Медична ензимологія - розділ клінічної біохімії, який займається вивченням ролі ферментів в захворюваннях, використання ферментів як лікарських препаратів і для діагностики.
Має 5 напрямків:
1. ензімопатологіі. (Вивчення ролі ферментів в розвиток патологічних процесів). Об'єкт - вивчення ензимопатіях.
2. Ензимодіагностика. (Вивчення способів діагностики захворювань шляхом визначення активності ферментів).
3. Ензимотерапія. (Використання ферментів в якості леарственних препаратів).
4. Інженерна ензимологія. (Використання ферментів в якості технічних і фармацевтичних засобів, як реагенти).
5. Лабораторна діагностика. (Виділення ферментів в малих кількостях).
28) Кількісне визначення каталази
Кількісне визначення каталази по Баху і Зубкової.
ПРИНЦИП МЕТОДУ: заснований на титриметричному визначенні кількості перекису водню, розкладеної ферментом за певний проміжок часу, по наступному рівнянню:
2KMnO4 + 5h2o2 + 4h2so4 2khso4 + 2MnSo4 + 8h2o + 5o2
Про кількість розщепленої перекису водню судять за різницею кількості KMnO4. витраченого на титрування до і після дії каталази.
Активність каталази виражають за допомогою каталазного числа і показника каталази. Каталазна числом називають кількість мг перекису водню, яке розкладається в 1 мкл крові
Визначення активності каталази крові має значення для діагностики раку, анемії, туберкульозу. При цих захворюваннях активність каталази в крові знижується.
ПРИМІТКА: Показником каталази служить дріб, в якій чисельником є каталазна число, а знаменником - число мільйонів еритроцитів в 1 мкл досліджуваної крові.
29) Визначення амілази сечі по Вольгемуту
ПРИНЦИП МЕТОДУ: Визначення активності амілази в біологічних рідинах (сеча, ліквор, слина, сироватка крові) засновано на визначенні мінімальної активності (кількості) ферменту, що каталізує в стандартних умовах гідроліз доданого крохмалю. Амілазна активність сечі виражається кількістю мл крохмалю, яке розщеплюється ферментом, що містяться в 1 мл нерозведеної сечі, при температурі 45ºC за 15 хвилин.
Визначення активності амілази сечі і сироватки крові широко використовується в клінічній практиці для діагностики захворювань підшлункової залози. При гострих панкреатитах амілазна активність сечі і сироватки крові збільшується в десятки разів, особливо в першу добу захворювання, а потім поступово повертається до норми. При нирковій недостатності амілаза в сечі відсутній. У дитячому віці збільшення активності амілази спостерігається при ендемічному паротиті, що вказує на одночасне ураження підшлункової залози вірусом паротиту.
30) Історія вчення про біологічному окисленні
У XVII - XVIII ст широке визнання отримала теорія пального початку - флогістону, сформульована Штамом. Ця теорія пояснювала процеси горіння виділеннями їх палаючого тіла особливого невагомого в-ва, і була спростована Ломоносовим і Лавуазьє, які відкрили закон збереження енергії.
В середині XVIII століття було встановлено:
1) процес горіння йде в повітряному середовищі з високою температурою, дихання - в середовищі зі зниженою температурою;
2) при диханні, як і при горінні виділяється тепло, але в незначних кількостях;
3) кінцеві продукти CO2 і H2 O.
У 1751 році Ломоносов детально розглянув процеси горіння і окислення.
У 1774 році Лавуазьє повторив досліди Ломоосова і показав, що процеси горіння і дихання ідентичні, т. К. Утворюються ідентичні товари.
Лавуазьє назвав дихання повільним горінням і показав процес згоряння Гл в організмі:
На початку XIX століття стали відомими каталізатори, за допомогою яких здійснювалися процеси окислення. Це були метали, що володіють «внутрішньою силою».
В середині XIX століття німецький вчений Шейнбайн, який відкрив озон, припустив, що в організмі утворюється озон і він використовується в реакціях окислення.
Після робіт Лавуазьє в науці панувала думка про тотожність горіння і повільного окислення поживних вкществ в організмі. Разом з тим було ясно, що БО протікає в незвичайних умовах:
- при зниженій температурі;
- і в присутності великої кількості H2 O (75% - 80% тканини).
У XIX столітті з'явилося поняття про ферментах і причину своєрідного перебігу БО спробували пояснити «активацією» кисню в клітинах організму.
Одна з теорій було висунуто Бахом, який вважав, що «активація» молекулярного кисню відбувається в результаті розриву зв'язку та приєднання до ферментам оксигенази (А), здатним до аутооксідаціі:
3 положення Баха:
1. Наявність високоактивної оксидази, але це не було виявлено.
2.В тканинах повинна бути висока концентрація H2 O2. але це теж не було виявлено.
3. Висока активність ферментів, що розкладають H2 O2; це було виявлено, існує 2 ферменту: