Об'єктами цитологічного дослідження при меланомі служать мазки-відбитки і зіскрібки з мокрої, виразок або мацерированной поверхні пухлини шкіри, пунктати пухлини і лімфатичних вузлів, підозрілих на метастатічское поразку. Просте прикладання предметного скла до виразок поверхні не завжди дозволяє отримати досить інформативний матеріал. Кращі результати дає зішкріб ураженої поверхні дерев'яним шпателем або гострим краєм хірургічного інструмента після попереднього зняття гнійного нальоту за допомогою марлевого тампона, змоченого фізіологічним розчином. При сухих скоринках, що не відділяються при легкому дотику, можна на 3-4 години прикласти до пухлини серветку з індиферентної антисептичної або метилурациловой маззю, після цього скоринки легко видаляються і з поверхні пухлини роблять відбитки чи легкий зішкріб. Пункцію пухлини при підозрі на меланому виробляють тонкої голкою безпосередньо перед операцією або лазертерапія.
Рідше об'єктом цитологічного дослідження при меланомі можуть стати пунктати метастатических лімфатичних вузлів, коли первинний осередок меланоми не виявлене, і клінічний діагноз не ясний або помилковий.
Кращим методом забарвлення мазків при цитологічної діагностики меланом шкіри вважається забарвлення азуреозіном, що дозволяє більш чітко виявити пилоподібні гранули меланіну в цитоплазмі пухлинних клітин, що особливо важливо для діагностики в тих випадках, коли меланіну в пухлини мало.
Наявність в цитоплазмі пухлинних клітин пігменту меланіну є дуже суттєвою ознакою меланом. При фарбуванні азуреозіном меланін представляється у вигляді різної величини гранул або крапель, рідше - у вигляді пилоподібної зернистості від сірого до чорного кольору (при забарвленні гематоксиліном і еозином - від коричневого до чорного кольору). Кількість пігменту в клітинах пухлини різна. Іноді він повністю заповнює цитоплазму клітини, в зв'язку з чим розглянути ядро та інші деталі будови неможливо. Пігмент може розташовуватися і внеклеточно у вигляді гранул різної форми і величини. В інших випадках меланін мається на невеликих кількостях лише в окремих клітках або відсутня. У випадках т.зв. безпігментні меланом при виникненні діагностичних труднощів може бути корисна ДОПА-реакція, яка сприяє виявленню безбарвного попередника меланіну - пропігмента тирозину у вигляді гранул коричневого або чорного кольору чи пилоподібної зернистості.
Однак найбільш інформативними для постановки цитологічного діагнозу меланоми є цитоморфологические особливості самих пухлинних клітин.
Залежно від переважання в мазках пухлинних клітин з тими чи іншими цитоморфологічне особливостями виділяють 4 основних типи меланом: епітеліоподобний, веретеноклеточний, невусоподобной і змішано-клітинний. Такі ж 4 основні клітинні типи визначаються і при гістологічному дослідженні.
Визначення клітинного типу меланом шкіри при цитологічному дослідженні має певне клінічне значення, тому що різні типи меланом мають різні тенденції до місцевого поширенню і регіонарногометастазування і відомості про тип пухлини орієнтують хірурга при плануванні оперативного втручання на первинному осередку. Однак провідне значення у визначенні прогнозу меланом має глибина інвазивного росту, яка може бути визначена лише при гістологічному дослідженні видаленої пухлини.
Останнім часом з'явилася тенденція до більш докладної цитологічної характеристиці меланом з виділенням крім основних клітинних типів різних їх варіантів. Така детальна цитологічна класифікація меланом має певне значення при проведенні диференціальної цитологічної діагностики, проте клінічне і прогностичне значення різних виділених варіантів не відомо.
Епітеліоподобний тип меланоми характеризується переважанням в мазках пухлинних клітин округлої, неправильно округленої або овальної форми, розташованих розрізнено або у вигляді пухких скупчень і мають схожість з епітеліальними клітинами. У ряді випадків пухлинні клітини досить однорідні, але частіше відзначається значний їх поліморфізм, вони відрізняються один від одного за розміром і формою, інтенсивності забарвлення, кількості ядер і ядерець, структурі хроматину. Зустрічаються окремі пухлинні клітини з дуже великими інтенсивно забарвленими ядрами, двоядерні і багатоядерні клітини. Ядра багатьох клітин - лопатеві, бобовідние, мають нерівні контури, іноді відзначається брунькування ядер та їх фрагментація, зустрічаються фігури мітотичного поділу. Структура хроматину ядер щодо рівномірна, дрібнозерниста або петлистая, у багатьох клітинах в ядрах є по 1-2, а іноді і більше гіпертрофованих, неправильної форми ядерець. Цитоплазма клітин - то більше, то менше рясна, з рівними або фестончастими контурами. В одних випадках вона забарвлюється різко базофильно, в інших - слабше, а іноді - прозора і майже зливається з фоном препарату.
Кількість меланіну в пухлинних клітинах може бути різним, в деяких випадках його дуже багато. в інших він визначається з працею. Клітини беспигментной епітеліоподобной меланоми нерідко дуже схожі на клітини залозистого раку. На відміну від клітин меланоми клітини залозистого раку, як правило, розташовані у вигляді груп і комплексів тісно пов'язаних один з одним клітин та фарбуються більш інтенсивно.
При веретеноклеточной меланоми пухлинні клітини мають витягнуту веретеноподібну форму і розташовуються розрізнено, скупченнями, переплітаючись відростками цитоплазми, а також у вигляді пучків і тяжів. Ядра - округлі і овальні, в деяких клітинах мають видовжену витягнуту форму. Цитоплазма забарвлюється базофильно, має відростки різної довжини, іноді тягнуться на значну відстань. Пилоподібні гранули меланіну найбільш сконцентровані в відростках цитоплазми, що надає їм зернистий вид. Наявність пігменту в клітинах дозволяє диференціювати веретеноклеточний тип меланоми від інших сполучнотканинних пухлин (саркома, невринома).
Цитологічна діагностика цього типу меланоми може уявити значні труднощі через схожість пухлинних клітин з клітинами невусів, і висновок про наявність меланоми часто дається лише в імовірною формі. Відмінними цитологическими особливостями невусів є наступні: монотонна мікроскопічна картина, відсутність поліморфізму ядер, відсутність клітин з іншими ознаками злоякісності.
При смешанноклеточний меланоми в мазках є пухлинні клітини різноманітної величини і форми і важко виділити якийсь переважний тип клітин. Однаково часто зустрічаються пухлинні клітини округлої, овальної, веретеновидной і полігональної отростчатой форми.