Винахід відноситься до медицини і являє собою спосіб прискореної забарвлення гістологічних препаратів для виявлення мікобактерій туберкульозу, що включає приготування гістологічних препаратів за загальноприйнятою методикою, фарбування їх по Ціль-Нільсон, що відрізняється тим, що після стандартної підготовки препаратів до фарбування зрізи проходять процедуру депарафінізації шляхом послідовного розміщення їх в ксилол і спирти низхідній концентрації по 5 хвилин в термостат при температурі 54 ° C з наступним приміщенням їх в воду, потім в 1% розчин йодної кислоти на 2 хвилини і промиванням в проточній воді протягом 10 секунд, після чого на зріз, покритий фільтрувальної папером, наливають карбол-фуксин Ціля і підігрівають над полум'ям спиртівки до появи парів протягом 2 хвилин, залишають фарбу на зрізі після припинення підігрівання на 3-5 хвилин, прибирають фільтрувальну папір і споліскують зрізи в воді, диференціюють їх 1% кислотним буфером, споліскують у водопровідній воді протягом 1 хвилини, після чого на зріз поміщають розчин метиленового синього по Лефлера і підігрівають над полум'ям спиртівки до появи парів, промивають у воді, диференціюють в 1% кислотному буфері і добре промивають водою, зневоднюють в спиртах висхідної фортеці протягом 1 хвилини, поміщають в ксилол і укладають в бальзам. 1 пр.
Винахід відноситься до медицини, зокрема до патологічної анатомії і фтизіатрії, і стосується способу прискореної методики забарвлення гістологічних препаратів для виявлення мікобактерій туберкульозу.
Однак запропонований спосіб незручний тим, що забарвлення препаратів займає велику кількість часу. Тому необхідно удосконалити даний метод для достовірності та об'єктивізації посмертного патологоанатомічного дослідження туберкульозу з метою більш швидкої діагностики.
Завданням цього винаходу є розробка прискореного методу забарвлення, що дозволяє за коротший проміжок часу достовірно проводити посмертну діагностику туберкульозу легенів.
Суть винаходу полягає в тому, що в способі прискореної забарвлення гістологічних препаратів для виявлення мікобактерій туберкульозу, що включає приготування гістологічних препаратів за загальноприйнятою методикою, фарбування їх по Ціль-Нільсон, після стандартної підготовки препаратів до фарбування зрізи проходять процедуру депарафінізації шляхом послідовного приміщення їх в ксилол і спирти низхідній концентрації по 5 хвилин в термостат при температурі 54 ° C з наступним приміщенням їх в воду, потім в 1% розчин йодної кислоти на 2 м ін і промиванням в проточній воді протягом 10 секунд, після чого на зріз, покритий фільтрувальної папером, наливають карбол-фуксин Ціля і підігрівають над полум'ям спиртівки до появи парів протягом 2 хвилин, залишають фарбу на зрізі після припинення підігрівання на 3-5 хвилин , прибирають фільтрувальну папір і споліскують зрізи в воді, диференціюють їх 1% кислотним буфером, споліскують у водопровідній воді протягом 1 хвилини, після чого на зріз поміщають розчин мітіленового синього по Лефлера і підігрівають над полум'ям спиртівки до появле ия парів, промивають у воді, диференціюють в 1% кислотному буфері і добре промивають водою, зневоднюють в спиртах висхідної фортеці протягом 1 хвилини, поміщають в ксилол і укладають в бальзам, причому просвітлення в карбол-ксилоле не припустимо, тому що це може привести до вимивання барвника.
Завдання досягається наступним чином.
За загальноприйнятою методикою тканину легенів, лімфатичних вузлів, бронхів витягуються при аутопсії. Поміщаються в ємність, заповнену 10% розчином нейтрального формаліну. Через 12-24 години з матеріалу вирізаються поздовжні шматочки досліджуваних тканин товщиною до 05, -1,0 см і знову занурюють в ємність з 10% розчином нейтрального формаліну. Потім через 12 годин після ретельного промивання протягом 5 годин в проточній воді матеріал зневоднюють в спиртах висхідної фортеці (50% (3 години), 60% (3 години), 70% (12 годин), 80% (12 годин), 96 % (12 годин), 100% (12 годин)) з наступним зануренням в касторове масло на 12-24 години.
Приклад використання запропонованого способу.
Технічний результат використання винаходу:
1. Достовірність і об'єктивізація посмертної патологоанатомічної діагностики туберкульозу.
2. За рахунок нагрівання розчинів в термостаті і над полум'ям спиртівки поліпшується якість забарвлення гістологічних зрізів.
3. Скорочується час дослідження, що дозволяє зробити висновок у більш ранні терміни, знизити токсичний вплив реагентів на медичний персонал.
4. Даний спосіб може застосовуватися для диференційованої діагностики різних гранулематозних утворень.
5. Спосіб може бути використаний для термінової интраоперационной діагностики (шляхом виготовлення гістологічних зрізів на заморожувати мікротому).
2. Волкова О.В. Єлецький Ю.К. Основи гістології та гістологічної техніки. Москва. «Медицина». +1982.
ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
Спосіб прискореної забарвлення гістологічних препаратів для виявлення мікобактерій туберкульозу, що включає приготування гістологічних препаратів за загальноприйнятою методикою, фарбування їх по Ціль-Нільсон, що відрізняється тим, що після стандартної підготовки препаратів до фарбування зрізи проходять процедуру депарафінізації шляхом послідовного приміщення їх в ксилол і спирти низхідній концентрації по 5 хвилин в термостат при температурі 54 ° C з наступним приміщенням їх в воду, потім в 1% розчин йодної кислоти на 2 хвилини і промиванням в про точної воді протягом 10 секунд, після чого на зріз, покритий фільтрувальної папером, наливають карбол-фуксин Ціля і підігрівають над полум'ям спиртівки до появи парів протягом 2 хвилин, залишають фарбу на зрізі після припинення підігрівання на 3-5 хвилин, прибирають фільтрувальну папір і споліскують зрізи в воді, диференціюють їх 1% кислотним буфером, споліскують у водопровідній воді протягом 1 хвилини, після чого на зріз поміщають розчин мітіленового синього по Лефлера і підігрівають над полум'ям спиртівки до появи парів, промивають в воді, диференціюють в 1% кислотному буфері і добре промивають водою, зневоднюють в спиртах висхідної фортеці протягом 1 хвилини, поміщають в ксилол і укладають в бальзам, причому просвітлення в карбол-ксилоле не припустимо, тому що це може призвести до вимивання барвника.