Вплив імуномодуляторів на цитокіни. Продукція цитокінів спленоцитах після стимуляції
Найважливішу роль в міжклітинних взаємодіях на рівні вродженого імунітету, регуляції імунної диференціювання Т-лімфоцитів і визначенні напрямку розвитку імунних процесів грають цитокіни.
Дослідження динаміки продукції цитокінів в процесі вакцинації дозволяє на клітинно-молекулярному рівні визначити механізм дії препарату і можливість його раціонального застосування.
При коінкубаціі спленоцитів тварин з Іммуновак-ВП-4 або ФГА виявлено зниження рівня продукції IFN-y, IL-10, підвищення IL-1 (3, IL-12 і збереження високих концентрацій IL-12 протягом більш тривалого часу, в порівнянні з спонтанної продукцією цих цитокінів спленоцитах вакцинованих мишей.
Ці експерименти показали. що введення ВП-4 викликає значне збільшення спектру цитокінів, яке визначається як в сироватці крові, так і в культурах спленоцитів вакцинованих мишей, що сприяє розвитку імунної відповіді і диференціювання Т-лімфоцитів по Th1-типу. Про це ж свідчить і те, що протягом усього часу спостереження не виявлено збільшення вмісту IL-4, що є медіатором диференціювання Т-лімфоцитів по Тh2 типу.
Продукція цитокінів спленоцитах після стимуляції
Вивчення спектра і рівня цитокінів було проведено також у сироватці крові мишей, вакцинованих різними дозами АСО.
Введення мишам 15; 1,5; 0,15 одиниць зв'язування (ЄС) анатоксину приводило до збільшення в сироватках мишей вмісту цитокінів IL-1B і IL-12 в порівнянні з їх рівнем до імунізації. Однак концентрації цих цитокінів були не такі високі (<70 пкг/мл), как при введении ВП-4.
Рівень цитокінів в сироватці не мав істотних відмінностей при імунізації мишей зазначеними дозами АСО.
Далі була вивчена продукція цитокінів клітинами селезінки у мишей лінії СВА в культурі спленоцитах (2 х106 кл / мл) інкубували в культуральному середовищі протягом 48 годин при додаванні АСО (0,15 ЄС / мл) або ФГА (10 мкг / мл), а також без добавок (спонтанна індукція).
IL-2 при стимуляції спленоцитів ФГА підвищувався при імунізації мишей АСО дозами 15-0,15 ЄС / миша в 1,3-1,8 рази. Рівень IL-4 збільшувався практично при всіх використовуваних дозах анатоксину в культурі спленоцитів, стимульованих ФГА.
При внесенні в культуру спленоцитів мишей, імунізованих АСО, замість ФГА ex vivo АСО виявлено переважне підвищення рівня IL-10, зниження рівня IL-4, INF-y і відсутність динаміки IL-12.
Отримані результати дозволяють припустити, що анатоксин ініціює Th1- і ТЬ2-шляху імунної відповіді, оскільки продуцентами IL-4 є ТП2-лімфоцити, а IL-12 поляризує імунну відповідь по ТР1 шляху.
Спленоцитах імунізованих Іммуновак-ВП-4 і АСО мишей мають здатність до спонтанного синтезу широкого спектру цитокінів і подальша стимуляція спленоцитів ФГА або однойменними імуномодуляторами призводить до зниження IFN-y і IL-10 при дії Іммуновак-ВП-4, IFN-y і IL- 4 при дії АСО.