МОЖЛИВІ ПОМИЛКИ
Визначення групової приналежності за допомогою реакції аглютинації може супроводжуватися помилками, які ведуть до невірного трактування результатів. Всі помилки можна розділити на три групи:
- низька якість реагентів,
- технічні помилки,
- особливості досліджуваної крові.
- НИЗЬКА ЯКІСТЬ РЕАГЕНТІВ
Стандартні ізогемагглютінірующіх сироватки і стандартні еритроцити можуть мати низькі агглютінабельние властивості, що призводить до невірного тлумачення результатів реакції. Щоб уникнути подібних помилок слід стежити за терміном придатності реагенту, умови зберігання, а також їх зовнішнім виглядом (прозорість сироватки, відсутність про ствие плівок, пластівців, запаху гниття і ін.).
- ТЕХНІЧНІ ПОМИЛКИ
Помилки технічного характеру пов'язані з недотриманням або недостатньо точним виконанням всіх правил проведення реакції.
а) Недотримання зовнішніх умов (погана освітленість, зміна температури навколишнього середовища)
Погана освітленість заважає виявити аглютинацію або її відсутність.
Підвищення температури понад 25 ° С різко уповільнює агглютинацию.
При низькій температурі (менше 15 ° С) може відбутися неспецифічна аглютинація незалежно від складу аглютиніни і агглюті- ногенов, так звана холодова панагглютінація (аглютинація відзначається при реакціях з сироватками всіх груп крові). Це явище відбувається за рахунок наявності в сироватці особливого холодового агглютинина, який може давати реакцію аглютинації тільки при низьких температурах.
б) Неправильне проведення самої реакції
Порушення розташування сироваток, співвідношення сироватки і крові, злиття сусідніх крапель і ін. Створюють можливість неправильної інтерпретації отриманих результатів.
Рання оцінка результатів також може привести до помилки, особливо при наявності підтипу антигену А (слабкого антигену А2), що дає пізню аглютинацію.
в) Недобавленіе фізіологічного розчину
Недотримання цього простого правила (в краплі, де сталася аглютинація, слід додати ізотонічний розчин хлориду натрію) може привести до того, що за специфічну аглютинацію буде прийнята помилкова (псевдоаглютинації).
Під терміном псевдоагглютііація увазі здатність еритроцитів склеюватися в монетні стовпчики або купки зі збереженням мембран, незалежно від їх агглютінабельних властивостей. Межі між форменими елементами добре видно під мікроскопом, на відміну від справжньої аглютинації, при якій відбувається руйнування мембран еритроцитів. Додавання 1-2 крапель ізотонічного розчину хлориду натрію дозволяє диференціювати істинну аглютинацію від помилкової. Псевдоаглютинації розходиться досить швидко, в той час як справжня аглютинація зберігається колишньої або стає більш вираженою.
г) Особливості досліджуваної крові
Розвиток неспецифічної панагглютінаціі може бути пов'язано не тільки з низькою температурою, але і з якостями самої крові.
Панагглютінацію при бактеріальному зараженні досліджуваної крові в 1927 р описав Томсен. Цей феномен (феномен Томсен) характеризується агглютинацией крові з сироватками всіх груп і сироваткою власної крові.
Подібне явище неспецифічної аглютинації може спостерігатися і у свіжій крові, але воно зустрічається досить рідко і носить назву панагглютінаціі або аутоагглютінаціі.
Сутність явища полягає в тому, що сироватка при кімнатній температурі дає аглютинацію з усіма еритроцитами, навіть зі
своїми власними (аутоагглютінація), а еритроцити в той же час дають аглютинацію з усіма сироватками, навіть з сироваткою групи AB (IV).
Подібне явище описано при ряді захворювань: хвороби крові, спленомегалії, цирозі печінки, інфекційних захворюваннях і т. Д. Описана панагглютінація і у здорових людей, але вкрай рідко (0,07%). Явища панагглютінаціі і аутоагглютінаціі спостерігаються тільки при кімнатній температурі; при температурі, близької до температури людського тіла, вони зазвичай не виявляються.
Щоб уникнути помилок необхідно не допускати визначення групи крові при температурі нижче 15 ° С. Якщо при визначенні групової приналежності аглютинація спостерігається з сироватками груп 0 (1), А (П) і В (Ш), завжди слід проводити реакцію з сироваткою групи AB (IV). І тільки тоді, коли в цій краплі не буде аглютинації, можна виключити панагглютінацію і віднести кров до групи AB0 (IV). При наявності аглютинації з сироваткою AB (IV) необхідно підігріти кров до 37 ° С і вести реакцію при цій температурі.
Панагглютінація і аутоагглютінація зникають, якщо визначення групової приналежності проводити при 37 ° С.
При деяких захворюваннях відзначається зниження агглютінабель- ності агглютиногенов еритроцитів (хронічні інфекційні захворювання, онкологічні захворювання, хвороби крові та ін.). При цьому так само, як і при наявності слабкого антигену А2, слід чітко дотримуватися умов і час реакції.
У всіх випадках нечіткого або сумнівного результату необхідно повторне визначення груп крові за допомогою стандартних сироваток інших серій, а також перехресним способом!