проведення процедури
Як проходить процедура забору крові:
1. При проведенні проби у дорослого пацієнта після венепункції набирають кров в пробірки з ЕДТА.
2. У новонароджених беруть кров з пуповини в пробірку з ЕДТА.
3. Місце венепункції придавлюють ватним кулькою до зупинки кровотечі.
4. При утворенні гематоми в місці венепункції призначають зігріваючі компреси.
5. Після взяття крові пацієнт може відновити прийом скасованих препаратів.
6. Слід попередити батьків новонародженого, що для контролю за динамікою анемії, можливо, буде потрібно повторне дослідження.
Метод проведення прямої проби Кумбса:
Вона проводиться в такий спосіб:
- Для отримання антитіл до людських імуноглобулінів (антіглобуліновой сироватки) або комплементу (антікомплементарной сироватки) тварина імунізують людської сироваткою, імуноглобулінами або комплементом людини. Отриману від тваринного сироватку очищають від антитіл до інших білків.
- Еритроцити хворого відмивають фізіологічним розчином для повного видалення сироватки, яка нейтралізує антитіла до імуноглобулінів і комплементу і може стати причиною помилково негативні результати.
- Якщо на поверхні еритроцитів фіксовані антитіла або компоненти комплементу, додавання антіглобуліновой або антікомплементарной сироватки викликає аглютинацію еритроцитів.
Переваги і недоліки
Які переваги та недоліки прямої проби Кумбса:
Переваги дослідження: висока чутливість, значно перевершує роздільну здатність альтернативних методів дослідження, які використовуються для виявлення неагглютінірующіх антитіл.
- Пряма проба Кумбса - трудомісткий метод дослідження, що вимагає особливої ретельності у виконанні. При її використанні зустрічаються деякі труднощі, пов'язані, зокрема, з інтерпретацією слабопозитивного реакцій. Відомо, що помилкові слабоположітельние або негативні реакції при виконанні проб Кумбса можуть бути наслідком недостатньо ефективної відмивання еритроцитів, нейтралізації антіглобуліновой реагенту слідами сироватки, а також контакту з незнежиреного поверхнею, на якій може фіксуватися антіглобулін, втрачаючи при цьому свою активність.
- Ще один недолік проби Кумбса - нестійкість антіглобуліновой реагенту, отримання і зберігання якого мають певні особливості, що також робить скрутної кількісну оцінку реакції гемаглютинації з антіглобуліновой сироваткою.
Фактори, що впливають на результат дослідження
Які чинники можуть вплинути на результат дослідження:
1. Гемоліз, обумовлений необережним поводженням з пробою крові.
2. Ацетамінофен, p-саліцилова кислота, амінопірину, антигістамінні препарати, карбромал, цефалоспорини, хлоровані вуглеводні інсектициди, хлорпромазин, хлорпропрамід, цисплатин, клонідин, діпірон, етосуксимід, фенфлюрамин, фуадін, гідралазин, гідрохлортіазид, ібупрофен, інсулін, ізоніазид, леводофу, мефенамінова кислота, мелфалан, метадон, метилдофа, метілсергід, номіфензін, пеніциламін, пеніциліни, фенацетин, фенілбутазон, пробенецид, прокаїнамід, хінідин, хінін, ріфампін, стрептоміцин, сульфонаміди, похідні сульфонілсечовин , Тетрациклін, триамтерен, трімеллітіновий ангідрид.
Нормальні і патологічні показники
Які нормальні показники прямої проби Кумбса:
У нормі пряма проба Кумбса негативна, що свідчить про відсутність на поверхні еритроцитів антитіл і комплементу.
Які патологічні показники прямої проби Кумбса:
Для визначення антигенної специфічності антитіла слід приготувати елюат. Зазвичай антитіло має широку специфічність, що не асоційовану з добре встановленим антигеном.
* Аутоіммунна гемолітична анемія:
- Теплореактівние (37 С) аутоантитіла, первинні (ідіопатичні) або вторинні, пов'язані з хворобою (наприклад, при лімфомі або ВКВ).
1. Холодова гемаагглютініновая хвороба, ідіопатична або пов'язана з хворобою (наприклад, при лімфомі, пневмонії (анти - I), мононуклеозе. (Анти - i)).
2. Пароксизмальна холодова гемоглобінурія, ідіопатична або пов'язана з хворобою (наприклад, при вірусних інфекціях або сифілісі (анти - P)).
* Лікарська аутоімунна гемолітична анемія:
- Ліки, адсорбовані на еритроцитах (наприклад, пеніцилін).
- Утворюють імунні комплекси (наприклад, хінідин).
- Неіммунологіческімі адсорбція білків (наприклад, цефалоспорини).
- Невідомі механізми (наприклад, альдомет, тобто альфа-метилдофа).
* Аллоіммунние гемолітична анемія:
- Пасивно придбані антитіла з введених продуктів плазми (наприклад, після внутрішньовенного введення імуноглобулінів).
- Реакція на переливання несумісної крові та.
* Гемолітична хвороба новонароджених (антитіла (IgG) матері, які проникли через бар'єр плаценти). Системний червоний вовчак (ВКВ)
Захворювання, які виявляються за допомогою прямої проби Кумбса
Які захворювання можуть бути виявлені за допомогою прямої проби Кумбса:
1) Аутоімунний гемоліз.
2) Гемолітична хвороба новонароджених.
3) Лікарська імунна гемолітична анемія.
4) Гемолитические трансфузійні реакції.