Єдиного точного методу кількісного визначення сапонінів в сировині немає, зважаючи на їх різноманітного будови.
- 1. Раніше використовували гравіметричний метод, заснований на фізичних властивостях сапонінів: різної розчинності глікозидів і агликонов. Сапоніни з сировини екстрагують метиловим або етиловим спиртом в апараті Сокслета. Екстракт випарюють під вакуумом, сапоніни осаджують органічним розчинником; фільтрують, промивають, висушують до постійної маси і зважують. Результати виходять завищені, так як крім сапонінів осідають супутні речовини. Більш точні результати можуть бути отримані, якщо провести гідроліз суми сапонінів, відокремити аглікони, висушити і зважити.
- 2. В даний час для визначення суми сапонінів і індивідуальних речовин використовують фізико-хімічні методи (спектрофотометрія, колориметрия), засновані на здатності сапонінів при нагріванні давати забарвлені продукти з кислотними реагентами. Наприклад, при визначенні суми сапонінів каштана кінського, синюхи блакитної використовують кобальту хлорид з кислотою сірчаною концентрованою; женьшеню - ванілін з кислотою сірчаною концентрованою, стероїдних сапонінів - п-диметил-амінобензальдегід в 4 моль / л розчині кислоти хлористоводневої. Калібрувальні графіки будують за стандартним зразком (наприклад, есцину) або кобальту хлориду. Ці методи часто використовують у поєднанні з попередніми хроматографическим поділом суми сапонінів.
Для кислих сапонінів (наприклад, аралозіди) використовують потенціометричні титрування після попереднього гідролізу сапонінів.
Іноді для сировини, що містить сапоніни (при наукових дослідженнях) визначають пінне число і гемолітичний індекс.
Пінне число - найменша концентрація вилучення з 1 г сировини, при струшуванні якого протягом 15 сек утворюється стійка протягом 15 хв піна. Заснований на фізичні властивості сапонінів.
Гемолітичний індекс - найменша концентрація вилучення з 1 г сировини або розчину чистого сапонина, яка викликає гемоліз еритроцитів, що містяться в 1 мл 2% розчину дефібринованої крові барана. Витяг сапонінів і розведення проводять фізіологічним розчином.
Готується серія розведень і визначається найменша концентрація. При роботі з кров'ю інших тварин паралельно ставлять контроль зі стандартним сапоніном (0,02% розчин дигітоніну).
Ці методи не дають представленіяо кількісному (%) вмісті сапонінів, а свідчать про поверхневої або гемолітичної активності.