Головна | Про нас | Зворотній зв'язок
Принцип методу відділення альбумінів від глобулінів в сироватці крові.
Одним з методів виділення альбуміну і глобуліну з розчинів є висолювання. Для висолювання різних білків потрібно неоднакова концентрація солей, що залежить від іонної сили осадителя і розміру білкової молекули. Так, глобуліни випадають з розчину при напівнасичення (50%) сірчанокислим амонієм на відміну від альбумінів, які висаліваются при повному насиченні даної сіллю. Це пов'язано з ті, що у глобулінів більше молекулярна маса, ніж у альбумінів.
При Висолювання кухонною сіллю і сірчанокислим магнієм глобуліни осідають при повному насиченні цими солями. Альбуміни висаліваются при такій же концентрації кухонної солі і сірчанокислого магнію як і глобуліни, але на відміну від глобулінів осад альбумінів випадає тільки при підкисленні розчину.
Якісна реакція на серусодержащие амінокислоти
Реакція Фоля - реакція обумовлена присутністю в білку амінокислот цистин і цистеїну, що містять слабо зв'язаної сірку.
Якісна реакція на пептидний зв'язок.
Біуретова реакція - реакція обумовлена наявністю в білках пептидних зв'язків, що з'єднують залишки амінокислот.
Якісна реакція на фосфорну кислоту.
Фосфорну кислоту відкривають молибденовой пробою і пробою з магнезіальною сумішшю.
Фізико-хімічні властивості білків.
Найбільш характерними фізико-хімічними властивостями білків є
висока в'язкість розчинів, незначна дифузія, здатність до набу-
Ханію в великих межах, оптична активність, рухливість в електричну
зації поле, низьке осмотичний тиск і висока онкотическое давле-
ня, здатність до поглинання УФ-променів при 280 нм (це властивість,
обумовлене наявністю в білках ароматичних амінокислот, іспользует-
ся для кількісного визначення білків).
Білки, як і амінокислоти, амфотерни завдяки наявності вільних
NH2- і СООН-груп. Для них характерні всі властивості кислот і підстав
Залежно від реакції середовища і співвідношення кислих і основних
амінокислот білки в розчині несуть або негативний, або пози-
ний заряд, переміщаючись до анода або катода. Ця властивість використовується при
очищенні білків методом електрофорезу.
Білки мають явно вираженими гідрофільними властивостями. раст
злодії білків мають дуже низький осмотичний тиск, високу в'язкість
і незначну здатність до дифузії. Білки здатні до набухання
в дуже великих межах. З колоїдним станом білків пов'язаний ряд
характерних властивостей, зокрема явище світлорозсіювання, що лежить в основі
кількісного визначення білків методом нефелометрії. цей ефект
використовується, крім того, в сучасних методах мікроскопії біологи-
чеських об'єктів. Молекули білка не здатні проникати через полупроні-
цаемие штучні мембрани (целофан, пергамент, колодій), а також
біомембрани рослинних і тваринних тканин, хоча при органічних
ураженнях, наприклад, нирок капсула ниркового клубочка (Шумлянского-
Боумена) стає проникною для альбумінів сироватки крові і по-
следние з'являються в сечі.
Білки належать до високомолекулярних сполук, до складу яких
входять сотні і навіть тисячі амінокислотних залишків, об'єднаних
в макромолекулярную структуру. Молекулярна маса білків коливається
від 6000 (нижня межа) до 1000000 і вище в залежності від кількості
окремих поліпептидних ланцюгів у складі єдиної молекулярної структури
білка. Такі поліпептидні ланцюга отримали назву субодиниць. Їх мовляв.
маса варіює в широких межах - від 6000 до 100000 і більше.
Про розміром і формою білкових молекул раніше судили за даними ультра-
центрифугування, подвійного променезаломлення і дифузії. Ці дані
вказували на існування в природі глобулярних (кулястих) і
фібрилярних (ниткоподібних) білків.
Природні білкові тіла наділені певною, строго заданої простий-
ранственной конфігурацією і мають ряд характерних фізико-хі
чеських і біологічних властивостей при фізіологічних значеннях темпера-
тури і рН середовища. Під впливом різних фізичних і хімічних
чинників білки піддаються згортання і випадають в осад, втрачаючи
нативні властивості. Таким чином, під денатурацією слід розуміти
порушення загального плану унікальної структури нативної молекули білка,
переважно її третинної структури, що приводить до втрати характер-
них для неї властивостей (розчинність, електрофоретичної рухливість,
біологічна активність і т.д.). Більшість білків денатуруючих при
нагріванні їх розчинів вище 50-60 ° С.
Ізоелектрична і ізоіонная точки білків
У ізоелектричної точці сумарний заряд білків, що володіють амфотер-
ними властивостями, дорівнює нулю і білки не переміщаються в електричному
поле. Знаючи амінокислотний склад білка, можна наближено визначити
ізоелектричної точки (pI); pI є характерною константою білків
У ізоелектричної точці білки найменш стійкі в розчині і легко
випадають в осад. Ізоелектрична точка білка в сильному ступені
залежить від присутності в розчині іонів солей; в той же час на її
величину не впливає концентрація білка.
Розчин білка називається ізоіонним, якщо він не містить ніяких інших іонів, крім іонізованих залишків амінокислот білкової молекули і іонів,
утворюються при дисоціації води.
Азотисті основи ДНК зазвичай варіюють у різних видів організмів, однак майже не зазнають змін у одного і того ж виду в процесі розвитку або в залежності від змін навколишнього середовища або характеру харчування. Показано також, що ДНК, виділена з різних тканин одного і того ж виду, має однаковий склад азотистих основ. Отримані кількісні співвідношення були названі правилами Чаргаффа.
1) молярна частка пуринів * дорівнює молярної частки піримідинів:
2) кількість аденіну і цитозину дорівнює кількості гуаніну та тиміну:
3) кількість аденіну дорівнює кількості тиміну, а кількість гуаніну
дорівнює кількості цитозину: А = Т і Г = Ц; відповідно
4) істотним для характеристики виду (таксономическое значення)
виявився так званий коефіцієнт специфічності, що відображає від-