Мікроскопічне дослідження нативного і пофарбованого препаратів мокротиння повинен проводити лікар. Клітинні та неклітинні елементи в мокроті завжди розподіляються нерівномірно, тому необхідно досліджувати кілька нативних препаратів або два, складених з усіх частин мокротиння. Якщо приготування комплексних нативних препаратів викликає труднощі, слід приготувати нативні препарати з кожної складової частини мокротиння, а з нативного препарату, в якому виявлені клітинні елементи, що викликали інтерес мікроскопісти, приготувати препарат для фарбування АЗУР-еозином і за Цілем-Нільсеном.
Клітинних ЕЛЕМЕНТИ мокротиння Нейтрофіли
У препаратах харкотиння лейкоцити можуть бути добре збереженими і на різних стадіях дегенерації, тому типи лейкоцитів, їх морфологія визначаються в препаратах, забарвлених АЗУР-еозином. Нейтрофіли завжди містяться в мокротинні в більшій або меншій кількості. Чим більше гною в мокроті, тим більше нейтрофілів. Нейтрофіли можуть поєднуватися з іншими типами лейкоцитів. При запальних неспецифічних процесах нейтрофіли в густому по консистенції гною, виглядають як безбарвні, дрібнозернисті, чітко контуровані об'ємні клітини з деяким блиском.
У рідкої серозної мокроті нейтрофіли - великі клітини (в 2,5 рази більше еритроцита) має чітко окреслені фрагментованими ядрами.
еозинофіли
Еозинофіли - клітини розміром 10-12 мкм. Ядро зазвичай складається з двох сегментів. При великому збільшенні в їх цитоплазмі видно жовтувата рівномірна сферична зернистість. Розпізнаються еозинофіли по здатності цієї специфічної зернистості заломлювати проходить світло. У препаратах, забарвлених АЗУР-еозином, у еозинофілів на тлі блакитний цитоплазми чітко візуалізується ядро з тяжистость хроматиновой структурою, що складається зазвичай з 2, рідше 3-4 сегментів, оточене рівномірної сферичної зернистістю.
Основні характеристики еозинофілів при захворюваннях бронхолегеневої системи:
• в цитоплазмі еозинофілів містяться гранули з великою кількістю лужної білка і перекисів, що володіють бактерицидною активністю;
• в гранулах еозинофілів визначаються кисла фосфатаза, акрілсульфатаза, коллагеназа, еластаза, глюкуронідаза, катепсінміелопероксідаза і інші ферменти, що володіють літичної активністю;
• еозинофіли мають слабку фагоцітарой активністю і обумовлюють позаклітинний цитоліз, беручи участь в Протигельмітний імунітет, а також беручи активну участь в алергічних реакціях;
• появи еозинофілів в мокроті сприяють захворювання алергічного характеру:
- бронхіальна астма;
- екзогенний алергічний альвеоліт;
- еозинофільна пневмонія Лефлера;
- гранулематоз з клітин Лангерганса;
- лікарський токсикоз;
- ураження легень найпростішими;
- гельмінтози легких;
- еозинофільний інфільтрат.
Еозинофіли виявляють в мокроті при злоякісних новоутвореннях легенів.
гладкі клітини
Поодинокі тканинні базофіли можна виявити в гнійної мокроті серед нейтрофілів, лімфоцитів і еозинофілів.
Тканинні базофіли володіють гомеостатической функцією, впливають на проникність і тонус судинної стінки, підтримують баланс рідин в тканинах. Захисна функція цих клітин полягає у виділенні медіаторів запалення і хемотаксичних факторів. Базофіли беруть участь в алергічних реакціях.
Тканинні базофіли - клітини розміром 10-15 мкм. Ядро займає більшу частину клітини і практично невиразно під полиморфной плоскою зернистістю чорного, темно-коричневого або фіолетового кольору. Зернистість розташована в цитоплазмі і на ядрі. Гранули огрядних клітин містять гістамін, хондроїтин-сульфати А і С, гепарин, серотонін, різні протеолітичні ферменти (трипсин, хемотрипсин, пероксидазу, РНКаз). На клітинній мембрані огрядних клітин відзначається висока щільність рецепторів IgE, що забезпечують не тільки зв'язування IgE, але і вивільнення гранул, вміст яких бере участь у розвитку алергічних реакцій. Тканинні базофіли мають здатність до фагоцитозу. Кількість тканинних базофілів різко збільшується в мокроті і бронхолегоч-ном лаваже у хворих з екзогенних алергічних альвеолитом.
моноцити
Діаметр моноціта становить 14-20 мкм, ядро бобовидной, підковоподібної форми або багатолопатеве.
Іноді в поглибленні «підкови» візуалізується виступає округлий фрагмент ядра. Хроматин ядра ніжною пухкої структури, ядерець немає. Цитоплазма щодо широка, сіро-блакитна, може містити дрібну азурофільную зернистість і вакуолі навколо ядра. Моноціт, потрапивши в тканину легенів, в залежності від мікрооточення трансформується в макрофаг з переважанням тієї або іншої функціональної активності. Залежно від виконуваної функції утворилася клітина має відмінні морфологічні особливості. В процесі диференціювання моноціта в макрофаг зникає азурофільной зернистість, яка містить пероксидазу, а активність кислої фосфатази зростає.
лімфоцити
Лімфоцити - основні ефекторні клітини імунної системи, беруть участь у всіх імунологічних реакціях, високочутливі до дії різних фізичних, хімічних чинників. Велика кількість лімфоцитів з'являється при активації імунологічної реактивності організму. Поява плазматичних клітин характерно для процесу утворення антитіл. Лімфоцити у великій кількості виявляють в мокроті при туберкульозі, саркоїдозі, екзогенному алергічному альвеоліті, парагонімоз, аскаридозі, амебної пневмонії.
еритроцити
Еритроцити мають вигляд жовтуватих дисків діаметром 7-8 мкм. Поодинокі еритроцити можуть зустрічатися в будь-який мокроті. У великій кількості еритроцити виявляють в мокроті, забарвленої кров'ю. Таке мокротиння характерна для інфаркту легкого, застою в малому колі кровообігу, туберкульозу, парагонімоза, злоякісних новоутворень легень.
Циліндричний Війчастий епітелій
Циліндричний Війчастий епітелій вистилає слизову оболонку носових шляхів, гортані, трахеї, бронхів і бронхіол. Залежно від того, з якої ділянки бронхіального дерева слущиваются клітини циліндричного епітелію, змінюється їх розмір. Клітини циліндричного миготливого епітелію виявляють в препаратах харкотиння, приготованих з белесоватих тяжів, ниток і плівок, що лежать на тлі слизу і представляють собою відірвані при кашльових поштовхах ділянки запаленої гіпертрофованої слизової оболонки дихальних шляхів. Клітини мають подовжену форму, розширену в апікальній частині, спрямованої в просвіт бронха, і звужену в підставі клітини. На розширеному кінці розташована щільна оболонка ( «кутикула», або термінальна смужка), до якої прикріплюються вії. Вії зберігаються на термінальній смужці при гострому запаленні в свежевиделенних мокроті. Ядра розташовані в дистальної частини прозорою цитоплазми. Клітини циліндричного миготливого епітелію розташовані в мокроті нерівномірно, групами, у вигляді скупчень різних розмірів. Іноді пласти циліндричного епітелію утворюють при русі по бронхах щільні клітинні комплекси округлої або овальної форми з чіткими контурами, по краях яких видно вії, досить довго зберігають активну рухливість. Ці комплекси отримали назву тілець креола. Спостерігається рух війок на тканинних клаптиках епітеліальної тканини більше 8 год від моменту доставки мокротиння в лабораторію. Ці освіти помилково можна прийняти за комплекси злоякісних клітин або за вегетативні форми найпростіших.
альвеолярнихмакрофагів
Альвеолярнімакрофаги утворюються з єдиної полипотентной клітини кісткового мозку, проходять стадію моноціта, в легких перетворюються в альвеолярнімакрофаги. Вони виконують фагоцитарну, секреторну і антігенпредставляющіе функції. Залежно від функції альвеолярнімакрофаги мають відмінні морфологічні ознаки, які виявляють в нативних і забарвлених АЗУР-еозином препаратах. У слизу вони представлені окремо лежать клітинами, невеликими групами або великими скупченнями. Альвеолярнімакрофаги в препаратах, забарвлених АЗУР-еозином, характеризуються поліморфізмом величини і форми клітин, а також форми ядер і їх кількості. Діаметр клітин коливається від 18 до 40 мкм, кількість ядер - від одного до 3-4 і більше. Форма ядер різноманітна: округла, овальна, з виїмкою. Ядерно-цитоплазматическое співвідношення різко зміщена в бік цитоплазми, дотримується в клітинах завжди. Форма альвеолярнихмакрофагів залежить від в'язкості слизу, в якій вони рас¬положени. У рідкої, серозної мокроті вони мають круглу форму.
«Клітини курця» або «пилові клітини» (кониофаги)
Кониофаги фагоцитируют пил, сажу, нікотин, фарбу. Ці включення видно в цитоплазмі клітин в нативному препараті у вигляді жовтувато-коричневих, коричневих, чорних і кольорових гранул різних розмірів. Іноді вони заповнюють практично всю цитоплазму клітини. Альвеолярнімакрофаги в мокроті шахтарів чорного кольору, заповнені мікрочастинками чорного вугілля, у борошномелів - білого кольору, у людей, що працюють в фарбувальній виробництві, колір альвеолярнихмакрофагів залежить від кольору барвника.
ліпофагі
Ліпофагі - альвеолярнімакрофаги з краплями жиру або ксантомні клітини з вогнища жирової дегенерації легеневої тканини. Цитоплазма ліпофагі заповнена краплями жиру, тому їх позначають як жирові або зернисті кулі. Ці клітини характерні для хронічного запального процесу або злоякісних новоутворень легень.
Альвеолярнімакрофаги з гемосидерином, сидерофаги, або клітини «серцевих вад»
Сидерофаги містять в цитоплазмі кристали гемосидерина золотисто-жовтого або коричневого кольору. Гемосидерин утворюється з гемоглобіну внутрішньоклітинно в цитоплазмі альвеолярнихмакрофагів в результаті розпаду еритроцитів при застої в малому колі кровообігу, інфаркті легкого, легеневій кровотечі, идиопатическом гемосидерозе легких. У препаратах харкотиння, забарвлених АЗУР-еозином, аморфні кристали гемосидерина в альвеолярних макрофагах фарбуються в чорний або чорно-синій колір.
Ідіопатичний гемосидероз легень, або «залізне легке», описали W. Ceelen і N. Gellerstadt, тому він отримав назву синдрому Селена-Геллерстедта. Зустрічається в юнацькому і дитячому віці. Хвороба протікає хвилеподібно, з двосторонніми ДРІБНОВОГНИЩЕВИМ змінами в легенях, кровохарканням і спленомегалією. При дослідженні мокротиння виявляють велику кількість аль-веолярних макрофагів з жовто-коричневими включеннями. Для підтвердження природи патологічного процесу і наявності в мокротинні альвеолярнихмакрофагів з гемосидерином необхідно провести реакцію Перлса (реакцію освіти берлінської блакиті).
альвеолярного епітелію
Альвеолярний епітелій представлений пневмоцитами II типу, його виявляють у препаратах з бронхоальвеолярного лаважу хворих з ідіопатичним легеневим фіброзом (синдромом Хаммена-Річа, прогресуючим інтерстиціальним фіброзом легенів, склерозуючим альвеолитом). Захворювання характеризується дифузним, гострим осередковим або хронічним негнійний запаленням легень з виходом в фіброз інтерстиціальної тканини легенів. Десквамативна пневмонія, або хвороба Лібова, - одна з форм даного захворювання, характеризується рясним слущиванием альвеолярного епітелію. При цій формі в бронхоальвеолярному лаваже загальна кількість клітин збільшується до 1х106 / мл за рахунок лімфоцитів, великої кількості альвеолярного епітелію, нейтрофілів, еозинофілів і лімфоцитів. У мазках, приготовлених з лаважу і забарвлених АЗУР-еозином, зазвичай присутні пневмоцити II типу - клітини розміром з невеликий макрофаг, з ядром округлої або неправильної форми, розташованим центрально і займає близько третини цитоплазми. Цитоплазма сіро-синього кольору, містить однотипні вакуолі, що додають їй дірчастий вигляд. Вміст вакуолей при фіксації алкогольної барвниками руйнується.
еластичні волокна
Еластичні волокна - сполучна тканина легеневої паренхіми, яка з'являється в мокроті в результаті розпаду при туберкульозі, абсцес легені, гангрени, абсцедирующей пневмонії, актиномикозе, злоякісних новоутвореннях легенів.
Незмінені еластичні волокна
Незмінені еластігескіе волокна мають вигляд звивистих тонких блискучих волокон рівномірної товщини на всьому протязі, нагадують гілки дерева, складаються в пучки, при вираженому розпаді зберігають будова альвеол. Розташовані на тлі напівзруйнованих лейкоцитів або детриту. Еластичні волокна легко ідентифікуються в нативних препаратах, приготовлених з щільних гнійних частинок або білястий крупинок на тлі гною, що представляють собою некротичні маси. Вони добре помітні в препаратах, забарвлених АЗУР-еозином.
Коралоподібні еластичні волокна
Коралоподібні волокна - різко заломлюють світло, грубоветвящіеся утворення, що нагадують корали. Об'ємні горбисті нашарування на еластичних волокнах складаються з кристалів і солей жирних кислот, які утворюються у вогнищі хронічного запалення, каверні при кавернозному туберкульозі. Якщо мокротиння з коралоподібні волокнами обробити 10% розчином гідроксиду натрію або гідроксиду калію, кристалічні освіти розчиняються, звільняючи незмінені еластичні волокна.
Звапнілі еластичні волокна
Звапнілі еластичні волокна грубі, тендітні, просочені солями вапна, розташовані на тлі Грубозерниста маси обизвествленного детриту у вигляді пунктирних ліній, що складаються з сірих, різко заломлюючих світло паличок. При приготуванні нативного препарату вони ламаються під покривним склом. Їх виявляють у нативних препаратах харкотиння при розпаді первинного туберкульозного вогнища Гона, а також при абсцесі і гангрені легені, злоякісних новоутвореннях легенів.
Елементи розпаду петрифіковане вогнища називаються тетрадой Ерліха:
• обвапнені еластичні волокна;
• звапнінням детрит;
• кристали холестерину;
• мікобактерії туберкульозу.
КРИСТАЛИ в препараті мокротиння Кристали Шарко-Лейдена
Кристали Шарко-Лейдена мають вигляд витягнутих в довжину ромбів різних розмірів. Вони утворюються з еозинофільної зернистості при її розпаді. Їх виявляють у препаратах харкотиння, приготованих з щільних жовтуватих або жовтувато-коричневих грудочок, циліндричних або розгалужених, об'ємних утворень з дрібних бронхів, і вони розташовані на тлі еозинофілів або еозинофільної зернистості. У холодильнику в мокроті, що містить еозинофіли, відбувається утворення кристалів Шарко-Лейдена. У нативних препаратах вони безбарвні, різко заломлюють світло, в забарвлених препаратах спостерігається спорідненість кристалів до еозинофіли.
кристали гематоидина
Гематоїдин - продукт розпаду гемоглобіну, утворюється в глибині гематом і великих крововиливів, осередках розпаду злоякісних новоутворень, некротизованої тканини легені. Кристали гематоидина золотисто-жовті, мають форму ромба, витягнутого в довжину, розрізнено лежать голок або складаються в пучки або зірки. У препаратах харкотиння кристали гематоидина розташовані на тлі детриту, еластичних волокон, злоякісних клітин або в осередках некрозу легеневої тканини або розпаду гематоми.
кристали холестерину
Кристали холестерину - безбарвні тонкі пластинки чотирикутної форми з обламаним у вигляді ступені кутом. Вони утворюються при застої мокротиння в порожнинах, в осередках жирової дегенерації легеневої тканини, при злоякісних новоутвореннях, абсцес легені. Розташовані на тлі макрофагів з краплями жиру, звапніння еластичних волокон і обизвествленного детриту.
ПРОБКИ Дітріха
При макроскопічному дослідженні рідини, отриманої з порожнини абсцесу легкого, в гної на дні посудини видно дрібні жовтувато-сірі зернятка. При мікроскопічному дослідженні зернятка є детрит, нафарширований макрофагами, що містять жирні кислоти у вигляді голок або крапель. Кристали жирних кислот перетворюються в краплі при підігріванні нативного препарату на полум'ї спиртівки (препарат не повинен закипіти!). Краплі жирних кислот фарбуються в синій колір при додаванні до препарату мокротиння краплі 0,5% розчину метиленового синього. Пробки Дітріха розташовані в нижньому гнійному шарі тришарової мокротиння, що утворилася в порожнинах при абсцес легені і бронхоектатичної хвороби.
мієлін
Мієлін - кінцевий продукт аутолиза клітин і слизу, являє собою некротичний детрит, що складається з фосфоліпідів. Мієлін, як і альвеолярнімакрофаги, - невід'ємна частина слизового мокротиння. Мієлінові освіти зустрічаються в слизовій мокроті або слизової частини гнійно-слизового мокротиння, лежать вільно або є фоном для альвеолярнихмакрофагів, які їх фагоцитируют, перетворюючись в білі, безбарвні клітини. Мієлінові освіти мають ніжний контур, іноді концентричну смугастість, овальну, круглу, каплевидную або почкообразний форму і різні розміри.