Збудниками кандидозу - повсюдно поширеного захворювання є дріжджеподібні гриби родаCandida (найбільш часто зустрічається відCandida albicans, рідше -Candida tropicalis, Candida pseudotropicalis, Candida krusei, Candida glabrata і т.д.). Кандидоз відноситься до типових аутоінфекція, проявляючись надмірним зростанням дріжджоподібних грибів, що заселяють шкіру, нігті, слизові оболонки, внутрішні органи. Зазвичай це захворювання виникає при патології, пов'язаної з формуванням імунодефіциту (цукровий діабет, інші ендокринні хвороби, гіпо- і авітамінози, иммунодепрессивная і променева терапія, СНІД і т.д.), при дисбактеріозі, обумовленому тривалим прийомом антибіотиків. Найбільш схильні до кандидозу діти і люди похилого віку.
Виділяють поверхневий кандидоз слизових оболонок, шкіри, нігтьових валиків і нігтів. Кандидоз слизових оболонок порожнини рота або піхви (молочниця) характеризується появою білого нальоту, нагадує згорнуту молоко
Хронічний генералізований канди-доз зазвичай розвивається у дітей з імунодефіцитними станами, має повільно прогресуючий перебіг з виникненням пневмоній, гастритів, гепатитів та ін.
При вісцеральному кандидозі уражуються шлунково-ки-м'язової тракт, органи дихання, сечовидільна система, ЦНС.
Алергічні форми кандидозу розвиваються на тлі наявного первинного вогнища кандидомікозу в результаті сенсибілізація організму, при цьому можуть виникати нові вогнища запалення, в яких збудник відсутній.
Мате-ріалом для дослідження при кандидозі є лусочки шкіри і зішкріб з ніг-тей, виділення і плівки зі слизової оболонки губ, порожнини рота, піхви, сечівника, зовнішньо-го слухового проходу, а також з кон'юнктиви. При вісцеральному кандидозі досліджують кров, спинномозкову рідину, мокротиння, випорожнення, сечу, жовч, мазки зі слизу-стих оболонок, біоптати тканин, пунктати абсцесів, секційний матеріал.
Лабораторна діагностика кандидозу включає мікроскопію нативних препаратів, виділення чистої культури гриба, виявлення в матеріалах антигенів або нуклеїнових кислот, постановку серологічних реакцій, алергічних проб.
Мікроскопічний метод - изу-чення нефарбованих і забарвлених по Граму, Романовським-Гімзою, Цілем-Нільсеном препаратів з досліджуваного матеріалу, в яких виявляють круглі або овальні почкующиеся дріжджоподібні клітини, раз-мером від 3-6 мкм, і псевдоміцелій у вигляді ланцюжків подовжених клітин (рис. 37). Деякі види дріжджоподібних грибів (C.albicans) утворюють термінальні хламідоспори.
За Грамом гриби роду Candida фарбуються в темно-фіолет-вий колір, за Цілем-Нільсеном - в синій з рожево-жовтими включеннями ліпідів, за Романовським-Гімзою - в рожево-жовтий колір з темно-фіолетовими включеннями волютина і червоним хроматиновой речовиною .
Мікологічні дослідження. Виділення чистої культури дріжджоподібних грибів про-переводять на щільних середовищах (зазвичай середовищі Сабуро, сусло-агарі, Кандида-агарі або ін.) З додаванням антибіотиків (пеніцилін, стрептоміцин і т.д.) для пригнічення росту супутніх бактерій. Через 2-3 дні культивування при 30-37 0 С утворюються круглі, діаметром до 1 см, опуклі сметаноподібні гладкі колонії білого кольору з рівними краями і глибоким вростанням в середу гіллястого деревовидного псевдомицелия.
Виокрем-ленну чисту культуру пересівають в рідкі середовища (картопляну, кукурудзяну середовища, морквяно-картопляний відвар і ін.) Для виявлення псевдомицелия, що з'являється зазвичай на 3-5 день культивування (рідше на 10-15 день і пізніше) У рідких поживних середовищах Candida утворюють рівномірне помутніння, осад або плівку на поверхні середовища. Поряд з псевдо-міцелієм, у цих грибів можна знайти істинний міцелій і хламідоспори (великі двоконтурні суперечки з зернистим вмістом) при посіві на рисовий або хламідоспори-агар з подальшим культивуванням гриба в усло-віях зниженої температури і концентрації кисню ..
Мал. 37. Збудник кандидамикоза (Candida albicans) в досліджуваному матеріалі
Бластоспори (нирки) у дріжджоподібних грибів роду Candida розташовуються нерегулярно по обидва боки міцелію, хламідоспори круглі, великі (10-20мкм), двоконтурні. C.albicans зброжує глюкозу, мальтозу, левулезу і частково га-лактозу; молоко не змінює.
Ідентифікація дріжджоподібних грибів роду Candida до рівня виду грунтується на визначенні типу філаментаціі, наявності хламідоспор, ферментативної активності (табл. 24).
Таблиця 24. Сахаролитические властивості дріжджоподібних грибів роду Candida.
Позначення: кг - розщеплення субстрату з утворенням кислоти і газу
Характерним диференціальним ознакою, що відрізняє вид С.albicans від інших видів дріжджоподібних грибів роду Candida. є їх здатність утворювати ростові трубки - трубкоподібні вирости бластоспор (ознака РТ). Для цього частину колонії гри-бов переносять в 0,5 мл сте-рільним сироватки теляти, пробірки поміщають в термостат при 37 0 С на 2,5-3,0 години, після чого готують препарат роздавленої краплі і проводять мікроскопію під великим збільшенням мікроскопа ( об'єктив х40). У ростових трубок відсутня перемичка або звуження на місці з'єднання з бластоспори, вони тонше, ніж подовжена бластоспори або псевдоміцелій у С. tropicalis.
Для диференціації з іншими грибами у культур дріжджоподібних грибів визначають наявність капсули і уреази (у кандид вони відсутні), визначають здатність асимілювати і ферментувати вугле-води (глюкозу, мальтозу, сахарозу, галактозу і ін.).
Для швидкої ідентифікації С. albicans разработаниспеціальние диски з хромогенного субстратами, що дозволяють виявив-ить специфічні для цього виду грибів ферменти L-пролінамінопептідазу і 3-галактозамідазу. На диск наносять добову культуру гриба, інкубують 30 хв при 35 ° С, потім додають 1 краплю 0,3% -го розчину гідроксиду натрію. Поява жовтого забарвлення свідчить про активність L-пролінамінопептідази. Потім додають 1 краплю коричного альдегіду; розвиток протягом 1 хв рожево-червоного забарвлення свиде-ність про наявність 3-галактозамідази. Позитивний тест на обидва ферменту в поєднанні з наявністю ростових трубок вважаються достатніми для ідентифікації С. albicans.
Серологічний метод (постановкаРСК, РА, ІФА. РНГА, ВІЕФ і ін. З парними сироватка-ми крові хворих з метою визначення специфічних антитіл) зазвичай прово-диться при вісцеральних формах кандидозу. Результати дослідження вва-ють позитивними при наростанні титру антитіл більш ніж в 4 рази в динаміці захворювання. Для РА використовуються корпускулярні антигени, для РСК очищені полісахариди, лізати або ультразвукові дезінтеграту дріжджоподібних грибів.
Алергологічний метод (переважно у хворих вісцеральним кандидозом) - постановка внутрикожной аллергичес-кою проби зі стандартним кандидозним алергеном, що представляє суспензію клітин грибів, прогріту при 80 0 С в тече-ня 2 ч. Результати реакції (гіпер-мія, папула) враховують через 24 - 48 ч. У зв'язку з широким поширенням странения сенсибілізації до антигенів грибів аллергопроба має обмежене діагностичне значення.
Генодіагностика - розроблена ПЛР для інідікаціі видоспецифического фраг-мента ДНК С. albicans.