Різка на мікротому
Товщина зрізу залежить від пропонованих до препарату вимог і від характеру об'єкта. Молоді корінці для вивчення вмісту клітини, будови та розподілу ядра слід різати товщиною 7-10 мк.
При нормальній різанні ніж повинен бути поставлений перпендикулярно санчатах і напрямку свого руху. Найбільш зручні плоско-увігнуті ножі з верхньої увігнутою поверхнею. Ніж не повинен мати зазубрин, він повинен бути гострим і чистим.
Правильно наточеними ніж повинен мати прямий ріжучий край ( "жало"). По боках жала ніж повинен бути сточен під більш тупим кутом, ніж всі лезо бритви, так щоб уздовж жала утворилися вузькі фасетки (рис. 25).
Мал. 25. Лезо мікротомних ножа: А - мікротомних ніж в поперечному перерізі: а - фасетка; б - лезо; Б - нахил ножа до поверхні блоку: а - жало ножа; б - кут, утворений фасеткою з поверхнею блоку; в - кут нахилу ножа до поверхні блоку; г - парафіновий блок
Для успішної різання істотне значення має кут нахилу ножа до площини зрізу. Зазвичай його встановлюють так, щоб площина фасетки майже прилягала до площини зрізу, утворюючи з нею нікчемний кут. При цьому кут нахилу всієї площини ножа буде невеликим, але помітним. Ніж закріплюється в потрібному положенні на санчатах за допомогою системи гвинтів і шарнірів. Для встановлення кута нахилу є відповідна шкала.
Після установки підставки з об'єктом, зміцнення ножа на санчатах (або нерухомому затискачі) і установки на потрібну товщину зрізу можна приступити до різання. Різати треба швидко і плавно. При правильному різанні наступний зріз переднім краєм примикає до заднього краю попереднього, утворюючи стрічку. При різанні на ротаційному мікротому правою рукою обертають колесо приводу. При опусканні утримувача об'єкта (столика) з блоку, що насувається на лезо ножа, знімається зріз. Після цього власник автоматично висувається вперед на відстань, рівну заданої товщині зрізу. Ліва рука працює підтримує утворюється парафінову стрічку, що ковзає по нерухомому ножа. При різанні на мікротому салазочного типу по черзі роблять рухи правою і лівою рукою. Таким чином, за зняттям зрізу слід подача блоку на висоту, рівну заданої товщині зрізу; ці почергові руху призводять до утворення серії зрізів - стрічки, що розташовується на поверхні ножа і звисає з нього. Яка утворюється стрічку час від часу поділяють і укладають в коробку з чорним дном (так як на білому тлі прозорий парафін важко побачити). На початку стрічки кладуть зняту з кубика етикетку. При отриманні стрічки потрібно стежити, щоб жоден зріз з неї не загубився, і якщо зрізи не утворюють суцільної стрічки, їх потрібно збирати окремо і укладати в потрібній послідовності *.
* (Іноді стрічку, зняту з мікротомних ножа, не кладуть в коробку, а шматочки її, що складаються з однакового числа зрізів, поміщають безпосередньо на предметне скло, одночасно з різкою здійснюючи і наклеювання стрічки.)
Стрічку з ножа слід знімати м'яким пензликом, ні в якому разі не голками, що не скальпелем, щоб на ножі не залишалося подряпин.
Для успішної різання важливо, щоб матеріал був добре просочений парафіном, тоді він не буде кришитися. Має значення також температура повітря, при якій відбувається різка. Зазвичай нормальна кімнатна температура буває низька для того, щоб парафін легко різався і зрізи легко злипалися, утворюючи стрічку. Тому слід підігрівати блок перед різкою, а також ніж і блок під час різання, використовуючи тепло близько поставленої лампи, рефлектора і т. П.
З різних сортів парафіну слід віддавати перевагу той, який володіє більш низькою температурою плавлення, особливо в разі звичайних, які не відрізняються особливою твердістю об'єктів.
Якщо в процесі різання до ножа прилипне парафін, то це буде ускладнювати різання, так як до цього парафіну стрічка буде прилипати і рватися. Тому слід час від часу виймати ніж з санчат, змивати з нього парафін з крапельниці ксилолом (бензолом, толуолом або бензином) і витирати чистою м'якою ганчіркою. При цьому треба тримати ніж так, щоб не порізати рук (найкраще обухом до себе, ріжучим краєм від себе).
Для того щоб різка на мікротому йшла успішно, потрібен час від часу змащувати всі його робочі частини, в тому числі і рейки, гасом або машинним маслом, щоб санчата з ножем рухалися без жодної напруги.
Першим етапом при виготовленні мікротомних препарату є наклеювання парафінової стрічки на предметні скельця.