Визначення гонадотропних гормонів в сечі дозволяє вивчити гонадотропну функцію гіпофіза. Метод визначення гонадотропних гормонів в сечі Г. С. Степанова заснований на адсорбції їх на молекулярному адсорбенті - каоліні з сечі в кислому середовищі, елюції з каоліну лугом і осадженні п'ятикратним об'ємом холодного ацетону.
Як детоксіческой процедури запропоновано триразове промивання осаду чистим ацетоном з подальшим триразовим промиванням ефіром для наркозу. Добову сечу збирають без консерванту, зберігають в холодильнику. Тривале зберігання небажано. З добової кількості сечі 1 л доводять концентрованою оцтовою кислотою до рН 4 (якщо добовий діурез був менше 1 л, доливають дистильованою водою до 1 л). До підкисленою сечі додають 50 мл 20% -ного розчину водної суспензії каоліну і суміш струшують протягом години на струшувати апараті. Каолін з адсорбованим на ньому гонадотропним гормоном збирають в центрифужную пробірку місткістю 500 мл центрифугуванням протягом 10 хвилин при 2500-3000 оборотів в хвилину. Надосадову рідину, що містить водорозчинні токсичні речовини і неорганічні солі, відкидають.
У центрифужную пробірку до каолінового осадку доливають 70 мл 0,1 н. розчину їдкого натру, осад ретельно розтирають до отримання гомогенної суспензії. Перевіряють рН, і, якщо необхідно, його доводять оцтовою кислотою до 10 л. Суспензію центрифугують протягом 15 хвилин при 2500-3000 оборотів в хвилину. Після центрифугування надосадову рідину (лужний екстракт) зливають в циліндр з пробкою ємністю 500 мл, що містить 350 мл охолодженого ацетону. Циліндр ставлять в рефрижератор на 18- 20 годин для повного осадження гонадотропінів, які випадають у вигляді світло-коричневих пластівців. Через 18-20 годин прозорий надосадовий шар ацетону зливають. Залишок ацетону з осадом переносять в центрифужную пробірку місткістю 25-50 мл і центрифугують протягом 10 хвилин при 3000 оборотів в хвилину.
Як детоксіческой процедури застосовують триразове промивання каолін-ацетонового осаду 20-25 мл чистого ацетону і тричі 20 мл ефіру для наркозу. Після промивання ефіром осад висушують на водяній бані при 30-40 ° для видалення слідів ефіру. Такий висушений екстракт може зберігатися в холодильнику 12 місяців і більше (зберігатися в тих же пробірках, в яких проводилося промивання). Висушений осад являє собою світло-коричневий порошок вагою в 450-950 мг.
Гонадотропний екстракт вводиться під шкіру один раз в день протягом трьох днів статевонезрілі самкам білих мишей у віці 20-22 днів, вагою в 7-9 г. Через 72 години після першої ін'єкції тварин обезглавлюють. Видаляють матку і яєчники, звільняють від рідини розтином, висушують фільтрувальним папером і швидко зважують на торзіонних вагах. Для контролю застосовують вага матки інтактних тварин (5,6-7,8 мг). Кожен «основний» екстракт визначають в 2-4 розведеннях.
Вага матки під впливом гонадотропного гормону збільшується в 7-9 разів. Результати досліджень визначаються в мишачо-маткових одиницях (ММЕ). 1 ММЕ дорівнює такій кількості гонадотропного гормону, яке здатне збільшити вагу матки статевонезрілої самки білих мишей па 100% проти контролю.
У жінок з нормальним менструального-оваріальним циклом добове виділення гонадотропних гормонів коливається від 7 до 174 ММЕ, при менопаузі - 274 ± 11,5 ММЕ.