Отримання матеріалу для цитологічного дослідження
Велике значення для ефективно цитологічної діагностики має отримання повноцінного матеріалу, так як неправильне взяття мазків може привести до помилкового цитологическому діагнозу. До отримання мазків жінку необхідно інформувати про значення і необхідність регулярних цитологічних досліджень, умови отримання повноцінного матеріалу.
Умови отримання повноцінного матеріалу
Рак шийки матки найчастіше розвивається в зоні трансформації, йому передують внутрішньоепітеліальні поразки (дисплазії). У зв'язку з тим, що дисплазії можуть розташовуватися на невеликих, обмежених ділянках, дуже важливо, щоб матеріал був отриманий з усією поверхні шийки, особливо з зони трансформації. Число патологічно змінених клітин в цитологічному препараті може бути по-різному, і якщо їх мало, їх можуть пропустити при скринінгу.
У жінок репродуктивного віку мазки необхідно брати не раніше, ніж на 5-й день менструального циклу і не пізніше, ніж за 5 днів до передбачуваної менструації. Не можна брати мазки протягом 24 годин після статевих зносин, спринцювання, введення в піхву медикаментів, свічок, кремів, в тому числі кремів для ультразвукового дослідження. У напрямку до лабораторії необхідно вказати прізвище, ім'я, по батькові, вік, дату початку менструального циклу, гінекологічні клінічні дані (виділення або кровотеча з статевих шляхів, гормональна терапія та інше) і дані про менструальний цикл (день циклу, постменопауза, вагітність), передбачуваний діагноз, дату отримання матеріалу, тип мазка (з екто-, ендоцервіксу, ендометрія).
Рис.9. Отримання матеріалу з шийки матки
і приготування мазків
а - за допомогою шпателя (1, 4), щітки (2, 5),
фіксація мазків
б - за допомогою щітки типу Cervex-Brush
При проведенні профілактичних оглядів (скринінгу раку шийки матки) використовують різні шпателі, в основному - модифіковані шпателі типу шпателя Ейра або щітки типу Cervex-Brush, Papette (рис.8, а, б). З діагностичною метою матеріал отримують окремо шпателями з ектоцервікса, щітками типу Cytobrush з ендоцервіксу (рис. 8, в).
Приготування, фіксація мазків, рідинна цитологія, фарбування мазків
Приготування мазків. Матеріал необхідно розподілити за мазком тонким шаром, важливо, щоб весь він виявився на склі.
Фіксація мазків. Якщо мазок передбачається фарбувати за методом Папаніколау, їх необхідно зафіксувати вологими, відразу після отримання (волога фіксація). Фіксацію проводять спеціальними аерозолями або фіксатором в крапельної формі (фіксатор наносять на вологу поверхню мазка) (рис.9). Можна зафіксувати мазки, помістивши їх після отримання в кювету з 96% етиловим спиртом на 10 - 20 хвилин. Потім мазки висушують на повітрі.
Якщо передбачається фарбування гематоксилін-еозином, можна використовувати як суху, так і вологу фіксацію мазків.
Рідинна цитологія. В даний час все більшого поширення набуває так звана рідинна цитологія. Матеріал береться в спеціальний стабілізуючий розчин (рис.8, б), після чого його центрифугують на центрифуги типу Cytospin (так звані cytospin- препарати). Весь отриманий матеріал виявляється на мазках і вдається отримати одношарові препарати хорошої якості. Можна спочатку зробити мазки стандартним способом, а що залишається на щітці матеріал помістити в стабілізуючий розчин і обробити описаним вище методом. Дуже важливою перевагою cytospin- препаратів є те, що їх можна з успіхом використовувати для проведення молекулярно-біологічних досліджень.
Зокрема виражене сплощення клітин значно покращує якість зразків для виконання іммуноцітохіміческіе реакцій і гібридизації in situ (см.Приложение)
Фарбування мазка. Кожен з перерахованих вище методів має свої переваги і недоліки. Метод фарбування по Папаніколау є найкращим для гінекологічних мазків, так як цей метод дозволяє оцінити ступінь дозрівання цитоплазми (від синьо-зеленого кольору в незрілих клітинах до рожевого в клітинах з зроговінням), завдяки вологому фіксації добре зберігаються ядра, клітинна мембрана і структура хроматину.
Перевагою методів фарбування за Романовським є чітке прокрашивание ядер, внаслідок чого добре проглядаються структури хроматину, бактеріальна флора.
Перевагою гематоксіліз-еозінових барвників є виражене забарвлення ядер з атипией, в зв'язку з чим цей метод добре використовувати для дослідження мазків при скринінгу.