні явища можуть виникати в процесі лікування?
При лікуванні дендритними клітинами можуть спостерігатися певні побічні ефекти. Вони можуть виникати як наслідок загального імунної відповіді організму, що призведе до вивільнення речовин, що беруть участь в інфекційних запальних реакціях. Суб'єктивно це може проявитися помірним підвищенням температури тіла і слабкістю. Реакція на ін'єкцію може також виражатися збільшенням лімфовузлів. Іноді спостерігається почервоніння шкіри на місці ін'єкції.
Терапія дендритними клітинами - це гуманне лікування
На відміну від хіміо- або променевої терапії, коли організм піддається впливу чужорідних речовин або опромінення, при лікуванні дендритними клітинами з пухлиною бореться власна імунна система організму. У порівнянні з іншими видами лікування, терапія дендритними клітинами дуже рідко супроводжується побічними реакціями, які слабо виражені і мають короткочасним характером, що навряд чи відбивається на загальному самопочутті та працездатності пацієнта. Крім того, ця терапія проводиться амбулаторно і не вимагає перебування в клініці.
Таким чином, терапія дендритними клітинами може проводиться на додаток рутинного лікування (хіміотерапії), яке пригнічує імунну систему. І з цієї причини має бути розділене з останнім у часі. Результати останніх великих досліджень свідчать про ефективність даного методу, що дає можливість поставити його в один ряд з загальновизнаними методами. Однак, не дивлячись на це, терапія дендритними клітинами як і раніше розглядається як доповнення до вже існуючих методів.
висновок
Лікування дендритними клітинами є молодим видом лікування. Однак, незважаючи на це, вже досить широко відомо в наукових колах завдяки своїй ефективності в лікуванні раку.