Підгрупи крові. Антиген А (рідко В) представлений двома варіантами (під-групами) - Aj і А2. Еритроцити А2 відрізняються від еритроцитів А, знижений-ної агглютінаціонние здатністю (слабкою агглютінабельностью) по відно-шенням до антитіл анти-А. У клінічній трансфузіології підгрупи кро-ві значення не мають, тому при переливанні еритроцитів їх не враховуючи-Н Особам, які мають антиген А2. можна переливати еритроцити А. особам, які мають антиген А. | еритроцити А2. Виняток становлять реципієнти, що майорить екстраагглютініни а, і а2. Ці антитіла не викликають посттрансфу-зйонних ускладнень, однак виявляють себе в пробі на індивідуальну со-місткість на площині при кімнатній температурі. Зокрема, сироватка реципієнта А ^ р агглютинирует еритроцити А, на площині або в пробірках при кімнатній температурі, тому реципієнтам А2 а, р (II) переливають сумісні еритроцити 0 (1), реципієнтам A2 Ba] (IV) - сумісні еритроцит -ти В (Ш) або 0 (1). Існують і інші варіанти слабкого антигену A: Aint. A3. А4. Ах. Afinn. Aend. характеризуються ще більш слабкою агглютінабельностью (див. Системи АВО і НІ).
При наявності у реципієнта слабковираженого антигену D u останній може бути не виявлено експрес-методами визначення резус-фактора, оскільки ті-СТОВ реагенти, приготовані на основі колоїдних розчинів, погано ви-являють D u. моноклональні реагенти IgM, високоактивні щодо анти-гена D, антиген D u не виявляється. Такі помилки не приводять до посттрансфузійні-ним ускладнень, так як реципієнту переливають резус-негативну кров. Вони виявляються, коли хворий поступає до іншої лікувальної установи, де визначення резус-фактора виробляють фахівці іммуносерологі в ла-бораторно умовах з використанням інших методів.
Неспецифічна аглютинація. В основі неспецифічної аглютинації еритроцитів, утворення монетних стовпчиків, лежать певні специфічні-етичні механізми. Клітинні суспензії, особливо еритроцитів, лейкоци-тов, тромбоцитів, як фізичний стан дуже нестабільні: клітини б-б осідають, легко агрегуються. Приєднання антитіл змінює електричні-ський заряд еритроцитів, порушує їх суспензійну стабільність. Остання порушується під дією не тільки антитіл, але і цілого ряду інших факто-рів: білкового і сольового складу середовища, стану системи згортання крові, гормонального статусу.
У практичній роботі неспецифічної називають неочікувану, атіпіч-ву агглютинацию, невластиву конкретної групової антигенної сі-стем. Про неспецифічної аглютинації судять на підставі здатності еритроцитів агглютинироваться сироватками всіх груп, включаючи AB (IV). Неспецифічна аглютинація спостерігається при аутоімунної гемоліті-чеський анемії і інших аутоімунних захворюваннях, що супроводжуються ад-сорбції аутоантитіл або компонентів комплементу на еритроцитах, при ге-молітіческой хвороби новонароджених, еритроцити яких навантажені ал-лоантітеламі матері. Видимість аглютинації можуть створювати т. Н. «Монет-ні стовпчики». Неозброєним оком їх важко відрізнити від справжньої аг-глютінаціі. Якщо краплю еритроцитів, змішану екстемпоре з сироваткою помістити під мікроскоп, можна спостерігати, як еритроцити складаються ШШшетние стовпчики, які швидко збільшуються в довжині і агрегує від істинної аглютинації, при якій агрегація еритроцитів негайно після перемішування з сироваткою, минаючи стадію монет-них ешябіков.
При наявності неспецифічної аглютинації еритроцитів з тестовими реа-Гент анти-А, анти-В, анти-D і іншими необхідно провести пробу зі стан-дротяні сироваткою AB (IV), що не містить антитіл, і фізіологічним розчином натрію хлориду. В іншому випадку кров реципієнта може бути помилково від-несена до групи AB (IV) Rh +, що спричинить за собою неправильний вибір донора. Неспецифічне склеювання еритроцитів, як правило, нестійке. Після додавання 1-2 крапель ізотонічного розчину і похитування платівки не-специфічні агрегати розпадаються. Однак спостерігаються випадки, коли НЕ-специфічна аглютинація не зникає ні при додаванні ізотонічний-го розчину, ні при багаторазовому відмиванні еритроцитів теплим изотоничен-ським розчином (див. Панагглютінація).
У тому випадку, якщо через неспецифічної аглютинації еритроцитів групу крові хворого встановити не вдається, висновок про групову при-надлежности крові не видають, зразок крові направляють в спеціалізований-ву лабораторію, а хворому за життєвими показаннями переливають еритро- ціти групи 0 (1 ).
В основі неспецифічної аглютинації можуть лежати різні механізми. Феномен Томсена. Сутність цього феномена полягає в тому, що еритро- ціти (незалежно від групової приналежності) зберігалися при кімнатній температурі протягом доби або більше і до того не виявляли схильності до неспецифічним реакцій, починають агглютинироваться усіма тестовими сироватками, включаючи сироватку AB (IV) і власну . Подібне реагірова-ня може призвести до неправильного висновку при визначенні групової та резус-приналежності крові. Всі досліджувані зразки еритроцитів, в тому числі еритроцити групи 0 (I) Rh-, можуть бути віднесені до AB (IV) Rh +.
Феномен Томсена частіше спостерігають з відмитим еритроцитами, ніж з еритроцитами, що зберігаються в плазмі або сироватці. Він обумовлений попаданням третьому під суспензія еритроцитів корінобактерій, кишкової палички, протея, мікро-організмів, що містяться в аеропланктон. Бактерії. виділяючи біологічно активні речовини, викликають ферментативний процес в еритроцитах, в ре-док якого вивільняються приховані до цього антигенні рецептори. Підставою для такого висновку послужили експерименти з еритроцитами, обробленими протеолітичнимиферментами тваринного, рослинного і бактеріального походження (трипсин, папаїн, протелін і ін.).
В даний час виділена система антигенів Т-Tn, які активують-ся протеолітичнимиферментами (Тп-активація). Антигени Тп присутні на еритроцитах більшості людей, так само як в сироватці крові більшості людей містяться анти-Тп-антитіла. Посттрансфузійних ускладнень Тп-.щгатела не викликають, проте можуть спотворити результат визначення групової приналежності крові реципієнта, що може привести до цього ускладнення.
Панагглютінація. Неспецифічна аглютинація спостерігається не тільки з еритроцитами, трансформованими бактеріальною флорою, як при феноме-ні Томсена. Сироватки крові, як витримані стандартні, так і свежеза-виготовлених від пацієнта, можуть неспецифически агглютинировать свіжі НЕ-контаміновані еритроцити. Це явище отримало назву панагглюті-нація. Розрізняють декілька типів панагглютінаціі по Н.І. Блінова [1].
Перший тип - повна панагглютінація, коли сироватка пацієнта агглюті-нує стандартні еритроцити всіх груп і свої власні, а еритроцити пацієнта агглютинируются усіма стандартними сироватками. У цих випадках групу крові і резус-фактор визначити звичайним способом без спеціальних прийомів неможливо.
Другий тип - неповна панагглютінація, коли сироватка пацієнта агглю-тінірует стандартні еритроцити всіх груп і свої власні, а еритроцит-mJ пацієнта специфічно агглютинируются стандартними сироватками. При цьому дослідження еритроцитів дає чіткі результати, а перехресна проба і проба на індивідуальну сумісність дає хибнопозитивні результати, на які можна орієнтуватися.
Третій тип - еритроцити пацієнта, як при феномені Томсена, агглютіні-ються усіма сироватками, включаючи власну, а сироватка пацієнта спец-іфіческі реагує зі стандартними еритроцитами.
Панагглютінацію другого і третього типів називають також аутоагглютіна-цією, оскільки і в першому, і в другому випадку еритроцити агглютинируются власної сироваткою. Аутоагглютінація іноді легко виявляється без проведення іммуносерологіческого дослідження - при огляді пробірки, в яку взято кров пацієнта. На стінках пробірки видно характерні поті-ки агглютінати. У таких випадках, як правило, аутоагглютінація спостерігається у фізіологічному розчині натрію хлориду.
Панагглютінація, як і інші прояви неспецифічної агглюті-нації, не має закономірного зв'язку з будь-якої певної патології-їй. Вона може супроводжувати септичним станів, цирозу печінки, кахек-сі, опікової хвороби, нефрозонефрити. Панагглютінація відзначається у біль-них, яким в процесі реанімації проведена інтенсивна трансфузійної-інфузійна терапія. перелито еритроцити, плазма, колоїдні розчини, введені гормони. транквілізатори. антигістамінні препарати. Сироватка крові таких пацієнтів нерідко є желатинізований СГУ-стік і дає атипові реакції, що має відразу ж насторожити лаборанта.
Аглютинація, обумовлена іншими антитілами. При визначенні груп-пи крові перехресним методом можуть бути отримані суперечливі резуль-тати, якщо в досліджуваній крові містяться, крім ізогемагглютінінов а й У антитіла анти-М, анти-N, анти-Lewis, анти-Н. Ці антитіла спотворюють ре-зультати дослідження сироватки реципієнта зі стандартними еритроцита-Н Необхідно пам'ятати, що висновок про групу крові реципієнта роблять на підставі дослідження його еритроцитів. За сироватці реципієнта групу крові не встановлюють.
Особливості груп крові новонароджених. У деяких немовлят-них на відміну від дорослих антигени А і В на еритроцитах виражені сла-бее, а відповідні аглютиніни в сироватці крові можуть бути відсутні, що створює труднощі при визначенні групи крові перехресним мето-дом. Гетерогенні тестові реагенти, отримані від тварин, можуть агглю-тініровать еритроцити новонароджених незалежно від їх групової та резус-приналежності. Алогенних тестові сироватки при визначенні групової та резус-приналежності новонароджених такою властивістю не володіють. Резус-фактор виражений у новонароджених, як і у дорослих.
Причиною помилок можуть бути кров'яні химери (див. Кров'яні химери).
Інші особливості. Визначення групи крові АВО і резус-приналежності може бути ускладнене у зв'язку зі зміною властивостей Ері-троцітов при різних патологічних станах. Це виражається в підвищенні-шенной агглютінабельності еритроцитів, що спостерігається, як уже зазначалося, у хворих на цироз печінки, при опікової хвороби, сепсис. Агглютінабельность може бути настільки висока, що еритроцити склеюються у власній сиворот-ке і фізіологічному розчині Нартов хлориду. При лейкозах спостерігається знижений-ня агглютінабельності еритроцитів, в результаті чого значна їх кіль-кість залишається не залученим в агглютинацию навіть при використанні ви-сокоактівних реагентів (помилкова кров'яна химера).
Щоб уникнути помилок при виконанні іммуносерологіческіх досліджень-ний необхідно бути гранично зосередженим і неухильно виконувати розпорядження інструкції.
У разі сумнівного результату необхідно повторити дослідження, ис-пользуя додатково стандартні реагенти інших серій. Якщо результати цього дослідження також викликають сумніви, зразок крові направляють на дослідження в спеціалізовану лабораторію.