Коронавірусних інфекція телят
Коронавіруси ВРХ вперше виділені в США. У неонатальних телят коронавіруси викликають діарею. Захворювання мало вивчено.
Клінічна картина і патологоанатомічні зміни. У природних умовах хворіють телята у віці 8-9 днів. Хвороба триває 2-3 тижні, тоді як реоінфекція частіше проявляється у віці до 5 днів. У США при спалахах діареї у телят у віці 3 тижнів частіше виділяли рео-, коронавірус, обидва віруси разом.
При зараженні коронавірусами у телят per os розвивається діарея. До появи діареї у зараженого теляти спостерігається депресія і анарексія. Діарея триває 4-5 днів. Без лікування теля через 7 днів зазвичай гине від зневоднення. У телят коронавіруси вражають пряму кишку, викликають ураження ворсинок і збільшення мезентеріальних лімфовузлів (в препаратах з них виявляють специфічний АГ).
Особливість інфекції полягає в тому, що коронавірус розмножується як в кишечнику, так і в респіраторному тракті телят, хоча викликає діарею. Вірус переважно розмножується вдістальной частини тонкого і товстому кишечнику, епітеліальних клітинах слизової оболонки носової порожнини, трахеї і легень. Однак, незважаючи на розмноження в респіраторному шляхи, коронавірус ВРХ сам по собі не може викликати респіраторні захворювання телят.
Морфологія і хімічний склад. Морфологічно вони схожі з вірусом трансмиссивного гастроентериту і в культурі клітин викликають утворення синцития. Основні структурні білки коронавірусів - нуклеокапсідний білок (N), мембранний гликопротеид (М, Е1) і спайковий (отростчатой) гликопротеид (S, E2). Крім них, притаманних усім коронавірусу, у коронавірусів людини і ВРХ виявлений додатковий гликопротеид (gp 65), який не пов'язаний ні з S-, ні з N - поліпептидами. Інфекційність вірусу in vitro нейтралізують тільки монАТ до білків S і N, але не до М.
Антигенна варіабельність і спорідненість. Коронавіруси великої рогатої худоби не мають антигенного спорідненості з ГВЕС, ВІГС, ВІБП. У перехресної РН встановлено, що кишкові і респіраторні ізоляти коронавируса ВРХ належать до одного серотипу незалежно від джерела виділення. Коронавіруси ВРХ мають тісний антигенну зв'язок з кишковими коронавірусами індичок, чотирма головними (S, НЕ, М і N) коронавируса кішок, перехресно реагують з чотирма гомологічними білками кишкового коронавируса ВРХ - білками N-M і білком N ВІБП. В даний час привертає увагу дослідників вивчення антигенних взаємин між коронавірусами людини і тварин. Всі відомі коронавіруси з урахуванням їх антигенної структури об'єднані в чотири групи. Перші дві групи склали антигенно різні коронавіруси ссавців. В одну з груп увійшли коронавіруси людини на чолі з прототипна шт. 229 Е, коронавірус ТГС та коронавірус собак. У другу групу об'єднані коронавіруси людини з прототипна шт. ОС-43, коронавірус ВРХ, коронавірус мишей і щурів. Третю і четверту групи склали коронавіруси птахів, які за морфологічними і антигенними властивостями значно відрізняються від коронавірусів ссавців. Використовували різні антигени бичачого коронавируса, включаючи свежевиделенних природний штам бичачого респіраторного коронавируса 97TXSF-Zn 15-2, природний ентеро-вірусний бичачий коронавірус (БЕКВ) штам Lyl38-3 і адаптований до культури клітин еталонний штам L9-81 БЕКВ, для вивчення вироблення сироваткових антитіл при респіраторних коронавірусних інфекціях великої рогатої худоби в РН і РДА. Зразки сироватки збирали на початку захворювання і протягом 5 тижнів з тижневим інтервалом. Найбільш високі титри антитіл виявлені проти БРКВ штаму 97TXSF-Zn 15-2, ніж проти обох БЕКВ. Різниця між першими і другими було достовірно, між двома кишковими штамами - недостовірно. Найменші титри були виявлені проти штаму L9-81 БЕКВ.
Шт. ОС-43 коронавируса людини виявив антигенну спорідненість з коронавірусів, що викликають діарею новонароджених телят. Наявність загальних антигенних детермінант встановлено в РН, РСК і РГГА і підтверджено виявленням сероконверсии у людей з коронавирусной інфекцією.
Експериментальна інфекція. У телят, які не отримують молозива, або у гнотобіо-тов, діарея розвивається через 18-24 год після зараження. Поразка епітеліальних клітин тонкого кишечника і в подальшому заміна їх незрілими клітинами призводять до порушення всмоктування, діареї і смерті від втрати іонів, бікарбонатів і сироваткових білків від ацидозу і зневоднення. Інтраназальне і інтратрахеально зараження телят супроводжується лише незначними респіраторними порушеннями.
Культивування. Ронавіруси розмножуються (після попередньої адаптації) в культурі клітин нирки ВРХ. Крім того, їх культивують в організмі телят 6-не-ділового віку, які не отримують молозива (телят годують пастеризованим молоком). Система культивування впливає на поліпептидний склад вірусу. Розроблено методи суспензійного культивування коронавірусів, в тому числі коронавируса великої рогатої худоби, в клітинах яєчників китайських хом'ячків.
Клонована область генома бичачого коронавируса (БКВ), яка функціонує як сигнал упаковки. Ця область довжиною 291 н. на 72% гомологична області гена 1М вірусу гепатиту мишей (ВГМ), що містить сигнал упаковки. При прикріпленні клонованої області БКВ до некоронавірусной РНК транскрипти РНК упаковуються в віріони БКВ і ВГМ. Таким чином, геном БКВ містить сигнал упаковки, консервативний на рівні послідовності і функції.
Встановлено АГ властивості з глікопротеїном 140 кБ, що складається з двох молекул 65 кД, з'єднаних дисульфідні містком. Вірус має агглютинируют адсорбирующей активністю щодо еритроцитів хом'яка, миші і щури. ГА невіддільний від вірусної частинки. У градієнті сахарози він має щільність 1,18 г / см3. Білок НЕ (47 кБ) відповідальний за ГА. Коронавіруси ВРХ можуть обумовлювати латентну інфекцію. Клінічно здоровий ВРХ може бути хронічним носієм вірусу, виділяючи його з фекаліями протягом 3 місяців,
У Швеції описані спалахи серед дорослого поголів'я молочних стад: в 9 стадах виявлені AT до коронавірус ВРХ, а в одному - до коронавірус і вірусу діареї ВРХ. AT до коронавірус ВРХ виявлені через рік після перенесеної хвороби, передавалися нащадкам і виявлялися в сироватці телят до 4-6 - місячного віку. Антитіла до KB ВРХ виявлені серед більшої частини шведських стад молочних корів, що відповідає поширеності в країні так званої зимової діареї ВРХ. При інфікуванні коронавірусів ВРХ існує ймовірність збільшення ризику розвитку захворювань респіраторного тракту і ураження легень. Відповідний контроль може знизити можливість захворювань органів дихальної системи.
Імунітет і специфічна профілактика. У тварин-реконвалесцентів встановлено специфічні гамма-глобуліни класів IgM і IgA, які нейтралізували коронавіруси в розведенні 1:32. Це можна розглядати як оціночний тест імунного захисту організму. Найбільш ефективним методом боротьби з вірусною діареєю новонароджених телят є оральна вакцинація живою вакциною, отриманої з аттенуірованних штамів рота-коронавірусів. В експериментальних умовах вона захищає всіх телят, а в польових - знижує кількість хворих. Інак-тівірованние вакцини придатні для вакцинації корів і створення молозивного імунітету. Отримано комбінована вакцина проти рота - і коронавирусной інфекції.
Аттенуація вірусу наступала швидко. Для виготовлення вакцини використовували вірус з активністю 5-6, lg ТЦДед / мл - У інактивованої вакцини використовували культуральний вірус, який інактивувати формаліном. АГ сорбировали на ГОА. Живу вакцину вводили підшкірно стельним коровам (1-5 мл) за 30-90 днів до отелення, інактивовану - застосовували телятам орально (1,0-5 мл). ВУкаіни розроблена і впроваджується в ветеринарну практику інактивована ГОА вакцина проти Коронавірусние ентериту телят, яка призначена для дворазової вакцинації глибокотільних корів. Випробування вакцини показало, що імунна відповідь у корів на введення препарату залежав від вихідного рівня AT Вакцинація тварин з низьким рівнем AT (6 log2 і нижче) в крові індукувати імунну відповідь зі збільшенням титру AT в 4-16 разів. Випоювання телятам молозива вакцинованих корів, що містить AT в титрі 7 log2 і вище, знижувало захворюваність телят в 4-7 разів і запобігало їх загибель.
Розробка нових технологічних схем лікування і засобів специфічної профілактики гастроентеритів інфекційної етіології (колибактериоз, рота - і коро-навірусние діареї) в даний час особливо актуальна. Досвід співробітників Бел-НІЕВ показує, що застосування комплексної схеми вакцинації тільних корів за 1,5-2 місяці до отелення, а також застосування специфічних імуноглобулінів, отриманих з молозива, на 1-, 3- і 5-й дні життя внутрішньом'язово або підшкірно незалежно від клінічного стану, дає виражений ефект. Проведено підбір лабораторних тварин, найбільш придатних для індикації антигенної активності коронавируса, оцінена антигенная активність коронавирусной вакцини, приготовленої з використанням різних інактиваторів і ад'ювант. Визначено дози, кратність, методи і терміни введення препарату.