Мікробіологічне дослідження крові є провідним при лабораторній діагностиці сепсису. Крім того, при септікопіеміях досліджують матеріал з первинних і вторинних місцевих осередків та інфекції. Кров беруть в період підйому температури до початку антибіотикотерапії з ліктьової вени в кількості не менше 10 мл у дорослих і 5 мл у дітей, так як мікроорганізми знаходяться в крові в порівняно невеликих кількостях.
Посіви роблять біля ліжка хворого в колби з 50-100 мл живильного середовища. Порівняно великі обсяги живильного середовища (в 10 перевищують кількість крові) необхідні для усунення бактерицидного дії сироваткових білків. У разі транспортування крові до неї додають антікоогулянти: цитрат або оксалат натрію, декстран сульфат, гепарин.
Посіви роблять на цукровий бульйон і інкубують їх при 37 ° C протягом 10 днів при щоденному контролі. У разі відсутності росту мікроорганізмів дають негативну відповідь. При наявності росту роблять мазки, які забарвлюють по Граму. Виділену чисту культуру мікроорганізмів ідентифікують і визначають її чутливість до антибіотиків.
При оцінці результатів необхідно виходити з того, що сепсис є важким загальним інфекційним захворюванням, що розвиваються в умовах різкого гноблення всіх основних механізмів імунітету. Збудниками сепсису є різні патогенні і умовно-патогенні мікроорганізми. Одноразовий посів крові при сепсисі не завжди призводить до виділення культури. Більш інформативним є триразовий посів крові з добовим інтервалом. На тлі антибіотикотерапії кров у хворих для посіву слід брати 5-6 разів.
Самостійна робота
Провести облік результатів посіву гнійних виділень. Макроскопічна характеристика колоній. Відзначити наявність або відсутність пігменту.
З лецитиназної-позитивних колоній на ЖСА приготувати мазок, забарвити за Грамом, промікроскопувати.
Пересів на скошений МПА для виділення чистої культури. Зробити запис в протоколі (2-й день).
УИРС «Носійство стафілококів серед студентів медакадемії»;
б) з відібраних колоній приготувати мазки, забарвити за Грамом;
в) матеріал з колоній пересіяти на скошений МПА. Зробити запис в протоколі.
Лабораторна діагностика
Бактеріоскопічне дослідження. Мазки для первинної бактеріоскопії готують з патологічного матеріалу, фарбують за Грамом і проводять мікроскопію.
При позитивному результаті виявляють ланцюжки коків.
Бактеріологічне дослідження. Досліджуваний матеріал засівають на кров'яний агар в чашку Петрі. Після інкубації при 37 ° C протягом 24 год відзначають характер колоній і наявність навколо них зон гемолізу. З частини матеріалу, взятого з колоній, готують мазок, фарбують за Грамом і проводять мікроскопію. Для отримання чистої культури 1-3 підозрілі колонії пересівають в пробірки зі скошеним кров'яним агаром і цукровим бульйоном.
Заключним етапом бактеріологічного дослідження є ідентифікація виділеної культури за антигенними властивостями. За цією ознакою всі стрептококи діляться на серологічні групи (A, B, C, D і т.д.). Серогрупу стрептококів визначають в реакції преципітації з полісахаридних преціпітіногеном C, виділеним з досліджуваної культури, і сироватками (зазвичай 4 найпоширеніші серогрупи - A, B, C, D). Більшість патогенних для людини β-гемолітичних стрептококів відноситься до серологічної групі A. За змістом типоспецифічних антигенів протеїнової природи β-гемолітичні стрептококи поділяються на серовар, з яких 47 відносяться до групи А. сероварів стрептококів визначають в реакції аглютинації. Розгорнуте серологічне дослідження і типування стрептококів проводять головним чином для епідеміологічного обстеження. Виділену культуру стрептокока перевіряють на чутливість до антибіотиків методом дисків. При підозрі на сепсис роблять посіви з крові хворого.
Серодиагностика. При окремих нозологічних формах стрептококової інфекції встановлюють наявність специфічних антигенів в крові хворого за допомогою РСК або реакції преципітації. Антитіла до О-стрептолізин визначають головним чином для підтвердження діагнозу ревматизму. Реакція заснована на придушенні здатності О-стрептолізин розчиняти еритроцити при наявності в крові хворого відповідних антитіл. Реакцію ставлять зі стандартним сухим О-стрептолізин.