Мікроскопічне дослідження багатьох (5-8) -порцій отриманого дуоденального вмісту необхідно проводити відразу ж після їх отримання. Це обумовлено різко вираженими літичними властивостями жовчі: епітелій і лейкоцити, оповиті пухкої слизом, руйнуються жовчю вже через 5-10 хв, порушується колоїдна стабільність отриманої жовчі, в осад випадають жовчні кислоти і навіть холестерин.
Жовч з пробірки виливають в чашку Петрі і розглядають на білому і чорному тлі. Пастерівської піпеткою з грушею виловлюють пластівці слизу, переносять їх на предметне скло, накривають покривним і вивчають під мікроскопами (окуляр 10х, об'єктиви 20X і 40Х).
Матеріал для мікроскопічного дослідження можна зберігати протягом 1 - 2 год, додавши до отриманої жовчі, 1/3 обсягу 10% нейтрального формаліну. Консервування ефективніше при додаванні до 10-20 мл отриманої жовчі 2 мл 10% ЕДТА або 1 мл (1000 ОД) контрикала (тзалола, або трасилола,).
Жовч, отримана навіть через спіральний двоканальний зонд, являє собою складну, гетерогенну систему, що складається з шлункового соку, дуоденального вмісту і безпосередньо жовчі. Пластівці слизу, виявлені в жовчі, можуть відбуватися з порожнини рота, носовій частині глотки, легень, шлунка і стравоходу. Під впливом ферментів клітинні елементи жовчі швидко деформуються і руйнуються. На дно пробірки під впливом соляної кислоти, секрету підшлункової залози, бактерій з жовчі можуть випадати кристалічні освіти (жовчні кислоти, жирні кислоти, холестерин), що утрудняють інтерпретацію липолитических (ліпогенного) властивостей досліджуваної жовчі.
Лейкоцитарні клітини проковтнули екськретов дихальних шляхів мають більш виражену зернистість, поруч з ними знаходяться альвеолярнімакрофаги і компактна слиз. Лейкоцити порожнини рота зазвичай розташовуються на тлі неороговевающего багатошарового плоского епітелію. Лейкоцити шлункового походження можуть поєднуватися з залозистим епітелієм. Шлунковий сік у такого хворого зазвичай соляної кислоти не містить. Лейкоцити і. залозистий епітелій, що потрапили в жовч з кислого шлунка, представлені голими ядрами, що лежать на ніжно-волокнистої слизу.
Можливе попадання в жовч лейкоцитів з уражених запальним процесом проток підшлункової залози (каналікулярний панкреатит). При каналікулярним пакреатіте протоки підшлункової залози заповнені ексудатом і лейкоцитами. З урахуванням всієї клінічної картини при виявленні в пластівцях слизу в дуоденальному вмісті лейкоцитів і циліндричного епітелію можна припустити, що вони потрапили в жовч з проток підшлункової залози.
Лейкоцити, виявлені в порції А (дуоденальна жовч), а також після введення магнезії сульфату в поєднанні з високим циліндричним кутикулярним епітелієм вказують на наявність дуоденита.
Циліндричний (призматичний) епітелій, що вистилає всю поверхню дванадцятипалої кишки, має в зоні, зверненої в порожнину кишки, досить товсту кутикулу (шкірку), добре помітну в нативному препараті. Кутикула складається з мережі тонких перекладин, між якими розташовані вузькі канальці, що зумовлюють всмоктування. Ядра епітелію дванадцятипалої кишки великі, овальної форми, що видавлюють нижню частину клітини.
Початковим елементом жовчовидільної системи є жовчні капіляри, стенкн яких утворюють мембрани печінкових клітин. Жовчні капіляри в місці їх з'єднання з печінковими пластинками (жовчними ходами портальних полів) називаються холангіол. Вони вистелені клітинами кубічного епітелію висотою 10-12 мкм з великими круглими ядрами.
Междольковие жовчні проточки вистелені клітинами циліндричного епітелію висотою 15-18 мкм з круглими ядрами, розташованими близько до основи. Такі епітеліальні клітини різної величини часто виявляються в поєднанні з лейкоцитами в дуоденальної (А) і печінкової (С) жовчі у хворих холангітом.
При цитологічному дослідженні, міхурово жовчі іноді вдається виявити клітини циліндричного епітелію висотою 20-50 мкм. У нативних препаратах зазвичай добре виділяються великі круглі або овальні ядра, розташовані близько до основи клітин; цитоплазма нерідко вакуолізнрованная, біля основи клітин закінчується гострим Хвостовидний виростом - епітелій жовчного міхура.
Клітини слизових залоз жовчного міхура (келихоподібних) зустрічаються дуже рідко, але можуть бути виявлені в жовчі, отриманої під час операції з запаленого жовчного міхура. Ці клітини особливо швидко розпадаються.
Загальний жовчний протік вистелений високим циліндричним епітелієм, клітини якого різко відрізняються від інших подібних епітеліальних клітин. Це досить довгі (до 37 мкм), дуже вузькі клітини із стисненими та витягнутими ядрами ( «сірникові клітини»). Наявність цих клітин в дуоденальної жовчі у вільному вигляді і в поєднанні з лейкоцитами вказує на запалення загальної жовчної протоки (холедоха).
Лейкоцітоіди - круглі великі клітини, більше лейкоцитів на 1/3. Являють собою округлі в результаті дистрофії клітини циліндричного епітелію дванадцятипалої кишки. З'являються лейкоцітоіди при посиленому виділенні міхурової жовчі в дванадцятипалу кишку. Велика кількість лейкоцитів можна виявити в безбарвному дуоденальному вмісті при механічної жовтяниці. Велика кількість лейкоцітоідов відзначається у молодих людей з підвищеною нейрогуморальної подразливістю. У поєднанні з циліндричним епітелієм дванадцятипалої кишки лейкоцітоіди можуть спостерігатися при дуоденіт або виразкової хвороби. Зазвичай для таких хворих характерна висока кислотність шлункового вмісту.
Виявлення в дуоденальному вмісті кристалічних і аморфних осадових утворень жовчі вказує на те, що вона втратила свою колоїдну стабільність. Причиною появи їх може бути запальний процес в жовчних шляхах, порушення колоїдної стабільності в результаті тривалого стояння або попадання в жовч шлункового вмісту.
Діагностичне значення мають такі кристалічні освіти, які виявляються в жовчі: мікроліти, кристали холестерину, жовчні і жирні кислоти, білірубіната кальцію і коричневі плівки жовчного міхура.
Мікроліти - темнуваті, округлі або багатогранні компактні освіти, іноді мають концентричну смугастість; складаються з вапна, слизу і невеликої кількості холестерину. Для виявлення в жовчі мікролітів використовується реакція Сальківського.
Методика. До покривному склу, під яким знаходяться досліджувані кристали або мікроліти, підносять краплю концентрованої сірчаної кислоти і опускають її таким чином, щоб вона торкнулася покривного скла. З іншого боку покривного скла прикладають фільтрувальну папір. При цьому кислота досягає досліджуваних кристалів. При наявності в складі мікролітів холестерину вони, розплавляючись, дають рожеве або червоне забарвлення. Чистий холестерин, плавлячи під дією сірчаної кислоти, забарвлюється в яскраво-червоний колір. Мікроліти найчастіше виявляються в останній порції жовчі (В) і порції залишкового скорочення жовчного міхура (ВС).
Тонкі безбарвні чотирикутні пластинки, іноді з «обламаним» кутом, які, накладаючись один на одного, як би утворюють сходинки (рис. 87). Виявлення їх в жовчі зазвичай пов'язане з порушенням її колоїдної стабільності • внаслідок несвоєчасного дослідження. У нормі кристали холестерину зустрічаються в убогому кількості. При патології жовчних шляхів відсоток виявлення кристалів холестерину значно вище, а кількість їх більше.
Білірубіната кальцію являє собою аморфні крупинки бурого, чорного, коричневого або золотисто-жовтого пігменту. Часто зустрічається в поєднанні з кристалами холестерину в порції жовчі А, при затримці її в загальному жовчному протоці - і в порції ВС. Кристали билирубината кальцію у здорових людей не виявляються, вони виявляються лише в жовчі літніх людей, які страждають тривалим, неповним застоєм жовчі і її інфікуванням.
Кристали жирних кислот.
Ніжні тонкі безбарвні голки, що перетворюються при підігріванні нативного препарату на полум'ї спиртівки в краплі, мають діагностичне значення тільки при виключенні попадання в жовч шлункового вмісту. Вказують на зниження pH жовчі внаслідок запального процесу, бактеріохоліі, діскрініі і на зниження розчинності жирних кислот. Виявляються в тих же дозах жовчі і при тій же патології жовчних шляхів, що і кристали холестерину і билирубината кальцію.
Дрібні блискучі коричнево-жовті або сірі зернятка. Найчастіше випадають в осад у великій кількості при попаданні в жовч кислого шлункового вмісту. Крупинки жовчних кислот іноді виявляються в міхурово жовчі, зібраної передхолецистектомії. Солі жовчних кислот можуть входити до складу жовчних каменів. Виявлення в чистих працях дуоденальної жовчі кристалів жовчних кислот у вигляді осаду або в слизу вказує на діскрініі.
Являють собою відкладення слизу і жовчі на внутрішній поверхні жовчного міхура. Під мікроскопом нагадують дрібні осколки розбитого фарфорового судини. Зустрічаються в міхурово жовчі у хворих з патологією жовчного міхура.
До артефактів, що виявляється в жовчі, відносяться частинки дуоденального зонда, кристали магнезії сульфату, оскільки покривних стекол.
Найпростіші, гельмінти, гриби.
При дослідженні жовчі можна виявити яйця печінкової, котячої, ланцетовидной, китайської двуустки, а також особини стронгілід і тріхостронгілід, вегетативну форму лямблій і гриби роду Candida. Діагностичне значення рухомих і нерухомих форм гельмінтів і найпростіших однаково.
Керівництво до практичних занять з клінічної лабораторної діагностики / Под ред. проф. М.А. Базарнова, проф. В.Т. Морозовой.- К. Вища школа, 1988.- 318 с. 212 мул.