Наступний етап в процесі штучного вирощування зимового опенька полягає в знезараженні субстрату. Цей етап називається стерилізацією і є одним з основних при інтенсивному вирощуванні будь-яких грибів, опенька в тому числі. Необхідність даного процесу викликана наявністю в рослинній середовищі і компонентах використовуваних для субстрату грибів величезної кількості різних патогенних мікроорганізмів і сторонньої мікрофлори.
Крім того в субстраті можуть розвиватися різні плісняві гриби-конкуренти опенка, які при зростанні гриба негативно впливають на освоєння міцелієм субстрату. Їх наявність помітно стримують розвиток і навіть можуть викликати загибель грибниці. Так як опеньок має меншу стійкість до сторонньої мікрофлори ніж, наприклад глива звичайна. вимоги якості субстрату пред'являються вище. Одним з найбільш надійних способів боротьби з патогенною середовищем в субстраті є стерилізація субстрату. Даний процес проводиться в автоклавах, де забезпечується висока (120-130 град) температура при тиску 1,2-1,5 атмосфер. Найкращий ефект дає стерилізація при вищевказаних параметрах протягом 60 хв, проте для досягнення прийнятного якості субстрату іноді досить 30-40 хв обробки, особливо якщо використовувати гарне сировину. Якщо використовуються компоненти для приготування субстрату низької якості, уражене пліснявими грибами або бактеріальними зараженнями, то процес стерилізації проводиться двічі з проміжками між обробкою 24 години.
Після стерилізації ємності з субстратом охолоджують до температури 22-25 град і переносять в бокс для інакуляціі. Для досягнення максимальної ефективності стерилізований субстрат заражають посівним матеріалом (зерновим міцелієм). Цей етап вимагає дотримання всіх правил роботи з мікроорганізмами, тому особлива увага приділяється підготовці боксу для посіву та інкубації. Ще одним важливим фактором успішного вирощування зимових опеньків є наявність високоякісного міцелію. Його зазвичай набувають в спеціалізованих лабораторіях. Міцелій опенька, як правило вирощують на зерно злакових культур. вівсі, пшениці, просі, ячмені. Слід також врахувати, що якість посівного матеріалу є важливою складовою грибного виробництва, тому потрібно дотримуватися правил зберігання, перевезення та використання міцелію опеньків. Його можна зберігати в холодильнику на нижній полиці при температурі 2-4 град не більше шести місяців в запакованому вигляді і 30-40 днів в розпакованому. При інакуляціі стерильного субстрату необхідно користуватись дезінфізірованним інструментом і дотримуватися елементарних правил фітосанітарії.
За посиланням - ремонт холодильників (лівий берег Києва, і передмістя).