Використання: ветеринарія і медицина. Суть винаходу: винахід відноситься до лікарського засобу для лікування ретровірусних інфекцій, яке містить безбактеріальние і безбілкові екстракти з Escherichia coli і при необхідності екстракти зелених і жовтих листя Ginkgo biloba. 7 з.п. ф-ли.
Винахід стосується застосування лікарського засобу на основі безбактеріальних і безбілкових екстрактів з Escherichia coli для лікування ретровірусних інфекцій.
Ретровіруси є кулястими, покритими оболонкою, РНК-вірусами, з яких два підродини патогенні для людини і тварин. Характерною ознакою ретровірусів є зворотна транскриптаза, РНК-залежна ДНК-полімераза. При реплікації однониткових вірусна РНА транскрибується зворотного транскриптазой в двуніточную проміжну сходинку ДНК і остання вбудовується в якості провируса в геном хазяйської кліті. Провірус через регулярну транскрипцію починають освіту РНК - містять вірусних частинок, які залишають хазяйську клітину після відокремлення. Ретровіруси викликають лейкемії, аутоімунні хвороби, а також імунодепресії, а саме у людини, зокрема, СНІД і ARS, (тобто aids relafed Syndrome = синдром, споріднений або близький СНІДу), який є попередньою сходинкою до повної картини хвороби при СНІДі. Витяг ретровірусних інфекцій у людини до сьогоднішнього дня неможливо, так як всі спроби створити вакцину проти вірусу досі закінчувалися невдачею через його дуже високій швидкості мутації. Терапевтично досі застосовуються медикаменти, які пригнічують зворотну транскриптазу, при цьому мова йде здебільшого про заміщених дезоксинуклеозидов гуанозіна, цитидину і тимідину. До цих пір найбільш відомим активною речовиною є А Т, який, правда, лише в стані сповільнювати симптоми ретровірусної інфекції, але не виліковувати хворобу.
Абсолютно несподівано було встановлено, що відомі самі по собі безбактеріальние і безбілкові екстракти з Escherichia Coli, можливо в поєднанні з екстрактами з Ginkgo biluba, в стані помітно уповільнювати розвиток ретровірусних інфекцій, не проявляючи побічних дій, відомих по терапевтичних засобів на основі нуклеозидов. Екстракти з Coli можуть застосовуватися разом з екстрактами з Ginkgo як такі, але також можливо комбінувати екстракти з лікуванням терапевтичними засобами, що містять нуклеозиди, причому можливе зменшення дози нуклеозидов і тим самим очікуваних побічних дій.
Екстракти з листя Ginkgo biloba застосовуються вже тривалий час для терапії периферійних і церебральних артеріальних розладів кровообігу. Спосіб отримання екстрактів із зелених листя відомий, наприклад, з DE-PS 1767098, 2117429, а також EP-A O 324197, EP-A O 330567 і DE-OS 3940091. Ще один спосіб отримання екстрактів з жовтих осіннього листя Ginkgo biloba jgbcfy d EP-A O 352146.
Листя Ginkgo biluba містять ряд різних сполук, серед яких переважають так звані гінкгофлавонглікозіди. Типовим представником цього класу речовин є 5, 7, 3 ', 4'тетрагідроксі-Флавон-3-O- рамнопіранозіл-4-O- -D- (6' '' - транскумароіл) -глюкопіранозід. У менших кількостях містяться терпенлактони, як, наприклад, глінкголіди (Ginkgolide) більш детально описані, наприклад, Okabe at al. J. Chem. Soc. (1967), 2201-2206. Близько родинним з терпенлактонів є також білобалід, застосування якого відомо для лікування нейропатій та подібних захворювань з US-PS 4571407.
Крім того, листя Ginkgo biloba містять ще так звані гінкголевие кислоти, тобто 6-алкілсаліціловие кислоти, які мають алкільні залишки з 13-19 C-атомами і 0-3 подвійними зв'язками. З цих гінкголевих кислот можна отримати биогенетически або переробкою листя відповідним чином заміщений фенол, відомий як аллергизирующее речовина. Способи отримання екстрактів розрізняються в основному спробами по можливості виключити небажані компоненти або супроводжують речовини, особливо, якщо екстракти пізніше повинні застосовуватися в ін'єктується формі. З відомої літератури в розташуванні фахівця є, однак, ряд способів відділення небажаних компонентів.
Наявні сьогодні в продажу екстракти Ginkgo тому, як правило, добре переносяться також і в ін'єктується формі; такі продукти випускаються в продаж, наприклад, фірмою Dk Wilmfr Schwabe Gmbtt Co. D-7500 на Карлсруе під маркою "Tebonin".
Такого роду безклітинні і безбілкові екстракти з культур Escherichia coli можуть вводитися перорально або також у вигляді ін'єкцій. Відповідні препарати випущені вже в продажу, наприклад, фірмою Fa.Laves Arzneimittel Gmbtt, Барбараштрассе, 14, 3003, Ронненберг, під маркою Colibiogen.
Дія екстрактів Coli, зокрема в комбінації з екстрактами з Ginkgo, при ретровірусних інфекціях в даний час не може ще отримати однозначного наукового пояснення. Правда, клінічні досліди чітко показали, що при призначенні таких ліків зберігається і навіть здебільшого однозначно збільшується частка T4 лімфоцитів. Згідно з нещодавно розробленої робочої гіпотези (WO, A 9214478), що спостерігається випадання специфічного імунного захисту імовірно обумовлено тим, що інфекції ретровирусами призводять до зменшення T4 лімфоцитів і пізніше також до зменшення T8 лімфоцитів. Засноване на цьому перевиробництво "невипрямленних" імуноглобулінів B - лімфоцитами має сприяти тоді ослаблення специфічного імунного захисту і її розвалу. З клінічних спостережень є підстави для припущення, що активні речовини в екстракті Coli і Ginkgo зменшують або, відповідно, гальмують збільшене виробництво "невипрямленних" імуноглобулінів.
Виявилося, крім того, що при прийомі екстрактів Coli і Ginkgo може бути зменшена доза ретровірусоспеціфіческіх ліків, завдяки чому істотно зменшується небезпека побічних дій, зокрема вторинних анемій. Зниження дози, здається, лише частково засновано на кращій сприйнятливості до Нуклеозидні терапії.
Лікарські засоби відповідно до винаходу можуть вводитися перорально, переважно, однак, у вигляді ін'єкції. Виявилося, що екстракти Coli і Ginkgo можуть прийматися спільно з нуклеозидним терапевтичними засобами, але що, з іншого боку, має також перевага, якщо екстракт Coli або Ginkgo застосовується завчасно перед прийомом нуклеозидного терапевтичний засіб, причому це тимчасове зміщення може становити від декількох годин до 1 -2 днів. Тому винахід стосується також так званого набору (Kit), що містить окремі активні речовини для перорального або парентерального застосування в просторово розділеної формі.
Дозування становить для однієї дозиметричної одиниці екстракту безбілкових і безклітинних продуктів обміну 4-9 10 12 мікроорганізмів, в той час як у екстракту Ginkgo дозиметричну одиниця містить 50-200 мг сухого екстракту. Щоденна доза повинна встановлюватися для кожного пацієнта індивідуально. І при тривалому лікуванні досі також не було виявлено жодних побічних дій.
Винахід нижче пояснюється докладніше на прикладах.
Приклад 2. Для отримання екстрактів Ginkgo зелені або жовті листя Ginkgo biloba тонкий подрібнюють і відомим способом екстрагують з ацетоном йди етанолом, зокрема сумішшю води з ацетоном або етанолом в співвідношенні 50: 50 в протягом декількох годин при температурах 40 і 60 o C. Після екстракції рідина віджимають з листя, і вона може бути піддана подальшій екстракції. Отриманий білий екстракт екстрагують на першого ступеня очищення не що змішується з водою розчинником, переважно циклогексаном. Водно-кетонну фазу потім переробляють, неполярну фазу викидають. Потім водно-кетонну фазу згущують приблизно до половини її обсягу і випав осад фільтрують. Профільтрований розчин змішують відомим способом з сульфатом амонію і екстрагують бутанолом. Отриманий екстракт після сушки над сульфатом натрію згущують під зменшеним тиском і на закінчення вичерпно екстрагують етанолом. Цей залишок потім згущують під вакуумом для сушки.
Цей екстракт, який потім відомим чином може бути перетворений в готовий продукт, містить в середньому прибл. 25% гінкгофлавонглікозідов і прибл. 5% терпенлактонів (ці величини можуть коливатися прибл. На 10% вгору або вниз в залежності від походження і повернення листя).
1. Застосування лікарського засобу на основі безбактеріальних і безбілкових екстрактів з Escherichia coli для лікування ретровірусних інфекцій.
2. Застосування за п. 1, яке відрізняється тим, що додатково містить екстракти із зелених або жовтих листя Ginkgo biloba.
3. Застосування за п.1 або 2, який відрізняється тим, що дозиметричну одиниця екстракту E.coli містить продукти обміну речовин з приблизно 4 9 10 1 2 мікроорганізмів.
4. Застосування за пп.1 3, що відрізняється тим, що дозиметричну одиниця екстракту Ginkgo biloba містить 50 200 мг екстракту з сухого листя.
5. Застосування за пп.1 4, що відрізняється тим, що в сухому екстракті співвідношення гінкгофлавонглікозідов до терленлактонам становить приблизно 5 1.
6. Застосування по пп.2 5, що відрізняється тим, що лікарський засіб містить екстракти E.coli або відповідно Ginkgo biloba в просторово-розділеної формі.
7. Застосування за пп.1 6, яке відрізняється тим, що лікарський засіб додатково містить хіміотерапевтичне засіб проти ретровірусних інфекцій.
8. Застосування за пп.1 7, що відрізняється тим, що лікарський засіб існує в ін'єктується формі.