Фізіологічний метод або метод гіпофізарних ін'єкцій - застосовується для більшості весняно-літньо нерестующих риб (осетер, короп, лящ, судак, білий амур і ін.). До застосування методу гіпофізарних ін'єкцій в рибництві незалежно один від одного прийшли два дослідника: Иеринг (Ihering) в Бразилії - 1935 року і Гербільський в СРСР - 1936 г. / Гербільський, 1975 /.
Для стимуляції дозрівання плідників риб використовується той же гонадотропний гормон, який міститься в гіпофізі, і під час нересту в природних умовах надходить з гіпофіза в кров, викликаючи дозрівання статевих клітин. Гонадотропний гормон може накопичується в гіпофізі риб в певні сезони року (перед нерестом). Це дозволяє використовувати гіпофіз риб-донорів як джерело гонадотропного гормону, за допомогою якого можна отримувати зрілі статеві продукти від виробників на рибоводних підприємствах / Іванов, 1988 /.
При внутрішньом'язових ін'єкціях суспензії гіпофіза риб виробникам, гонадотропний гормон надходить у кров і стимулює у них перехід статевих залоз від IV до V стадії зрілості, отримання зрілої, здатної до запліднення ікри у самок і доброякісної сперми у самців. При такій штучної стимуляції дозрівання виробників шляхом введення їм гіпофізів, взятих від інших риб, відбувається збільшення кількості гонадотропного гормону гіпофіза в крові. У природному середовищу те ж саме відбувається під впливом нерестових умов, що підсилюють виділення власного гонадотропного гормону / Іванов, 1988 /. Для того, щоб забезпечити тривалість зберігання гіпофізів, витягнутих у риб-донорів, їх піддають обробці хімічно чистим ацетоном, який зневоднює і знежирює тканину гіпофіза.
У ряді випадків гонадотропний гормон володіє видовою специфічністю, т. Е. Гіпофіз, взятий у риб одного виду, може виявитися неефективним для інших видів риб. Наприклад, гіпофізи судака не підходять для стимуляції дозрівання у коропових риб, тому на рибоводних підприємствах для стимуляції дозрівання виробників використовують, як правило, гіпофізи того ж виду риби. Гіпофізи заготовляють тільки у риб знаходяться на IV стадії зрілості. Найкращий час заготівлі гіпофізів - Преднерестовая міграція. Для того щоб підготувати гіпофізи для зберігання, їх після вилучення піддають ацетонірованію.
При проведенні гіпофізарних ін'єкцій доза препарату, що вводиться, кількість ін'єкцій та тривалість дозрівання виробників багато в чому залежать від температури води і ступеня зрілості виробників.
Слід враховувати, що при гіпофізарних ін'єкціях позитивного результату можна досягти тільки в тому випадку, якщо гонади ін'єктується риби знаходяться в IV завершеною стадії зрілості. Якщо гонади у виробників мають більш низьку стадію зрілості, то гипофизарная ін'єкція не викликає у них дозрівання статевих продуктів, або статеві продукти виявляються непридатними до запліднення. Завершеність IV стадії зрілості гонад у самок може бути оцінена за ступенем поляризації ядра в ооциті, що виявляється за допомогою біопсії. У недостатньо зрілої ікри ядро розташовується в центрі і в міру дозрівання переміщається до анімальний полюсу. Оцінка ступеня зрілості гонад у самок по поляризації ядра найчастіше проводиться для коропа і осетрових риб. При цьому самок осетрових риб можна ін'єктувати тільки при досягненні певної міри поляризації ядра в ооциті.
Дози гонадотропних гормонів для стимуляції дозрівання різних видів риб наведені в таблиці.
Дози гонадотропного гормону гіпофіза, що застосовується для стимуляції дозрівання виробників різних видів риб
ме - мишачі одиниці - для хоріогоніна.
При гормональної стимуляції дозрівання виробників гіпофізарні ін'єкції самкам виробляються, як правило, дрібно: загальна кількість гіпофіза, необхідне для дозрівання ікри, ділиться на кілька порцій - одну або дві попередніх і роздільну ін'єкції. Така схема особливо підходить для стимуляції дозрівання самок коропа, якщо ядро у них знаходиться в центрі ооцита. Попередня ін'єкція становить зазвичай 1/10 частина загальної дози. При низьких температурах води (в межах нерестового діапазону температур) кількість ін'єкцій також може бути збільшено до трьох і більше (застосовується для коропа). Проміжок часу між ін'єкціями може становити від 6 до 12 годин залежно від температури. Наприклад, для стимуляції розвитку ооцитів у коропа, якщо ядра знаходяться в центрі, застосовується триразові гіпофізарним ін'єкції, при яких перша доза становить 0,2 мг / кг, друга - через 6 годин - 0,4 мг / кг, третя - через 12 годин після другої - 2 мг / кг. При відсутності овуляції ікри після третьої ін'єкції стимуляцію продовжують, при цьому доза кожної наступної ін'єкції збільшується на 0,25 - 0,5 мг / кг, четверта і наступні ін'єкції робляться через 24 години.
Самці добре дозрівають після одноразової гіпофізарної ін'єкції, тому, наприклад, самцям коропа вводиться доза гіпофізів в два рази менша, ніж самкам. Самців ін'єктують, як правило, за годину до роздільної ін'єкції самкам.
Загальна кількість гіпофіза, необхідного для стимуляції, розраховується виходячи із загальної маси виробників, з урахуванням температури води (біля верхньої межі нерестового діапазону доза знижується). При приготуванні суспензії гіпофізів для ін'єктування їх зважують, подрібнюють, поміщають в фарфорову ступку і ретельно розтирають товкачем до порошкоподібного стану. Потім, помішуючи, поступово додають необхідну кількість фізіологічного розчину, виходячи з норми 0,5 або 1 мл на одного виробника. Суспензія гіпофізів повільно вводиться в м'язи спини вище бічної лінії в першу третину тіла риби (коропа - під лусочку). Місце проколу при цьому дотримується пальцем, і після видалення голки кілька секунд масажується, щоб введена суспензія не вилилася назад.
Для забезпечення нормального дозрівання ікри після гіпофізарної ін'єкції температуру води в ємностях з виробниками поступово збільшують на 2 - 3 оC. Після проведення ін'єкцій неприпустимо зниження температури.
Посилання на джерела:
Гербільський Н.Л. Метод гіпофізарних ін'єкцій і його роль в рибництві // Гормональна стимуляція статевого циклу риб у зв'язку з завданнями відтворення рибних запасів: Праці ВНИРО. - Т. 111. - Л. Наука, 1975. С. 7 - 22.
Іванов А.П. Рибництво в природних водоймах. - М. Агропромиздат, 1988. - 367 с.