5.1. обсяг дослідження
5.2.1. Методика посіву змивів на бактерії групи кишкових паличок
5.2.2. Методика посіву на загальну кількість бактерій
5.2.3. Методика посіву на St.aureus
5.2.4. оцінка результатів
При поточному санітарному нагляді за підприємствами громадського харчування і торгівлі, дитячими та лікувальними установами дослідження змивів проводять на присутність бактерій групи кишкових паличок.
Дослідження на наявність St.aureus, бактерій роду Рroteus, визначення загальної бактеріального обсіменіння проводиться за показаннями. наприклад:
а) Дослідження змивів на стафілококи проводять при обстеженні кремово-кондитерських цехів, їдалень і ресторанів, молочних кухонь та інших харчоблоків, звертаючи особливу увагу на контроль рук персоналу;
б) загальну мікробну забрудненість можна визначати для встановлення ефективності санітарної обробки посуду в посудомийних машинах, а також при оцінці нових миючих і дезінфікуючих засобів.
У разі повторного виявлення бактерій групи кишкових паличок в значному відсотку змивів на об'єкті рекомендується провести дослідження змивів з інвентаря, обладнання і рук персоналу на наявність ентеробактерій * (11).
Методика посіву змивів на бактерії групи кишкових паличок
При планових санітарно-гігієнічні обстеження для виявлення БГКП виробляють посіви змивів на середовища Кесслер з лактозою або КОДА, при цьому в пробірку з середовищем опускають тампон і переносять залишилася змивну рідина.
Посіви на середовищах Кесслер або КОДА інкубують при 37 ° С, через 18 - 24 години з середи Кесслер проводять висів на щільну диференціальну середу Ендо, з середи КОДА висів виробляють тільки в разі зміни забарвлення середовища або її помутніння. Подальший хід дослідження см. В п.4.4.1.
Методика посіву на загальну кількість бактерій
Для визначення загальної обсіменіння поверхонь контрольованих предметів взяття змивів виробляють за методикою, описаної вище (п.4.3.), Перед посівом в пробірку з тампоном додають 5 мл 0,1% пептонною води або ізотонічного розчину хлориду натрію. Тампон ретельно відмивають, після чого 1,0 мл змивний рідини поміщають в чашку Петрі і заливають розплавленим МПА. Чашки поміщають в термостат при 30 ° С. Попередній підрахунок колоній, що виросли проводять через 48 годин, остаточний - через 72 години. Кількість колоній, що виросли на чашці, множать на 10 для визначення загальної кількості бактерій, що містяться на поверхні досліджуваного предмета.
Методика посіву на St.aureus
Для виявлення St.aureus посів змивів виробляють на чашки з МСА або ЖСА, безпосередньо втираючи посівний матеріал тампоном, потім останній занурюють в пробірку з 6,5% сольовим бульйоном. Якщо необхідно визначити і бактерії групи кишкових паличок, то залишки змивний рідини переносять піпеткою в середовища Кесслер або КОДА (п.4.4.1.).
Виявлення санітарно-показових і умовно-патогенних бактерій в змивах з поверхонь чистих, підготовлених до роботи предметів, інвентарю та обладнання, а також рук персоналу свідчить про порушення санітарного режиму і дає підставу для проведення адміністративних заходів.
Рецепти поживних середовищ
6.1. Ізотонічний розчин - 0,85% розчин хлористого натрію
6.2. 0,1% -й водний розчин пептона (пептонна вода)
6.3. Середовище для визначення загальної кількості мезофільних аеробних і
факультативно анаеробних мікроорганізмів
6.4. Середовище Кесслера з лактозою
6.6. Бульйон з лактозою, бичачої жовчю і діамантовим зеленим - ЖЛБ
6.7. ЄС-бульйон (для підтверджує посіву на Е.coli за методом
6.8. Середовищах Гіса з глюкозою
6.9. Середовища Ендо, Левіна
6.10. Середовище для визначення індолообразованія
6.11. Бульйон на переварити Хоттингера для визначення індолообразованія
6.12. середа Кларка
6.13. Розчин метилового червоного для тесту з метил-рот
6.14. Реактиви для реакції Фогеса-Проскауера
6.15. Цитратна середу Козера
6.16. середа Сіммонса
6.17. Середовище Ресселя з сечовиною з сухих поживних середовищ
6.18. Тресахарний агар з сечовиною по Олькеницького
6.19. сольовий бульйон
6.20. цукровий бульйон
6.21. стерильне молоко
6.22. Молочно-сольовий агар
6.23. Жовточно-сольовий агар
6.24. молочний агар
6.25. Цитратна плазма кролика
6.26. Середовище для визначення реакції окислення маніту в анаеробних
6.27. Середовище Плоскирєва з сухих поживних середовищ
6.28. Вісмут-сульфіт агар (середа Вільсон-Блера)
6.29. Середовище для визначення ферментації мальтози
6.1. Ізотонічний розчин - 0,85% розчин хлористого натрію
Для приготування ізотонічного розчину з рН 6,9 - 7,0 використовують дистильовану воду, рН якої перевіряють індикатором бромтимолблау, при його додаванні колір води повинен бути темно-зеленим. В інших випадках воду не використовують. Ізотонічний розчин розливають в пробірки або флакони в необхідних кількостях, стерилізують при 1 атм. 20 хв.