Спосіб застосування та дози:
1. Підготовка препарату. Препарат повинен повністю розчинитися протягом 3-5 хв при внесенні в ампулу 1 мл води очищеної. У розчиненому вигляді препарат являє собою прозору або злегка опалесцирующую рідина безбарвну або світло-жовтого кольору. Розчинений препарат можна зберігати протягом 10 діб при температурі від 2 ° С до 8 ° С.
2. Приготування паперових смужок. Смужки фільтрувального паперу нарізають розміром 1,5x8,0 см, загортають по 2-4 смужки в паперовий пакетик і стерилізують в автоклаві при 120 ° С протягом 30 хв. Зберігають пакетики з паперовими смужками в стерильній чашці Петрі до 3 тижнів. Змочування паперових смужок препаратом проводять у стерильній чашці Петрі. Для цього їх переносять з пакетика обпаленим пінцетом і кожну змочують 0,25 мл антитоксина.
3. Підготовка чашок Петрі. Для постановки реакції иммунопреципитации використовують живильне середовище для визначення токсигенності дифтерійних мікробів суху (ОТДМ). У чашки Петрі розливають по 12 мл живильного середовища з додаванням за обсягом 30% сироватки великої рогатої худоби або 20% нормальної кінської сироватки. Відкриті чашки з застиглим агаром підсушують при температурі 37 ° С протягом 15-20 хв, повернувши догори дном чашку і кришку. На середину чашки поміщають смужку фільтрувального паперу, попередньо змочену препаратом антитоксина, і знову підсушують при температурі 37 ° С протягом 15-20 хв.
4. Посів проби. Досліджувану культуру засівають у вигляді бляшок діаметром 0,7-0,8 см з відстанню 0,7-0,8 см між бляшками і на відстані 0,5 см від краю смужки фільтрувального паперу. При дослідженні на токсигенность посів колонії або суміші з 2-6 колоній виробляють двома бляшками по обидва боки фільтрувального паперу. Контролем служить токсігенний штам 24-48 годинного росту. Контрольний токсігенний штам засівають, чергуючи його з випробуваними культурами. Чашки з посівами інкубують при температурі 37 ° С. Штам для контролю отримують в ГИСК ім. Л.А.Тарасевіча.
Облік результатів реакції.
Результат враховують через 24 години і 48 годин. У живильному середовищі повинна формуватися чітка лінія преципітації навпаки бляшок контрольної токсигенной культури. Випробовувані культури Corynebacterium diphtheriae, що утворюють преципітати, вважаються токсигенними, якщо ці лінії преципітації зливаються з відповідними лініями преципитации контрольного токсигенного штаму або йдуть на змикання з ними.
Знешкодження.
Використані чашки Петрі з дифтерійної культурою знешкоджують автоклавуванням водяним насиченим паром під тиском 1,5 кгс / см2 (0,15 МПа) при температурі 120 ° С протягом 1 години.
Антитоксин діагностичний дифтерійний очищений ферментолиз і специфічної сорбції, сухий являє собою антитіла, виділені методом іммуносорбціі-десорбції на іммобілізованим дифтерійного анатоксину з частково ферментованої кінської гіперімунною протидифтерійної сироватки.
Препарат повинен виявляти дифтерійний токсин у токсигенних штамів Corynebacterium diphtheriae.