ПРАКТИЧНИХ ЗАНЯТЬ З БІОЛОГІЧНОЇ
За редакцією проф. В.А.Дадалі, доц. М.Н. Смертін
Видання друге, перероблене і доповнене.
Навчально-методичний посібник призначений для студентів лікувального та медико-профілактичного факультетів медичних ВУЗів, які виконують практичні заняття по курсу біологічної хімії. У посібнику сформульована мета і мотивація кожної теми, питання для самопідготовки, основна і додаткова література до кожної теми, етапи проведення заняття і методика проведення практичної роботи. Після кожної теми наведені навчальні тести з відповідями, 25% занять запропоновані у вигляді ситуаційних завдань, для вирішення яких студенти користуються додатковою літературою, пропонованої на занятті.
Методичний посібник підготовлено колективом кафедри біохімії СПбГМА ім. І.І.Мечникова: Астратенковой І.В. Агафоновой О.А. Антонової Ж.В. Бейшібаевой Ч.Р. Голованова н.е. Джангуловой н.е. Зайцевої Н.К. Іванової Л.В. Кулеба В.А. Макарової М.Н. Павлової Р.Н. Смертін М.Н. Соколової О.А. під редакцією проф. В.А. Дада, доц. М.Н. Смертін.
Методичний посібник затверджено Вченою Радою Санкт-Петербурзької державної медичної академії ім. І.І. Мечникова.
1. Тема 27. ² Хімія крові. Обмін хромопротеінов².
Місце проведення - кафедра біохімії.
Тривалість заняття - 180 хв.
2. Мета заняття. Вивчити фізико - хімічні властивості, хімічний склад і біологічні функції крові. Ознайомитися з методом визначення вмісту білірубіну в крові і підкреслити значення цього методу в клінічних дослідженнях.
3.1. Студент повинен знати.
3.1.1. Хімічний склад і фізико-хімічні властивості крові.
3.1.2. Будова гемоглобіну і його похідних.
3.1.3. Синтез і розпад гемоглобіну.
3.1.4. Діагностичне значення визначення білірубіну в сироватці крові.
3.2. Студент повинен вміти:
3.2.1. Користуватися пипетками, мірним посудом, бюретками, працювати на фотоелектроколориметри.
4. Мотивація. знання і навички придбані на занятті необхідні при вивченні різних гігієнічних і клінічних дисциплін в їх майбутній роботі в якості лікарів лікувального профілю.
5. Завдання для самопідготовки:
5.1. Повторити лекційний матеріал по темі: обмін хромопротеїни
5.5. Мусил Я. Новакова О. Кунц К. ²Современная біохімія в схемах². М. ²Мір², 1984р. с. 95-101, 183-191.
5.6. Вивчити матеріали стенду ²Устройство і принцип роботи фотоелектроколоріметра².
5.7. Підготуватися до перевірочного контролю.
6. Питання для самопідготовки:
6.1. Хімічний склад крові.
6.2. Фізико - хімічні властивості крові.
6.3. Класифікація та функції білків крові.
6.4. Характеристика хромопротеїни (будова, властивості, функції).
6.5. Гемсодержащих білки: будова, властивості, функції.
6.6. Гемсодержащих ферменти: будова, властивості, функції. Приклади гемсодержащих ферментів.
6.7. Нормальні і патологічні похідні гемоглобіну, механізм їх утворення.
6.8. Кооперативний ефект на прикладі оксигенації гемоглобіну. Фактори, що впливають на спорідненість гемоглобіну до кисню.
6.9. Метгемоглобін: будова, освіта, властивості, реакції відновлення.
6.10. Метгемоглобінемії: визначення, класифікація, лікування. Які ензімопатії можуть бути причиною метгемоглобінемія?
6.11. Гемоглобинопатии (серповидноклітинна анемія) і таласемії.
6.12. Дихальна функція крові.
6.13.Етапи синтезугема.
6.14. Порфирія, діагностика Порфирій, класифікація.
6.15. Етапи розпаду гемоглобіну.
6.16. Що таке ²прямой² і ²непрямой² білірубін: механізми утворення, властивості.
6.17. Діагностичне значення визначення ²общего білірубіна² і його фракцій в сироватці крові.
6.18. Види жовтяниць і їх диференційна діагностика.
6.19. Принцип методу визначення білірубіну в сироватці крові.
7. Етапи заняття, контроль засвоєння і розподілу навчального часу.
7.1.Постановка завдання. 7.2. Контроль вихідного рівня знань. 7.3.Разбор теоретичного матеріалу. 7.4. Набуття практичних навичок. 7.5. Підведення підсумків заняття.
Викладає викладач. Тестовий контроль. Опитування студентів, дискусія. Виконання лабораторної роботи. Викладає викладач.
Приклад квитка перевірочного контролю:
1) гемсодержащих ферменти: будова, властивості, функції. Приклади гемсодержащих ферментів.
2) Що таке ²прямой² і ²непрямой² білірубін сироватки крові, місце їх освіти і діагностичне значення.
Кількісне визначення в крові метгемоглобіну
Мета роботи: ознайомитися з методом кількісного визначення метгемоглобіну в крові.
Мотивація: метгемоглобін утворюється в результаті реакції окислення заліза в геме гемоглобіну
причому, НАДФН + Н + утворюється в ключових реакціях ПФЦ
причому, НАДН + Н + утворюється в ключових реакціях гліколізу.
Придбані метгемоглобінемії діляться залежно від причини на ендогенні і екзогенні. Ендогенна метгемоглобінемія може виникати при різних патологічних станах або захворюваннях, які супроводжуються недостатністю АОС (наприклад: хронічний ентерит, хронічний гепатит, цукровий діабет та інші).
Екзогенна метгемоглобінемія виникає в разі надмірного надходження в організм людини окислювачів, в тому числі і лікарських препаратів з властивостями окислювачів. Так як MetHb втрачає здатність транспортувати О2. метгемоглобінемія супроводжується ознаками гемической гіпоксії, які обумовлені різними порушеннями в обміні речовин. Для профілактики і лікування ускладнень необхідно контролювати рівень MetHb в крові.
Швидким, нетрудомістким методом визначення% змісту MetHb в крові є фотоколориметричний метод Л.Е.Горна. Цей метод зручний як для профілактичного обстеження людей, що контактують з MetHb образователями, так і в гігієнічних дослідженнях при виробничих і харчових отруєннях деякими хімічними сполуками (нітрити,
оксиди азоту, пари нітробензолу, нітроанілін, гексаціаноферрат калію, хлорат калію і ін.), при проведенні токсикологічних досліджень на тваринах.
Проби залишають стояти протягом однієї години при кімнатній температу-ри, потім розчини фотометрируют, визначаючи їх оптичну щільність. Умови колориметрии: світлофільтр червоний (довжина хвилі 610 нм), кювета - 10 мм, порівняння проти води.
Для розрахунку процентного вмісту метгемоглобіну в досліджуваній пробі використовують формулу:
Х% MetHb = (D MetHb оп - D HbO2) · 100
D MetHb 100% - D HbO2
DHbO2 - оптична щільність розчину, що не містить метгемоглобін (кров, взята до затравки щури);
DMetHb100%. - оптична щільність розчину, що містить метгемо-глобин в максимальній концентрації;
DMetHbоп - оптична щільність розчину, що містить метгемоглобін в невідомої концентрації (кров щури, зацькованою нітритом).