транскрипт
2 Л.А. Краєва ватною антибактеріальної терапії, яка неоднозначна для гнійних бактеріальних менінгітів (ГБМ) різної етіології. Від грамотного і своєчасного проведення досліджень з визначення етіологічного агента захворювання і як можна більш раннього початку відповідного етіотропного лікування залежить результат захворювання, показники летальності, число і тяжкість постінфекційних ускладнень. Відомо, що одним з проявів ГФМІ є поширена клінічна форма «менінгококовий менінгіт» без менінгококкцеміі. В цьому випадку точний клінічний діагноз без проведення лабораторних досліджень поставити неможливо. Тому так важлива своєчасна і правильна мікробіологічна діагностика. Як у випадку менінгококової інфекції, так і в разі бактеріальних гнійних менінгітів, лабораторним критерієм є виділення мікроорганізмів з стерильних в нормі місць. Менінгококова інфекція займає важливе місце в інфекційній патології, що обумовлено наступним: тяжкістю перебігу і високою летальністю, що досягає 5 10% при генералізованих формах хвороби; бурхливим розвитком хвороби і необхідністю ранньої діагностики та надання екстреної терапевтичної допомоги; різноманіттям нозологічних форм, з якими необхідно проводити диференційну діагностику; можливістю несприятливих віддалених наслідків. Менінгіт був відомий в глибокій старовині. Вперше клінічна картина менінгіту була описана античними лікарями Аретея і Павлом Егінскім, однак перший опис епідемічного цереброспинального менінгіту як самостійної нозологічної форми дав в 1805 р Вьессе (Viesseux) під час спалаху цієї хвороби в Женеві. Надалі захворювання на менінгіт були зареєстровані в США, Франції, Іспанії, скандинавських країнах. Перші спалахи менінгіту в Росії були відзначені в рр. Менінгокок був відкритий і виділений у чистій культурі Вексельбаума в 1887 р Морфологія менингококка була описана в 1907 р Флекснера. Збудник менінгококової інфекції Neisseria meningitidis, належить до сімейства Neisseriaceae роду Neisseria [10]. Для людини мають клінічне значення наступні види нейссерий: N. meningitidis, N. gonorrhoeae (з підвидом kochii), N. lactamica, N. sicca, N. subflava (біовари subflava, flava, perflava), N. mucosa, N. flavescens, N. cinerea, N. polysaccharea, N. elongate Інфекція та імунітет (підвиди elongata, glycolytica, nitroreducens). Кілька видів нейссерий є частиною нормальної флори респіраторного тракту у собак: N. canis, N. weaver. В респіраторному тракті морських свинок мешкає N. denitrificans. З ротової порожнини резус-макак, корів і плазунів виділяли: N. macacae, N. dentiae, N. iguana [13, 16, 17]. Однак до розвитку менінгококової інфекції причетна саме N. meningitidis. Клінічний спектр менінгококової інфекцій різноманітний: менінгоенцефаліт; менінгіт (с / без менінгококкцеміі); менінгококцемія без менінгіту; бактериемия без септичного ускладнення; менінгококова пневмонія; остеомієліт, артрит, ендофтальміт, спонтанний перитоніт і ін. є результатом гематогенного поширення N. meningitidis; менінгококовий кон'юнктивіт; різні запальні процеси урогенітального тракту, коли особливо важлива диференціація N. meningitidis від N. gonorrhoeae. Морфологічно менінгокок округлий, нерухомий, грамнегативний бобовидний диплококк діаметром 0,6 0,8 мкм (рис. 1б, III обкладинка). Тришарова оболонка клітини представлена цитоплазматичної мембраною, пептидоглікановому шаром і зовнішньою мембраною, яка містить ЛПС і білки (рис. 1в, III обкладинка). Багато менингококки мають полисахаридную капсулу і вирости, відомі як пили [3, 5, 6, 9, 15]. Менінгококи по серологічної активності, яка визначається капсульної полисахаридом, всередині виду діляться на серогрупи. Відомо 13 серогрупи менінгококів: А, В, С, D, H, I, K, L, X, Y, Z, W-135, 29E, але тільки три з них А, В, С відповідальні за більш ніж 90% всіх генералізованих форм менінгококової інфекції. Усередині окремих серогруп також виявляється антигенная неоднорідність по білках зовнішньої мембрани, які визначають сіро і субтип збудника. До теперішнього часу відомо більше 20 серотипів менінгокока, з них типи 2, 4, 10, 15, 16 оцінені як маркери вірулентності, так як менингококки з такими серотіпамі виявлялися переважно в період підйому захворюваності або при спалахах. Менінгококи, крім того, мають загальні, головним чином білкові, антигенні компоненти з багатьма непатогенними Нейссер, постійно виявляються в носоглотці, в тому числі з N. lactamica, яка часто вегетирует в носоглотці дітей раннього віку, особливо грудних немовлят. 52
if ($ this-> show_pages_images $ Page_num doc [ 'images_node_id'])
6 Л.А. Краєва фических антигенів (зустрічний іммуноелектрофорез ВІЕФ) і специфічних антитіл (реакція непрямої гемаглютинації РНГА). Для отримання достовірних результатів про наростання титрів антитіл в РНГА важливо досліджувати парні сироватки, тобто сироватки крові, взяті в перші дні хвороби при надходженні хворого в стаціонар і потім на день захворювання. Кілька крапель крові наносять на предметне скло для приготування препарату «товстої краплі» крові. Посів носоглоткового слизу назофарингеального слиз із задньої стінки глотки беруть натщесерце або через 3 4 години після їди стерильним ватним тампоном. Матеріал беруть з обов'язковим натисканням шпателем на корінь язика для найбільш повного відкриття глоточного отвори. Тампон вводять ватним кінцем догори за м'яке піднебіння в носоглотку і проводять 2 3 рази по задній стінці. Посів виконують негайно після забору матеріалу або після доставки матеріалу в лабораторію на чашки з сироватковим агаром і на чашки з лінкоміцином. Доставка і зберігання матеріалу Матеріал для бактеріологічних і серологічних досліджень доставляють в бактеріологічну лабораторію негайно після відбору в спеціальних контейнерах, здатних підтримувати температуру 37 С. При неможливості швидкої доставки матеріалу з відділення в лабораторію (нічний час, вихідні та святкові дні та ін.) Матеріал зберігають наступним чином: - посіви ліквору на первинній чашці з «шоколадним» агаром і в 0,1% напіврідкому живильному агарі, а так само посів крові на гемокультуру зберігають в умовах термост ата при 37 С; - нативний ліквор і кров для серологічних досліджень зберігають в умовах холодильника при +4 С. У лабораторії нативний ліквор використовують тільки для бактеріоскопії та постановки серологічних реакцій. Для бактеріологічного посіву зберігається Інфекція та імунітет в холодильнику нативний ліквор не використовують. Лабораторне підтвердження ГФМІ і виявлення менінгококів виконують за такими тестами: виявлення в нативному матеріалі диплококков з характерними морфологічними ознаками; характерний зростання тільки на високопоживних середовищах; типова морфологія культурального мазка за Грамом; сахаролитической активність щодо глюкози і мальтози; виявлення группоспецифических властивостей; виявлення специфічних антигенів в лікворі і / або сироватці крові в реакціях латекс-аглютинації і ВІЕФ (експрес-методи); детекція специфічних антитіл в сироватці крові в реакції РНГА. Показання до лабораторної діагностики. Лабораторне обстеження проводять з діагностичною метою, за епідпоказаннями і з профілактичною метою. З діагностичною метою обстежують хворих з клінічно вираженою формою захворювання, стертою формою (наприклад, назофарингіт) і з підозрою на менінгококову інфекцію і менінгіти іншої етіології. За епідпоказаннями обстежують осіб, що були в контакті з хворим на менінгококову інфекцію. З профілактичною метою обстежують певні здорові контингенти з метою спостереження за циркуляцією менингококка серед населення. Основні етіологічні агенти менінгококової інфекції та бактеріальних гнійних менінгітів дуже вимогливі до живильних середовищ, тому для їх виділення необхідні спеціальні живильні середовища, збагачені ростовими добавками (табл. 2). ТАБЛИЦЯ 2. ЖИВИЛЬНІ СЕРЕДОВИЩА ДЛЯ ВИДІЛЕННЯ вимогливість МИКРООРГАНИЗМОВ Поживна середу Назва середовища Виробник Система Signal SIGNAL BLOOD CULTURE SYSTEM Середовище для Haemophilus і селективна добавка Haemophilus test medium base Середовище для Streptococcus і селективна добавка Edwards medium (modified) 56
8 Л.А. Краєва 10. Визначник бактерій Берджи: в 2-х т. Пер. з англ. / Под ред. Дж. Хоулт, Н. Криту і ін. М. Світ, Резник Б.Я. Спалек С.Ф. Менінгіти у дітей. М. Медицина, с. 12. Сорокіна М.М. Іванова В.В. Скрипченко Н.В. Бактеріальні менінгіти у дітей. М. Медицина, с. 13. A Manual Of Bacteriology / Ed. by H.U. Williams. USA: Home Farm Books, p. 14. Daoud Z. Hanna N. Cjcjsaki A. Patterns of susceptibility of Streptococcus pneumonia and Haemophylus influenza at a university hospital // Інфекція та імунітет Abstract of the 15th European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Disease. Geneva, Koneman E.W. Allen S.D. Janda W.M. Schreckenberger P.C. Color atlas and textbook of diagnostic microbiology. 5th. ed. N.Y. Lippincott Raven, р. 16. Manual of Clinical Microbiology: 2 vol. set / Ed. by P.R. Murray, E.J. Baron, J. Jorgensen, M. Pfaller, M.L. Landry. 9th ed. USA, p. 17. Microbiology Laboratory Manual / Ed. by J.P. Harley. 7th ed. USA: McGraw-Hill Higher Education, p. 58
9 а в б Малюнок 1. Макро- і мікрозображення Neisseria meningitidis а) зростання N. meningitidis на «шоколадному» агарі б) мікроскопія ліквору; забарвлення по Граму в) кольорова трансмісійна електронна мікроскопія а б Малюнок 2. Кольорові трансмісійні електронні мікрофотографії H. influenzae і S. pneumoniae а) Haemophilus influenzae б) Streptococcus pneumoniae Малюнок 3. Використання M.I.C.E. смужок для вивчення чутливості виділених мікроорганізмів до антибіотиків