ДЕЯКІ МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ БЕЗХРЕБЕТНИХ
МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ НАЙПРОСТІШИХ
Спостереження в живому стані
Одним з основних методів вивчення будови, найпростіших є спостереження їх в живому стані. Вельми важливо регулювати при цьому освітлення. У яскравому світлі при відкритій діафрагмі і піднятому освітлювачі деталі будови прозорих найпростіших майже неможливо розрізнити. Необхідно, регулюючи отвір діафрагми і положення освітлювача, кілька затемнювати поле зору. При достатньому навичці можна розглянути майже всі подробиці будови найпростішого.
Вільно живуть найпростіших необхідно розглядати в природному для них середовищі - прісної або морської води, або ж в тій рідини, в якій культивуються; паразитичних - в тканинної або порожнинної рідини господаря. У разі необхідності можна користуватися фізіологічним розчином. При тривалому вивченні паразитів теплокровних тварин слід застосовувати нагрівальний столик.
Найпростіше в краплі відповідної рідини поміщається на предметне скло і накривається покривним. При тривалому спостереженні для запобігання випаровування води і пов'язаного з цим підвищення концентрації солей краю покривного скла треба обмазувати парафіном або вазеліном.
Для тривалого спостереження слід користуватися також висячої краплею у вологій камері. Для того, щоб оберегти об'єкти від роздавлювання покривним склом, на ньому часто роблять воскові ніжки. Для цього кутами покривного скла обережно дряпають віск, попередньо розм'якшений пальцями. Завдяки цьому на кутах покривного скла утворюються невеликі воскові ніжки, що перешкоджають опусканню скла і раздавливанию об'єкта. Краще брати не чистий віск, а приготовлену при нагріванні суміш його з терпентином (2,5 г воску і 1 г терпентину).
Для цієї ж мети під покривне скло підкладають тонкі скляні нитки, волосся і т. П.
Вивчення часто ускладнює рухливість найпростіших, особливо інфузорій. Для зменшення рухливості можна перенести найпростіших в краплі не густого розчину вишневого клею або чистого гуммиарабика, але треба мати на увазі, що нерідко при цьому відбувається деформація тіла тварини. Хороші результати дає підкладання під покривне скло, волокна фільтрувального паперу, гігроскопічної вати і т. П. Завдяки тігмотаксіс інфузорії зупиняються біля волоконец часто на досить тривалий час. Нарешті, можна обережно натискати на найпростіших покривним склом, відсмоктуючи воду фільтрувальної папером. У деяких інфузорій (Стентор, сувойкі) можна домогтися теплової анестезії, дуже обережно нагріваючи їх до 30-35 °. Анестезія за допомогою звичайних анестезуючих речовин майже ніколи не вдається.
Всі предметні і покривні скла, камери, вартові скла і т. П. В які поміщаються найпростіші для спостереження, повинні бути абсолютно чистими і вживатися тільки для прижиттєвих спостережень. Мити скла потрібно спочатку милом, потім гарячою проточною водою і нарешті дистильованою водою. Якщо вони були в зіткненні з фіксаторами, отрутами і т. П. То їх не можна вживати для живих найпростіших. Скло слід витирати хустками, вживаними виключно для цієї мети. Недотримання всіх цих правил тягне за собою загибель найпростіших.
Для прижиттєвого вивчення будови найпростіших слід широко користуватися темним полем, в якому ряд деталей їх будови видно значно краще, ніж при звичайному освітленні (джгути, вії, мембранелли, цирри, скелетні нитки, різні зерна і т. Д.).
Для вивчення струмів рідини, викликаних рухом найпростіших, і процесів утворення в них травних вакуолей в воду треба додавати мелкорастертий кармін або туш (не рідким, натерти з палички сухої туші!). Колір суспензії повинен бути сірим для туші і світло-рожевим для карміну. Через 10-15 хвилин в тілі інфузорій будуть добре помітні чорні або червоні травні вакуолі.
На закінчення слід ще раз вказати, що вивчення найпростіших в живому стані абсолютно необхідно. Будь-яка, навіть найдосконаліша фіксація тягне за собою згортання білків і пов'язане з цим хоча б деяка зміна структур. Тому надзвичайно бажано у всіх випадках порівнювати фіксований і живий об'єкт. При спостереженні багатоклітинних це часто дуже важко, а в багатьох випадках і просто неможливо. Виділення клітин або тканин з організму багатоклітинного тваринного вже само по собі пошкоджує клітини і якщо виключити спостереження культури тканин і деяких прозорих тварин, то зазвичай доводиться спостерігати не живі, а переживають клітини. Найпростіші мікроскопічно малі, прозорі, можуть довго жити в умовах, що дозволяють вести спостереження під мікроскопом і тому являють собою чудові об'єкти для вивчення в живому стані і експериментування. Потрібно використовувати при цьому всі можливості, які дає сучасна мікроскопія (дослідження в світлі, що проходить, темне поле, фазовоконтрастна мікроскопія, аноптрального мікроскоп, вітальне фарбування і т. Д.)