діагностичні сироватки

ð Розрізняють такі види діагностичних сироваток:

1. Антимікробні діагностичні сироватки (агглютинирующие). Містять АТ проти певного збудника. Їх отримують шляхом гипериммунизации дрібних тварин (частіше кроликів) клітинами різних збудників або їх антигенами. Антигени вводять підшкірно і внутрішньовенно. Після певного циклу імунізації у тварин виробляють пробне кровопускання (2-3 мл) і визначають титр антитіл. Якщо титр антитіл достатній, роблять масивне кро-вопусканіе або тотальне знекровлення. Після витримування крові в термостаті і освіти згустку, сироватку відокремлюють, додають 0,01% розчин хінозолу або інших речовин, що консервують, титрують, розливають в ампули і контролюють в контрольній лабораторії.

Розрізняють неадсорбованими і адсорбовані діагностичні сироватки.

а) неадсорбованими антимікробні сироватки (нативні). Застосовуються для постановки розгорнутої реакції аглютинації в пробірках з культурою невідомого мікроба. Мають високим титром (від 1: 2500 до 1: 25000). Недоліком цих сироваток є те, що вони здатні давати групові реакції через наявність групових антитіл.

б) адсорбовані антимікробні сироватки. Відрізняються суворої специфічністю тому з них методом адсорбції з Кастелані видаляють всі антитіла, крім антитіл, зазначених на етикетці. Наприклад, для видалення з антимікробної агглютинируют сироватки групових антитіл до неї додають мікробні суспензії родинних бактерій, на яких ці антитіла адсорбуються; після видалення імунних комплексів в адсорбированной Сивоя-Ротко зберігаються типоспецифічні антитіла. Адсорбовані сироватки застосовуються для постановки реакції аглютинації на склі з культурою невідомого мікроба. Дані сироватки володіють низьким титром (від 1:40 до 1: 320) і не підлягають разведе-нию.

Важливою характеристикою діагностичної сироватки є її титр. Титр антимікробної сироватки - це її максимальне розведення, яке ще агглютинирует гомологічний мікроб.

2. Антитоксичні діагностичні сироватки. Містять антитіла проти певних бактеріальних екзотоксинів. Їх отримують шляхом гипериммунизации кроликів спочатку анатоксином, а потім відповідним екзотоксином. Дозуються в антитоксичних одиницях (АЕ / мл), тобто за здатністю нейтралізувати певний число доз відповідного екзотоксину.

3. Преципітуючих діагностичні сироватки. Містять антитіла-преціпітіни. За допомогою реакції преципітації можна виявити незначні сліди специфічного білка (1: 100 000). Преципітуючих сироватки виготовляють шляхом гипериммунизации тварин мікробними взвесями, фільтратами старих бульйонних культур, аутолізатамі і сольовими екстрактами мікробів, а також повними антигенами бактерій. Імунізація тварин проводиться циклами протягом декількох місяців. У перші два тижні антиген вводять щодня малими, а потім більш масивними дозами 8-16 разів з інтервалами 4-6 днів. Через 8-12 днів після останньої ін'єкції антигена виробляють пробне кровопускання для визначення титру сиворот-ки; якщо титр досить високий, роблять масивне кровопускання. Титр Преципітуючих сироватки - найбільше розведення антигену, що дає преципитацию при контакті з нею. Це пояснюється тим, що антиген, який бере участь в реакції, має ультрамікроскопічних величину і в одиниці об'єму його частинок міститься набагато більше, ніж антитіл в такому ж обсязі сироватки. Преципітуючих сироватки випускаються з титром не нижче 1: 100 000.

4. люминесцирующий сироватки. Отримують шляхом приєднання флюорохромами до глобулиновой фракції імунної сироватки шляхом міцної хімічного зв'язку. При цьому марковані антитіла повністю зберігають здатність специфічно зв'язувати-ся з відповідними антигенами.

Схожі статті